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为什么要加loadingbuffer才能跑胶?不加可以吗？
发布时间:2025-08-01
核酸电泳实验中，一般需要将核酸和上样缓冲液按照一定的比例，添加到样品槽中，然后才开启电泳。
核酸电泳实验中，一般需要将核酸和上样缓冲液按照一定的比例，添加到样品槽中，然后才能开启电泳。大家有没有想过核酸要加loadingbuffer才能跑胶呢?
样品本身的密度通常低于电泳槽中的电极缓冲液，如果直接将低密度的样品加入上样孔中，样品可能会漂浮、扩散，无法有效地沉入孔底，导致上样不均匀、样品溢出孔外甚至完全无法上样。
Loading Buffer 中含有高浓度的甘油或蔗糖，它们大大增加了样品的密度，使样品能够沉入上样孔的底部，形成清晰、集中的样品层。
Loading Buffer 含有追踪染料，比如GelRed。
指示上样： 染料的颜色使操作者能清晰地看到样品是否被准确加入上样孔中，避免漏加或错加。
监控电泳进程： 通过观察染料迁移的位置，可以判断电泳是否正在进行以及大概的进度，避免样品跑出凝胶。
很多核酸Loading Buffer含有低浓度的EDTA（乙二胺四乙酸），可以抑制DNase的活性，防止样品中的核酸在电泳前或电泳过程中被降解。
Buffer本身也提供一定的缓冲能力（通常pH在8.0左右），有助于维持核酸的稳定性。
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