PE anti-GGGGS Linker Antibody（RAGS-23）
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NeoMab® · PE Anti-GGGGS Linker Antibody (RAGS-23) · 12-7007-12 / 12-7007-15
产品简介
NeoMab® PE 标记兔抗 GGGGS Linker 单克隆抗体（克隆号 RAGS-23），200 µg/mL 高浓度，推荐用量 0.1 µg/百万细胞，Ex/Em 565/574 nm，适用于表达 GGGGS（G4S）linker 的融合蛋白（如 CAR-T、ScFv 等）的流式细胞术检测。2-8℃ 避光保存，有效期两年。
GGGGS linker（又称 G4S linker）是由 4 个甘氨酸重复序列后接 1 个丝氨酸组成的柔性连接肽，因其柔韧性好、抗蛋白酶降解的特点，广泛用于重组融合蛋白的构建，尤其是 CAR-T 细胞表面表达的单链抗体可变区（ScFv）结构域中（PMID: 23581628; 36874404）。
核心参数
参数 规格 品牌 NeoMab® 货号 12-7007-12（25 µg）/ 12-7007-15（100 µg） 克隆号 RAGS-23 宿主 Rabbit 反应性 GGGGS Linker（G4S linker），识别 G4S×2/3/4/5 重复序列 同种型 Rabbit IgG 抗体类型 单克隆抗体 标记物 PE Ex/Em 565 / 574 nm 抗体浓度 200 µg/mL 推荐用量 0.1 µg/百万细胞（100 µL 染色体系），或 1:500 稀释使用 应用 Flow Cytometry（流式细胞术） 保存 2-8℃ 避光保存，不可冷冻，有效期两年
GGGGS Linker 背景
GGGGS linker（Gly-Gly-Gly-Gly-Ser，又称 G4S linker）是一种广泛使用的柔性连接肽，由 4 个甘氨酸（Gly）重复后接 1 个丝氨酸（Ser）组成。甘氨酸侧链仅为氢原子，赋予 linker 极高的构象柔韧性；丝氨酸的羟基则增强了 linker 的亲水性和稳定性（PMID: 3045807）。
由于 GGGGS linker 抗蛋白酶降解、不影响融合蛋白各结构域的天然折叠，它在重组蛋白工程中被广泛应用，尤其在以下场景中：
CAR-T 细胞：CAR 结构中 ScFv 与铰链区/跨膜区之间的连接（PMID: 23581628; 36874404）。
ScFv 抗体：重链可变区（VH）与轻链可变区（VL）之间的连接肽。
融合蛋白：多功能融合蛋白中不同功能结构域之间的柔性间隔。
本抗体 RAGS-23可识别 G4S×2、G4S×3、G4S×4 及 G4S×5 重复序列，覆盖大多数 CAR-T 和 ScFv 构建中使用的 linker 长度。
流式染色流程
一、制备单细胞悬液
收集表达 CAR 的目标细胞（如 CAR-T 细胞、CHO-S 稳定转染细胞系等），用 PBS 洗涤一次，调整细胞浓度为 5-10 × 10⁶ cells/mL，每管分装 100 µL（5-10 × 10⁵ cells）。
二、Fc 受体封闭（选做）
如样本中存在单核/巨噬细胞等表达 Fc 受体的细胞，可加入 Fc 受体封闭剂，室温孵育 5-10 min，不用洗涤。
三、抗体染色
每管加入 0.1 µg RAGS-23 PE 抗体（或按 1:500 稀释），轻轻混匀，冰上避光孵育 20-30 min。
四、洗涤
加入 1 mL 细胞染色缓冲液洗涤 1 次，350-500×g 离心 5 min，弃上清。
五、重悬与检测
细胞重悬于 200-300 µL 细胞染色缓冲液或 PBS 中，上机检测。如不能及时测试，保存于 4℃ 并于 4 小时内完成检测。
对照类型 用途 空白对照（未染色） 调节电压 单染/单阳性对照（转染阳性细胞） 调节补偿 同型对照（兔 IgG PE） 消除背景染色干扰 FMO（荧光扣除）对照 确定设门准确性
检测结果示例
PE anti-GGGGS Linker Antibody（RAGS-23）抗体（1:500 稀释）可特异性识别 CHO-S.CD19 CAR 稳定细胞系表面的 GGGGS linker，阳性细胞呈现明显的 PE 荧光信号右移，未转染 CHO-S 细胞背景信号低。
注意事项
1. 使用前快速离心抗体管，回收管壁上的液体。
2. 流式抗体使用浓度因样本而异，建议做滴定实验确定最适浓度。
3. PE 标记物对光敏感，染色和孵育过程请避光操作。
4. 本产品仅用于科研，不可用于体外诊断。
常见问题 FAQ
Q: RAGS-23 克隆号识别哪些 GGGGS 重复长度？
A: RAGS-23 可识别 G4S×2、G4S×3、G4S×4 及 G4S×5 重复序列，覆盖绝大多数 CAR-T ScFv 和融合蛋白中使用的 linker 长度。
Q: 12-7007-12（25 µg）和 12-7007-15（100 µg）怎么选？
A: 两者抗体浓度均为 200 µg/mL，区别在于包装规格。25 µg 适合预实验或小规模检测，100 µg 适合常规使用。按 0.1 µg/测试计算，25 µg 约可用 250 次，100 µg 约可用 1000 次。
Q: PE 通道和哪些荧光素不冲突？
A: PE Ex/Em 565/574 nm，对应流式细胞仪的 PE 通道（FL2）。多色方案中可与 FITC（FL1）、PerCP/Cy5.5（FL3）、APC（FL4）等搭配使用，注意补偿调节。
Q: 可以用于人源或鼠源样本吗？
A: GGGGS linker 是人工设计的连接肽序列，不存在于天然人源或鼠源蛋白中。本抗体适用于任何物种来源的表达 GGGGS linker 融合蛋白的细胞系（如 CAR-T 细胞、CHO 稳定细胞系、HEK293 等），只要细胞表达了含 GGGGS linker 的目的蛋白即可检测。
技术支持
NeoMab® 隶属信天翁生物科技（广州）有限公司，专注重组抗体与流式抗体研发。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com
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保存：2-8℃避光保存。冰袋运输。
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