CAR-T流式检测抗体选择指南：GGGGS Linker抗体与CAR表达分析
发布时间:2026-07-28
GGGGS（G4S）柔性接头广泛应用于CAR-T细胞嵌合抗原受体（CAR）的scFv结构设计。信天翁生物推出的Anti-GGGGS Linker重组抗体（克隆号：RAGS-23）可特异性识别G4S及其重复序列，提供FITC、PE、AF647等多种荧光标记形式，可用于流式细胞术检测CAR-T细胞表面CAR分子的表达水平。该抗体适用于活细胞表面染色，可进一步结合流式分析或细胞分选实验，用于CAR-T细胞构建效率评价及质量控制。
在生物医药与基因工程领域，重组融合蛋白的设计与开发已成为单克隆抗体、细胞治疗产品及新型生物制剂研发的重要基础。在此类分子的构建过程中，不同功能结构域之间的连接方式对于蛋白质空间构象、结构稳定性及功能发挥具有重要影响。其中，GGGGS（G4S）柔性接头凭借良好的构象灵活性和较低的空间位阻特性，已成为融合蛋白和CAR结构设计中应用最广泛的linker之一。
GGGGS接头由四个甘氨酸（Gly）和一个丝氨酸（Ser）组成。甘氨酸具有较小的侧链，可提高肽链的柔韧性，使相邻功能结构域能够保持较大的构象自由度；丝氨酸具有亲水性侧链，有助于改善接头区域的水溶性。通过G4S重复单元的设计，可在不同蛋白结构域之间提供适当的空间间隔，减少结构域之间的相互干扰，从而促进融合蛋白各功能模块保持相对独立的结构和生物学活性。
针对细胞治疗与生物药研发中不断增长的检测需求，信天翁生物开发出针对GGGGS Linker的特异性单克隆抗体。
该产品采用兔重组单抗技术（克隆号RAGS-23），能够特异性识别G4S、G4S2、G4S3、G4S4及G4S5等多种不同长度的接头形式。信天翁专为流式细胞术（Flow Cytometry）优化荧光标记抗体，可直接用于CAR-T细胞表面的linker检测与阳性率分析。
目前提供以下三种荧光标记版本：
• FITC标记 — FITC Rabbit Anti-GGGGS Linker Antibody (RAGS-23)，货号：11-7007-1
• AF647标记 — AF647 Rabbit Anti-GGGGS Linker Antibody (RAGS-23)，货号：26-7007-1
• PE标记 — PE Rabbit Anti-GGGGS Linker Antibody (RAGS-23)，货号：12-7007-1
以下为三种荧光标记抗体在CAR-T细胞检测中的代表性流式结果：
【FITC Rabbit Anti-GGGGS Linker Antibody (RAGS-23) 检测结果】
【AF647 Rabbit Anti-GGGGS Linker Antibody (RAGS-23) 检测结果】
【PE Rabbit Anti-GGGGS Linker Antibody (RAGS-23) 检测结果】
该抗体能否用于CAR-T细胞阳性率的流式检测？
可以。由于绝大多数基于scFv构建的CAR-T细胞均包含GGGGS接头序列，该抗体可作为通用型检测试剂替代传统的抗独特型抗体，通过流式细胞术对CAR-T细胞进行快速质控与阳性率分析。
如何选择合适的荧光标记抗体进行流式检测？
根据实验室流式细胞仪配置的激光通道选择即可。例如，配备488nm激光器可选择FITC标记（绿色通道），配备561nm激光器可选择PE标记（黄绿色通道），配备633nm激光器可选择AF647标记（红色通道）。
使用该抗体做流式检测时，是否需要对样本进行固定或破膜处理？
不需要。由于GGGGS接头位于CAR分子的胞外区，该抗体可直接识别活细胞表面的天然构象表位，无需固定或破膜，适用于活细胞染色和后续分选实验，操作简便且对细胞活性影响较小。
该抗体能识别哪些长度的G4S重复序列？
该抗体可特异性识别G4S、G4S2、G4S3、G4S4及G4S5等多种不同长度的接头形式，覆盖了CAR-T和重组融合蛋白研发中最常用的接头设计。
更多NeoMab抗体产品请访问：NeoMab抗体品牌页。如需了解流式细胞术实验操作指南，推荐阅读流式细胞术结果解读入门指南与流式设门三步指南。
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