RecomAb™ anti-V5 tag mAb [Clone MV5-S1]
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TL;DR:RecomAb™ anti-V5 tag mAb [Clone MV5-S1](货号 NM0010)是小鼠来源的IgG2a单克隆抗体,特异性识别V5表位标签(GKPIPNPLLGLDST,14个氨基酸,源自水疱性口炎病毒糖蛋白)。V5标签是分子生物学中常用的小分子肽标签,NM0010可跨种属检测所有带V5标签的融合蛋白。验证应用覆盖WB(1:1,000-1:5,000)、ELISA(1:1,000-1:5,000)、IHC-Fr(1:200)、FC(1-5 μg/10⁶ cells)及IP(1:20-1:50)。
一、产品规格总表
参数 规格 产品全称 RecomAb™ anti-V5 tag mAb [Clone MV5-S1] 货号 NM0010 规格 50 μL / 100 μL 宿主/亚型 Mouse IgG2a 克隆号 MV5-S1 反应性 所有带V5标签的融合蛋白(跨种属通用,species independent) 标签序列 GKPIPNPLLGLDST(V5 tag, 14 aa) 偶联物 未偶联(Unconjugated) 验证应用 WB, ELISA, IP, IHC-Fr, FC WB推荐稀释度 1:1,000 - 1:5,000 ELISA稀释度 1:1,000 - 1:5,000 IHC-Fr稀释度 1:200 流式用量 1-5 μg / 10⁶ cells IP稀释度 1:20 - 1:50 配方 PBS (pH 7.2), 50%甘油, 0.03% Proclin300 储存条件 -20℃保存,避免反复冻融
二、靶标背景:V5标签——源自VSV的高特异性小分子标签
V5标签是一段由14个氨基酸组成的短肽标签(序列GKPIPNPLLGLDST),源自水疱性口炎病毒(Vesicular Stomatitis Virus, VSV)糖蛋白的C端第14个氨基酸区域。由于该序列来源于病毒蛋白,哺乳动物细胞中不存在内源性同源序列,因此抗V5抗体具有极高的特异性,几乎不产生非特异背景。
V5标签体积小巧,融合至目标蛋白的N端或C端后,通常不会影响靶蛋白的空间结构、生物学活性、亚细胞定位或翻译后修饰。自1990年代被引入以来,V5标签已成为重组蛋白表达、纯化和检测中最常用的表位标签之一,广泛应用于Western Blot、免疫沉淀(IP)、免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)和流式细胞术等实验技术。
V5标签的核心优势:
✅ 哺乳动物无内源同源序列,抗体特异性极高,背景极低
✅ 14 aa小体积,不影响靶蛋白结构与功能
✅ 跨种属通用——只要蛋白带有V5标签即可检测
✅ 与HA、Flag、Myc等标签兼容,可构建多标签共表达系统
三、克隆信息:MV5-S1
NM0010采用MV5-S1克隆,为小鼠IgG2a亚型单克隆抗体。IgG2a是小鼠抗体中与Protein A/G结合能力最强的亚型之一,在免疫沉淀(IP)实验中具有天然优势——与Protein A/G琼脂糖珠的结合效率高,沉淀效率好,非特异结合少。
MV5-S1克隆特异性识别V5标签的GKPIPNPLLGLDST序列,在WB和ELISA中具有较宽的线性检测范围(1:1,000-1:5,000),可灵活适配不同表达水平的靶蛋白检测需求。在IP应用中,推荐稀释度1:20-1:50,适合中低丰度蛋白的富集。
四、种属交叉反应
适用范围 反应性 备注 V5标签融合蛋白 ✅ Verified species independent,所有外源性V5标签蛋白均可检测 内源蛋白 ❌ 不适用 V5标签源自VSV病毒,哺乳动物内源蛋白不含此表位 注:NM0010的反应性标注为"species independent",即不受种属限制。无论靶蛋白来源于人、小鼠、大鼠或其他种属,只要融合了V5标签序列即可检测。该抗体不识别任何内源性非标签蛋白。
五、相关产品
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六、常见问题 FAQ
Q1:NM0010和NM0007(anti-HA)有什么区别?
A:两者识别不同的表位标签。NM0010识别V5标签(14 aa,源自VSV病毒),NM0007识别HA标签(9 aa,源自流感病毒)。两者均为跨种属通用的标签抗体,常配合使用构建双标签共表达系统,用于co-IP验证或蛋白相互作用研究。选择取决于你的表达载体使用的标签类型。Q2:NM0010可以用于IP实验吗?效果如何?
A:可以。NM0010为Mouse IgG2a亚型,与Protein A/G的结合能力强,IP推荐稀释度1:20-1:50。IgG2a亚型在IP中通常比IgG1具有更高的沉淀效率和更低的重链/轻链背景干扰。Q3:流式实验中抗体用量如何确定?
A:流式推荐用量为1-5 μg抗体/10⁶细胞。首次使用建议以2 μg/10⁶ cells为起点,根据靶蛋白表达水平和信号强度在1-5 μg范围内优化。V5标签用于胞内蛋白时需固定破膜后染色。Q4:IHC-Fr是什么意思?和IHC-P有什么区别?
A:IHC-Fr指冰冻切片免疫组化(Immunohistochemistry on Frozen sections),IHC-P指石蜡切片免疫组化(Paraffin sections)。NM0010验证的是冰冻切片,推荐稀释度1:200。石蜡切片需经过抗原修复步骤,该抗体是否适用未经测试。Q5:WB稀释度范围1:1,000-1:5,000如何选择?
A:高表达蛋白可用1:5,000(降低背景、节省抗体),低表达蛋白建议1:1,000(提高灵敏度)。首次使用建议1:2,000作为起始条件,根据条带信号调整。
七、技术支持
如有技术问题或需要更多应用数据,欢迎联系:
📧 邮箱:service@gooniebio.com
📞 电话:400-090-1923
🌐 官网:www.gooniebio.cn
页面总结
NM0010(RecomAb™ anti-V5 tag mAb [Clone MV5-S1])是小鼠IgG2a单克隆抗体,特异性识别V5表位标签(GKPIPNPLLGLDST,14 aa),跨种属通用。验证5种应用:WB/ELISA 1:1,000-1:5,000、IHC-Fr 1:200、FC 1-5 μg/10⁶ cells、IP 1:20-1:50。IgG2a亚型在IP中与Protein A/G结合效率高,沉淀效果好。配套NM0007(anti-HA)可构建V5+HA双标签系统,适用于蛋白相互作用和共表达研究。
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保存:2-8℃避光保存。冰袋运输。
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