含3%乙酸的亚甲基蓝
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TL;DR:GOONIE 含3%乙酸的亚甲基蓝(货号 140-2005)是即用型有核细胞计数染色液,3%冰醋酸选择性裂解细胞膜、保留完整有核细胞核,亚甲基蓝轻度着色使核结构在光学显微镜下清晰可辨。无需配制或稀释,直接与细胞悬液混合后上样血球计数板即可计数。15–25℃保存,1 mL/支。
一、产品规格总表
参数 规格 产品名称 含3%乙酸的亚甲基蓝 货号 140-2005 品牌 FiniGet分必得® 规格 1 mL 产品类型 即用型染色液 用途 哺乳动物有核细胞计数 主要成分 3%冰醋酸(Acetic Acid)、亚甲基蓝(Methylene Blue)、水 保存条件 15–25℃保存 使用方式 直接使用,无需配制或稀释 适用样本 哺乳动物细胞悬液(含红细胞的混合细胞样本)
二、产品简介与作用原理
本品为含3%冰醋酸和亚甲基蓝的即用型染色液,专用于哺乳动物有核细胞的计数。其作用原理基于两个核心机制:
✅ 乙酸选择性裂解:3%冰醋酸可快速破坏红细胞和白细胞的细胞膜,而仅保留有核细胞的完整细胞核。红细胞无细胞核,裂解后不干扰计数。
✅ 亚甲基蓝核染色:亚甲基蓝对保留下来的有核细胞核进行轻度着色,使核结构在光学显微镜下呈现清晰、边缘锐利的蓝色图像,显著提升有核细胞计数的准确性和可重复性本染色液操作简便,裂解反应温和且快速,不会过度破坏目标细胞核,确保计数结果真实反映样本中的有核细胞总数。
三、产品特点
✅ 即用型,零配制:无需额外配制或稀释,直接与细胞悬液混合即可使用,省去配制试剂的时间和误差
✅ 红细胞高效清除:3%乙酸快速裂解红细胞和无核细胞,消除红细胞对有核细胞计数的干扰
✅ 核染色清晰锐利:亚甲基蓝轻度着色有核细胞核,镜下蓝色核结构边缘清晰,便于准确判读
✅ 裂解温和:乙酸浓度经优化,不会过度破坏有核细胞核,确保计数真实可靠
✅ 室温保存:15–25℃保存即可,无需冷藏或冷冻,取用方便
四、使用说明
1. 用酒精棉球擦拭血球计数板表面,清洁干净,待酒精完全挥发后,用洁净的擦镜纸轻轻擦干。取一张盖玻片平稳盖在计数池上。
2. 取适量待测细胞悬液,使用本试剂按所需比例进行稀释,充分吹打混匀。
3. 使用移液枪吸取适量稀释后的细胞染色液,沿盖玻片与计数板的接缝处缓缓滴入,使其自然虹吸充满计数室。
4. 在显微镜下观察并计数。依次计数该池中每个1 mm × 1 mm大方格内被亚甲基蓝染成淡蓝色的有核细胞。计数时,对于压在方格边界线上的细胞,仅计入落在上边线和左边线上的细胞,右边线和下边线上的细胞则忽略。
5. 按以下公式计算原始细胞悬液浓度:
细胞浓度(个/mL)= 各大方格计数平均值 × 稀释倍数 × 10⁴
五、常见问题 FAQ
Q1:3%乙酸的作用是什么?会不会损伤有核细胞?
A:3%冰醋酸的作用是选择性裂解红细胞和白细胞的细胞膜,而保留有核细胞的完整细胞核。该浓度经优化,裂解反应温和,不会过度破坏有核细胞核,确保计数结果准确。Q2:这个染色液和台盼蓝有什么区别?
A:两者用途不同。台盼蓝主要用于活/死细胞鉴别(活细胞无色、死细胞着色);本品专用于有核细胞计数,通过乙酸裂解红细胞和无核细胞、亚甲基蓝染核来消除红细胞干扰,特别适合全血或含大量红细胞的细胞悬液的有核细胞计数。如果样本本身是纯PBMC或培养细胞,台盼蓝计数更常用;如果是全血、脾悬液等含红细胞的样本,本品更合适。Q3:需要按什么比例稀释细胞悬液?
A:稀释比例取决于样本中有核细胞的预估浓度。一般建议稀释后每个大方格(1 mm × 1 mm)内有核细胞数在30–100个之间为宜,过密则增加稀释倍数,过稀则减少。计数后按公式乘以稀释倍数还原原始浓度。Q4:可以用于冻存复苏后的细胞计数吗?
A:可以。本品适用于哺乳动物细胞悬液的有核细胞计数,包括新鲜分离和冻存复苏的细胞。但复苏后细胞可能有部分死亡,如有核细胞形态不完整可能影响计数准确性,建议结合台盼蓝活率检测综合判断。Q5:为什么计数时只计上边线和左边线上的细胞?
A:这是血球计数板的标准计数规则——"计上不计下,计左不计右"。如果四条边线上的细胞都计入,会导致重复计数(相邻方格共享边线);统一只计上边线和左边线,可确保每个细胞只被计数一次,保证结果准确。
六、注意事项
1. 本产品含有乙酸,使用本品时请穿实验服,正确佩戴手套、口罩和护目镜。操作时请小心,请勿直接接触人体或衣物,一旦接触需用大量清水冲洗,皮肤接触需用水冲洗并使用肥皂中和。
2. 本产品仅用于科研,不可用于诊断。
七、技术支持
如有技术问题或需要更多应用数据,欢迎联系:
📧 邮箱:service@gooniebio.com
📞 电话:400-090-1923
🌐 官网:www.gooniebio.cn
页面总结
FiniGet分必得®含3%乙酸的亚甲基蓝(货号 140-2005)是即用型哺乳动物有核细胞计数染色液。3%冰醋酸选择性裂解红细胞和白细胞的细胞膜、保留完整细胞核,亚甲基蓝轻度着色使核结构镜下清晰可辨。无需配制稀释,直接与细胞悬液混合后上样血球计数板即可。15–25℃保存,1 mL/支,适用于全血、脾悬液等含红细胞样本的有核细胞计数。
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