红细胞裂解液
极速无菌裂解 完整保留目标淋巴细胞
一键复制信息
- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
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一、 产品介绍
本产品为无菌级别的红细胞裂解液,含有有效成分氯化铵。本品优化用于处理人或小鼠等的血液或组织样本,可利用渗透压原理将无核的红细胞裂解并离心除去,同时几乎不会影响样本中的淋巴细胞等其他有核细胞。但本品不适用于有核红细胞(如:鸟类的成熟红细胞)的裂解。
三、 保存条件
请于 4℃冰箱保存,可稳定保存 1 年。常温运输。
四、 使用说明
补充说明:以下裂解反应也可在室温中进行。
血液样本
1. 收集全血于含抗凝剂的离心管中,400-500×g 离心 5min,离心后,将上清液吸出舍弃。
2. 在离心后的细胞沉淀中加入6-10 倍体积的本品,使用移液枪轻轻混匀,冰上放置1-2min,裂解过程中适当摇晃离心管。
注意:小鼠的血液样本可裂解 1-2 min;而人的血液样本可裂解4-5min。
3. 裂解后,以 400×g 在 4ºC 离心 5 min,此时可见上清呈现红色,使用移液枪将上清液吸出舍弃。
4. 可选步骤:如裂解未充分,可以重复步骤 2-3 一次。但是一般情况下极少量的红细胞对后续的实验无影响。
5. 在样本中加入5 倍体积的HBSS 或PBS,重悬细胞团块以洗涤细胞。4ºC 400×g 离心3min,离心后吸出并舍弃上清液。
可选:重复洗涤步骤一次。
6. 舍弃上清液后,使用所需溶液重悬细胞沉淀,即得到除去红细胞的样本。
可选:省略洗涤步骤的血液样本处理(如血液样本体积很小可选本部分步骤操作)1. 在全血中加入 10 倍体积的本品,轻轻混匀,冰上裂解 4-5 min,期间适当摇晃管子。
注意:小鼠的血液可裂解 4-5 min;人的外周血样本可裂解 10 min,裂解请勿超过 15 min。
2. 加入20-30mL(可根据样本体积调整用量)HBSS 或PBS,混匀。4ºC 400×g 离心5min,上清液呈现红色,吸出并舍弃红色的上清液。
3. 可选步骤:如裂解未充分,可重复裂解步骤一次。但是一般情况下微量的红细胞对后续的实验无影响。
4. 舍弃上清后,使用所需溶液重悬细胞沉淀,即得到除去红细胞的样本。
组织样品
1. 将组织样本消化处理得到单细胞悬液,并离心舍弃上清液。
2. 在样本中加入 3 倍-5 倍体积的本品,混匀,冰上裂解 1-2 min ,期间可适当摇晃管子。裂解后 400×g ,4℃离心 5 min, 此时上清液呈现红色,吸出并舍弃红色的上清液。
3. 可选步骤:如裂解未充分,可重复步骤 2 一次。但是一般情况下极少量的红细胞对后续的实验无影响。
4. 在样本中加入 5 倍体积的 HBSS 或 PBS ,重悬细胞团块以洗涤细胞。400×g ,4ºC 离心3 min ,舍弃上清液。
可选:重复洗涤步骤一次。
5. 舍弃上清液后,使用所需溶液重悬细胞沉淀,即得到除去红细胞的样本。
可选:省略洗涤步骤的组织样本处理
1. 将组织样本消化处理得到单细胞悬液,并离心舍弃上清液。
2. 在样本中加入 5 倍体积的本品,(如 200 μL 细胞沉淀可加入 1 mL 的本品)混匀,冰上放置 1-2min ,期间可适当摇晃管子。
3. 加入 15-20 mL(可根据样本体积调整用量)的 PBS 或 HBSS ,混合均匀。
4. 400×g ,4℃离心 5min, 上清液呈现红色,吸出并舍弃红色的上清液。
5. 可选步骤:如裂解未充分,可重复步骤 2-4一次。但是一般情况下极少量的红细胞对后续的检测无影响。
6. 舍弃上清液后,使用所需溶液重悬细胞沉淀,即得到除去红细胞的样本。
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二、 组成成分
货号 名称 规格 100-300 红细胞裂解液 100 mL -
五、 注意事项
1. 本品为无菌产品,处理过的细胞后续可用于其他无菌条件的实验。
2. 本品不适用于有核红细胞(如:鸟类的成熟红细胞)的裂解。
3. 实验过程中,请佩戴口罩和手套进行操作。
4. 本产品仅供科研使用,请勿用于体外诊断或其他治疗。
关键词
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