RecomAb™ anti-6xHis tag mAb [Clone RHS-21]
应用:
WB, ICC/IF, IHC-P, FC, IP, CHIP
种属反应性:
Tag
宿主种属:
Rabbit
一键复制信息
- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
-
NeoMab® · RecomAb™ Anti-6xHis Tag Antibody (RHS-21) · NM0043
产品简介
NeoMab® RecomAb™ 兔重组抗 6xHis 标签单克隆抗体(克隆号 RHS-21),采用重组单克隆抗体制备技术,批次间高度一致。未标记形式,覆盖 WB、ICC/IF、IHC-P、FC、IP、ChIP 等多种应用场景,适用于表达含 6×组氨酸(6xHis/His₆)标签的重组蛋白检测、纯化与功能研究。2-8℃ 短期保存,-20℃ 长期保存。
6xHis tag(六聚组氨酸标签)是重组蛋白研究中应用最广泛的亲和标签之一,由 6 个连续的组氨酸残基组成,可融合于靶蛋白 N 端或 C 端,适用于细菌、酵母、昆虫细胞及哺乳动物细胞等多种表达系统。除用于 IMAC 亲和纯化外,抗 His 标签抗体也是 Western blot、免疫沉淀等实验中的重要检测工具。
核心参数
参数 规格 品牌 NeoMab® RecomAb™ 货号 NM0043(50 µL / 100 µL) 克隆号 RHS-21 抗体类型 重组单克隆抗体(Recombinant monoclonal) 宿主 Rabbit 反应性 Tag(6xHis 标签,N 端 / C 端融合均可识别) 同种型 Rabbit IgG 标记物 未标记(Unconjugated) 浓度 Lot-dependent(详见批次质检报告) 制剂 PBS(pH 7.2),50% 甘油,0.03% ProClin 300 形态 液体 应用 WB(1:1000)、ICC/IF(1:100)、IHC-P(1:1000)、FC(1:1000)、IP(1:30)、ChIP(2 µg for 25 µg chromatin) 保存 2-8℃ 短期保存;-20℃ 长期保存,避免反复冻融 运输 2-8℃ 冰袋运输
6xHis Tag 背景
6xHis tag(六聚组氨酸标签,又称 Hexa-His tag、Polyhistidine tag、HHHHHH tag)是重组蛋白科学中应用最广泛、功能最多样的亲和标签之一。该短肽序列由 6 个连续的组氨酸残基组成,可通过基因工程手段融合到靶蛋白的 N 端或 C 端,在细菌、酵母、昆虫细胞及哺乳动物细胞等多种表达系统中广泛使用。
6xHis tag 的纯化原理基于固定化金属离子亲和色谱(IMAC):组氨酸残基的咪唑环可与层析树脂上固定的镍、钴等过渡金属离子配位结合,从而实现重组蛋白的一步亲和纯化。由于标签体积仅 6 个氨基酸,通常不会影响靶蛋白的结构和功能,且免疫原性低、在天然和变性条件下均可使用,因此成为研究者最常用的标签选择之一。
除纯化用途外,抗 6xHis 标签抗体还可广泛用于:
• Western blot:鉴定重组蛋白表达、检测纯化产物
• 免疫沉淀(IP):富集 His 标签融合蛋白
• 免疫荧光(ICC/IF):细胞内重组蛋白定位研究
• 免疫组化(IHC-P):石蜡组织切片中重组蛋白分布检测
• 流式细胞术(FC):细胞表面或胞内 His 标签蛋白检测
• 染色质免疫沉淀(ChIP):His 标签融合转录因子与 DNA 相互作用研究
实验应用参考
应用 推荐稀释比例/用量 说明 Western blot (WB) 1:1000 常规室温孵育 1 h 或 4℃ 过夜 ICC/IF 1:100 细胞爬片/玻片染色,需配合二抗 IHC-P 1:1000 石蜡切片,抗原修复建议使用柠檬酸盐缓冲液(pH 6.0) Flow Cytometry (FC) 1:1000 需配合荧光标记二抗使用 Immunoprecipitation (IP) 1:30 建议配合 Protein A/G 磁珠/琼脂糖 ChIP 2 µg for 25 µg chromatin 检测 His 标签融合转录因子与 DNA 的结合 注:以上为推荐起始稀释比例,最佳工作浓度需根据具体实验体系进行滴定优化。
注意事项
1. 使用前轻轻混匀,避免剧烈振荡。
2. 抗体工作浓度因样本和实验体系而异,建议做滴定实验确定最适浓度。
3. 长期保存请置于 -20℃,分装保存以避免反复冻融。
4. 制剂中含 50% 甘油,-20℃ 不会完全冻结,取用方便。
5. 本产品仅用于科研,不可用于体外诊断。
常见问题 FAQ
Q: RHS-21 可以识别 N 端融合和 C 端融合的 6xHis 标签吗?
A: 可以。6xHis 是短肽标签,暴露在蛋白表面,无论融合在靶蛋白的 N 端还是 C 端,RHS-21 均能有效识别。
Q: 50 µL 和 100 µL 规格怎么选?
A: 两者浓度相同,区别在于包装规格。50 µL 适合预实验或少量检测,100 µL 适合常规使用。抗体浓度为批次依赖(Lot-dependent),具体以批次质检报告为准。
Q: 重组单抗和普通单抗有什么区别?
A: 重组单克隆抗体(RecomAb™)通过基因重组技术表达制备,批次间高度一致、性能稳定,避免了传统杂交瘤单抗可能出现的批次差异和细胞系丢失风险。
Q: 可以用在变性条件下吗?比如尿素或盐酸胍处理的样品?
A: 6xHis 标签本身由 6 个组氨酸组成,不存在高级结构,在变性条件下仍能被识别。RHS-21 是 IgG 型抗体,强烈变性条件(如 8 M 尿素、6 M 盐酸胍)可能导致抗体本身失活,建议在天然或温和变性条件下使用。
Q: 这个抗体有荧光标记或 HRP 标记的版本吗?
A: NM0043 为未标记版本,如需要荧光标记(如 FITC、PE、APC、AF488、AF647 等)或 HRP 标记的抗体,可详询客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com。
Q: 6xHis 和 8xHis / 10xHis 标签有什么区别?
A: 6xHis 是最常用的长度,兼顾了亲和纯化效率和对蛋白结构的影响。8xHis 或 10xHis 标签结合力更强,适合低表达量或难纯化蛋白的纯化,但空间位阻相对较大。RHS-21 克隆号主要识别 6xHis 标签。
技术支持
NeoMab® 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,专注重组抗体与标签抗体研发。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com
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