为什么用OD600值表示菌液浓度?原来它的原理这么简单！
发布时间:2025-08-08
OD600测量通过测量特定波长（这里是600纳米）的光穿过样品后的强度损失（即被吸收和散射的部分）来量化样品的浊度。
测量得到的数值是吸光度（Absorbance, A） 或光密度（Optical Density, OD），它表示样品对光的阻挡程度。
OD600 = log₁₀(I₀ / I)
I₀：入射光强度（穿过空白对照液，如新鲜培养基）
I：透射光强度（穿过待测菌悬液）
浊度与细胞密度的相关性
当光穿过含有微生物（如细菌、酵母）的液体（菌悬液）时，细胞会散射和吸收光线。
细胞浓度越高，悬浮液看起来就越浑浊（浊度越高），能够穿透液体到达检测器的光就越少。
因此，悬浮液的浊度（Turbidity） 与其中的细胞密度（Cell Density） 成正比关系。
OD600越高，菌液中细胞的数量越多，OD600越低，菌液中细胞的数量越少。
为什么选择600纳米波长？
01
业内共识
600 nm 作为测量细菌浓度的标准波长在微生物学研究领域已有很长的历史并被广泛接受，便于不同实验室之间的数据比较。实验证实 600 nm 下 OD 值与菌浓度关联最佳（如 OD=1.0 ≈ 1×10⁹ CFU/mL），兼具灵敏度与宽线性范围。
02
细菌在 600 nm 波段无特征性光吸收
该波长下检测的吸光度变化可归因于细胞散射效应，与生物量浓度形成特异性关联。
03
背景干扰最小化
培养基组分（如胰蛋白胨、酵母提取物）在紫外区有强吸收，而在600 nm处吸收极弱，显著降低背景干扰。
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