ezFect DNA transfection reagent转染试剂
非脂质体毒性低,常用工具细胞转染效率达90%
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- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
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产品简介
TL;DR：GOONIE 100-505 ezFect™ DNA transfection reagent 是新一代非脂质体阳离子聚合物转染试剂，通过与带负电荷的核酸形成稳定复合物实现高效瞬时转染，常用工具细胞转染效率达 80%–90%，细胞毒性低；可在含血清与抗生素的完全培养基中直接操作，无需更换 Opti-MEM® 等无血清培养基；适用于贴壁和悬浮细胞，4℃ 保存，有效期 12 个月。
核心参数总表
参数 规格 品牌 GOONIE 货号 100-505 产品名称 ezFect™ DNA transfection reagent 类型 非脂质体阳离子聚合物转染试剂 适用核酸 质粒 DNA、siRNA 适用细胞 贴壁细胞、悬浮细胞（HEK293T、HEK293F、Expi293、CHO、HeLa 等） 转染效率 常用工具细胞 80%–90% 血清兼容 是，无需更换 Opti-MEM® 等无血清培养基 动物源成分 无（Animal Origin-Free, AOF） 最大质粒 13 kb 储存 4℃，有效期 12 个月；长期不使用可 -20℃ 保存 运输 常温运输 灭菌 0.22 µm 滤膜过滤除菌 目录价 1 mL ¥1,820
产品特点
转染效率高：对 HEK293T、HEK293F、Expi293、CHO、HeLa 等常用工具细胞系，按 DNA(μg) : 试剂(μL) = 1:1 至 1:2 使用，转染效率达 80%–90%。
非脂质体架构：高电荷阳离子聚合物，不同于脂质体转染试剂，对脂质体不耐受的细胞（如部分原代细胞、神经细胞）更加友好，细胞毒性低。
血清兼容性好：转染可在含血清和抗生素的完全培养基中直接进行，无需预先更换 Opti-MEM® 或其它无血清培养基。
化学合成，无动物源成分：转染试剂为化学合成产物，不含动物源成分（Animal Origin-Free, AOF），批次间一致性高。
已过滤除菌：本品已经 0.22 µm 滤膜过滤除菌。
转染流程示意
GOONIE ezFect™ DNA transfection reagent 转染操作流程图
转染效果
图片 Alt：HeLa 细胞经 ezFect™ DNA transfection reagent 转染后荧光显微镜照片
使用说明（转染 DNA）
本说明以 6 孔板、HEK293T 细胞为例。
1. 接种细胞
转染前一天，将 293T 细胞接种在 6 孔板中，3×10⁵–5×10⁵ 每孔，使用含 10% 血清的 DMEM 培养 18–22 小时。
2. 转染过程
a) 配置 DNA 稀释液（每孔）：将 2 µg 质粒 DNA 加入 100 μL 无血清 DMEM 培养基中，涡旋混匀 5 秒或用移液枪吹打 20 次。
b) 制备转染复合物（每孔）：向 DNA 稀释液中直接加入 3 μL 转染试剂，涡旋混匀 5 秒或用移液枪吹打 20 次，室温静置 20 分钟（不宜超过 30 分钟）。
c) 用移液枪将转染复合物分散滴入细胞培养孔中，轻轻摇晃 6 孔板以混匀。
d) 转染 10–16 小时后，除去旧的培养基，更换为 2 mL 新鲜的含 10% 血清的 DMEM 培养基。
e) 继续培养 24–48 小时，进行后续实验。
DNA 转染用量参考表
细胞培养容器 培养基体积 稀释液体积 DNA 用量 转染试剂 96-well 板 100 µL 10 µL 0.1 µg 0.15 µL 48-well 板 200 µL 20 µL 0.2 µg 0.3 µL 24-well 板 500 µL 50 µL 0.5 µg 0.75 µL 12-well 板 1 mL 50 µL 1 µg 1.5 µL 6-well 板 2 mL 100 µL 2 µg 3 µL 6 cm 培养皿 4 mL 200 µL 4 µg 6 µL 10 cm 培养皿 10 mL 500 µL 10 µg 15 µL
使用说明（转染 siRNA）
本说明以 6 孔板、终浓度 50 nM siRNA 为例。
1. 接种细胞
转染前一天，将合适数量的细胞接种在 6 孔板中，使转染时细胞密度达 30%–70%。
2. 转染过程
a) 取一个无菌的 1.5 mL 离心管，先加 100 μL 无血清培养基，再加入 100 pmoles siRNA，混匀。
b) 向 siRNA 中再加入 5 μL 转染试剂，立即涡旋混匀 5 秒或用移液枪吹打 20 次，室温静置 20 分钟（不宜超过 30 分钟）。
c) 用移液枪将转染复合物分散滴入细胞培养孔中，轻轻摇晃 6 孔板以混匀。
d) 转染 10–16 小时后，除去旧的培养基，更换为 2 mL 新鲜的完全培养基。
e) 继续培养 24–48 小时，利用 qPCR 或 Western blot 检测目的基因的表达水平。
siRNA 转染用量参考表
细胞培养容器 培养基体积 稀释液体积 siRNA 用量 转染试剂 24-well 板 500 µL 50 µL 25 pmoles 1.25 µL 12-well 板 1 mL 50 µL 50 pmoles 2.5 µL 6-well 板 2 mL 100 µL 100 pmoles 5 µL 6 cm 培养皿 4 mL 200 µL 200 pmoles 10 µL 10 cm 培养皿 10 mL 500 µL 500 pmoles 20 µL
应用场景
基因功能研究：将目的基因高效导入细胞，研究基因过表达或敲低后的表型变化
蛋白表达与纯化：瞬时转染表达重组蛋白，用于功能验证或制备
基因编辑：递送 CRISPR/Cas9 质粒或 sgRNA 表达载体，进行基因 knockout/knockin
RNA 干扰研究：高效递送 siRNA，实现目的基因的转录后沉默
病毒包装：转染 HEK293T 等包装细胞，生产慢病毒、腺病毒等载体
外泌体/EV 研究：转染细胞制备修饰型细胞外囊泡，用于功能分析
选择指南
推荐使用：常规质粒 DNA 或 siRNA 瞬时转染，追求低毒性和操作简便。
其他转染方案推荐使用：
需要脂质体转染方案：请选择 GOONIE Lipo2000 转染试剂（100-507），基于阳离子脂质体纳米颗粒技术。
难转染细胞或需要稳定表达：请选择 GOONIE 第三代慢病毒包装感染浓缩试剂盒（100-508），通过病毒载体实现高效基因递送。
文献引用
本产品在以下高水平期刊文献中被引用/使用：
常见问题 FAQ
Q: ezFect™ 与脂质体转染试剂（如 Lipo2000）有什么区别？
A: ezFect™ 基于非脂质体阳离子聚合物架构，通过高电荷高分子与核酸形成复合物，而非脂质体包裹。对脂质体不耐受的细胞（如部分原代细胞、神经细胞等）更加友好，细胞毒性更低。同时无需预先更换无血清培养基，操作更简便。
Q: 转染效率低，如何优化？
A: 首先确认使用高纯度、无内毒素质粒（A260/280 ≈ 1.8）。其次优化 DNA(μg) : 转染试剂(μL) 比例，从 1:1 到 1:4 梯度测试。细胞应处于对数生长期，贴壁细胞密度约 70%–80%。传代次数过多会显著降低转染效率。
Q: 能否用于悬浮细胞？
A: 可以。本产品同时适用于贴壁细胞和悬浮细胞。悬浮细胞转染时，建议密度控制在 0.5–1×10⁶ cells/mL。
Q: 转染后需要换液吗？
A: 建议转染 10–16 小时后更换新鲜完全培养基，以降低残留试剂对细胞的潜在影响。若细胞状态良好且对试剂耐受，也可不换液直接培养至检测时间点。
Q: 能否转染大片段质粒？
A: 可以。本产品在转染大至 13 kb 的质粒时，依然保持高转染效率。
Q: 试剂保存条件是什么？能否冻融？
A: 日常使用请 4℃ 保存，有效期 12 个月。长期不使用可置于 -20℃ 保存。建议避免反复冻融，分装后单次使用更佳。
Q: 转染复合物可以直接加入含血清的培养基吗？
A: 可以。只需按照说明书步骤在无血清 DMEM 中分别稀释核酸和试剂，混合静置 20 分钟后，直接将复合物滴入含血清的细胞培养孔中。这是本产品的核心优势之一。
客户反馈
以下实验反馈来自真实客户使用记录：
暨南大学客户反馈
细胞系：293T 转染物：shRNA 慢病毒质粒
实验条件：转染时间 2 天
对比实验：
· ezFect™ DNA : 转染试剂 = 1:1
· S 品牌 DNA : 转染试剂 = 1:2
反馈：ezFect™ 以更低的试剂用量达到同等或更优转染效果，性价比显著
*以上数据来源于第三方独立实验室，结果仅供参考，实际效果可能因实验条件不同而有所差异
广州医科大学客户反馈
细胞系：SW480 结直肠癌细胞
实验条件：转染后 48h 观察
对比实验：ezFect™ 与 B 品牌平行对比
反馈：ezFect™ 转染效果优于 B 品牌，转染效率更高、细胞状态更好
*以上数据来源于第三方独立实验室，结果仅供参考，实际效果可能因实验条件不同而有所差异
技术支持
GOONIE 隶属信天翁生物科技（广州）有限公司，深耕细胞生物学试剂研发。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com
页面总结
GOONIE 100-505 ezFect™ DNA transfection reagent，新一代非脂质体阳离子聚合物转染试剂，常用工具细胞转染效率达 80%–90%，细胞毒性低，兼容含血清与抗生素培养基，无需更换 Opti-MEM®，适用于贴壁和悬浮细胞。可高效转染质粒 DNA（大至 13 kb）和 siRNA，4℃ 保存，有效期 12 个月。
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产品组成
货号 组分 规格 100-505 ezFect DNA transfection reagent 1 mL -
注意事项
1. 转染前细胞须处于良好的生长状态。 选用处于对数生长期、活力高、传代次数低的细胞可获得较佳的转染效果。
2. 质粒DNA的质量是转染成功的关键。建议使用高纯度，无内毒素质粒。质粒用量需根据细胞类型和具体试验条件而调整。
3. 根据具体的试验条件和细胞类型，DNA(µg)/转染试剂(µL) 的比例建议在 1:1至1:4之间优化。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6. 使用中遇到任何问题，请联系我们的技术支持。
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