6.30 上门服务北大深圳医院客户：冻存 PBMC高效分离人 B 细胞，纯度96%
发布时间:2026-07-02
6 月 30 日，FiniGet分必得技术团队上门对接北京大学深圳医院科研客户，落地「FiniGet 千人细胞分选上门助力行动」一对一线下实操 Demo。
本次实验样本为客户自备、冻存半年且复苏后状态偏弱的 PBMC，使用货号 120-6004 人 B 细胞阴性分选试剂盒开展无柱式细胞分选，最终流式检测 CD19⁺ B 细胞纯度达到 96.93%，为冻存样本提供标准化落地分选方案。
一、本次上门服务完整实测信息
样本来源
客户自备冻存半年人 PBMC
4×10⁶
总细胞数 PBMC
70%
复苏后细胞活率
96.93%
B 细胞纯度
二、冻存 PBMC 人 B 细胞阴性分选现场标准化操作流程
前置说明：PBMC 复苏等预处理步骤，均由北大深圳医院客户提前独立完成，技术团队到场仅开展后续分选核心操作。
接收客户预处理完成的单细胞悬液，校准细胞孵育浓度
取用客户提前制备完成的单细胞沉淀，使用标准分选缓冲液轻柔重悬，调整细胞密度至 1×10⁸ cells/mL；取总量 4×10⁶个 PBMC 移入无菌流式管，进入抗体孵育核心环节。
缓冲液规范要求：含 1 mM EDTA+2% 灭活胎牛血清无菌 PBS，体系不可含有钙离子、镁离子、游离生物素，可直接选用 GOONIE 140-2001 专用分选缓冲液，保障磁珠分选稳定分离效果。
阴性分离Cocktail孵育，特异性标记全部非 B 杂细胞
按标准比例添加 Human B Cell Isolation Cocktail，轻柔吹打混匀，室温避光静置孵育 10 min；Cocktail可特异性标记 T 细胞、单核细胞、NK 细胞等全部非 B 类杂细胞，是提升人 B 细胞分选纯度的关键步骤，大样本量分选可按细胞总数量同比例扩增试剂用量。
链霉亲和素磁珠结合，捕获全部标记杂细胞
Streptavidin Beads 使用前涡旋震荡 30 s 充分打散底部沉淀，按配比加入细胞体系混匀，室温孵育 2.5 min；孵育过程每隔 2 min 轻弹管壁，避免凋亡碎片裹挟磁珠沉降堆积，保证杂细胞捕获充分完整。
磁力架阴性分离，收集原生高纯度人 B 细胞
分选缓冲液补足整体体系至 2.5 mL，将流式管放置 GOONIE 磁力架静置分离 2.5 min；全程保持流式管不脱离磁力架，吸取上层细胞悬液至全新无菌离心管，磁珠会牢牢吸附所有被抗体标记的杂细胞，上清即为无标记、高活性的纯化人 B 细胞。
收集后的细胞经简单洗涤重悬，即可交由客户带回实验室直接上机流式检测。
三、FiniGet 分必得® 120-6004 人 B 细胞分选试剂盒适配冻存样本核心特点
阴性分选模式，细胞零标记无激活损伤
整套磁珠分选仅清除 T、单核、NK 等杂细胞，B 细胞表面 CD19、BCR 功能抗原全程不被抗体遮蔽，不会诱导细胞非特异性活化，适配 B 细胞增殖、抗体分泌、抗原呈递等功能学实验。
冻存样本强兼容，低活率依旧高纯度
本次上门服务中客户自备半年冻存样本，活率仅 70% 依旧稳定实现 96.93% 分选纯度，精准解决临床科研人员库存老旧样本细胞分选纯度不达标的痛点。
无柱式简易操作，缩短细胞体外暴露时长
无需额外分选柱辅助，仅搭配磁力架即可完成全部分离流程，整套操作仅 15 分钟，大幅减少冻存细胞离体放置时间，缓解细胞持续凋亡损耗。
多类型样本通用，覆盖全科研场景
兼容新鲜外周血、短期 / 长期冻存 PBMC，适配临床免疫科室、基础免疫实验室全场景人 B 细胞分选需求。
成套组分一站式配齐，储存条件稳定
试剂盒内含 Human B Cell Isolation Cocktail、链霉亲和素磁珠，搭配 GOONIE 分选缓冲液、磁力架即可独立完成全套细胞分选；产品需 2–8℃避光冷藏，严禁冷冻，出厂有效期 12 个月。
四、FiniGet 千人细胞分选上门助力行动
本次上门服务北大深圳医院科研客户，是「FiniGet 千人细胞分选上门助力行动」全国上门服务站点之一。FiniGet 分必得技术专员可对接全国各大三甲医院、高校、科研院所科研人员，提供上门一对一磁珠分选线下实操教学，针对性解决人 B 细胞分选、免疫细胞亚群分离、冻存疑难样本分选各类实验难题：
✅ 针对冻存 PBMC、低活性、高碎片、细胞成团等疑难样本，配套专属预处理 + 标准化分选方案
✅ 现场手把手演示完整细胞分选核心操作，纠正实操误区，减少细胞机械损伤与凋亡
✅ 免费上门开展实体 Demo 验证实验，现场出具流式纯度数据，直观展现试剂盒分离效果
✅ 实时排查纯度不足、细胞回收率低、磁珠团聚、碎片干扰等各类高频实验问题
如果你日常处理临床冷冻 PBMC，开展人 B 细胞分选反复纯度不达标、新手难以把控磁珠分选整套操作流程，均可报名参与分必得上门助力行动。数千份样本实操经验全程护航，轻松稳定获得合格分选目标细胞。
五、FAQ 常见问题解答
Q1：阴性分选和阳性分选对比，开展 B 细胞功能实验为什么优先选用阴性方案？
阳性分选会直接用抗体标记 B 细胞表面 CD19 抗原，遮蔽 BCR 关键功能受体，极易诱发细胞非特异性激活，干扰增殖、抗体分泌、抗原刺激等功能实验；FiniGet 分必得阴性分选仅标记清除杂细胞，B 细胞全程无抗体、磁珠结合，细胞原始生理状态完整保留，是功能研究首选细胞分选方案。
Q2：整套人 B 细胞磁珠分选完整操作时长多久？大批量临床样本能否同步处理？
从抗体孵育到磁力分离整套流程仅 15 分钟，单管标准体系最大处理细胞量 2×10⁸ cells，大批量冻存 PBMC 可按照细胞总量同比例扩增 Cocktail、磁珠用量，无需延长孵育时间，可批量完成人 B 细胞分选。
Q3：如果分选后收获的 B 细胞数量偏少，是否会干扰客户后续流式上机检测？
不会造成检测影响。FiniGet 分必得阴性分选流程操作温和，不会破坏细胞表面抗原表型，仅需微量纯化细胞即可完成 CD3/CD19 流式分型鉴定，完全满足临床科研微量库存样本检测需求。
Q4：分选缓冲液能否直接使用普通无添加 PBS？缓冲液有哪些硬性使用规范？
不建议直接使用普通空白 PBS，分选缓冲液必须添加 1 mM EDTA+2% 灭活 FBS，严禁含有钙离子、镁离子、游离生物素；钙离子会加剧细胞聚集，游离生物素会竞争性消耗磁珠，直接造成磁珠分选失效，可直接选用 GOONIE 专用分选缓冲液适配 FiniGet 全系分选试剂盒。
Q5：磁珠静置存放后容易沉降结块，如何规范操作保证稳定分选效果？
磁珠取用前必须涡旋震荡 30 s 充分混匀，禁止高速离心；孵育过程每隔 2 min 轻弹管壁混匀体系，避免细胞碎片裹挟磁珠沉降，能够保障杂细胞充分捕获，稳定提升人 B 细胞分选纯度。
Q6：试剂盒储存条件有什么要求？冷冻存放会直接失效吗？
FiniGet 分必得 120-6004 人 B 细胞分选试剂盒需 2–8℃避光冷藏保存，严禁冷冻；低温冷冻会破坏抗体活性，直接造成磁珠分选纯度下跌，产品自出厂起有效期 12 个月。
Q7：采用这套阴性分选试剂盒处理 PBMC，是否需要提前做裂红处理？
无需裂红操作。FiniGet 分必得试剂盒可直接处理 PBMC 样本，裂红试剂可能会损伤细胞活性，针对冻存低活样本省略裂红步骤，可大幅降低细胞损耗。
Q8：磁力架标准静置分离时长是 2.5 min，缩短静置时间会出现什么问题？
标准静置时长固定 2.5 min，若静置时间不足，被磁珠标记的杂细胞无法完全吸附在管壁，杂细胞会混入收集液，直接拉低 B 细胞分选纯度。
Q9：除冻存 PBMC 之外，这款试剂盒还适配哪些样本来源？
本试剂盒适配新鲜人外周血开展人 B 细胞分选，仅针对人源样本开发；若需小鼠、大鼠等其他种属免疫细胞分选方案，可联系 FiniGet 技术专员定制配套试剂盒。
咨询热线
400-090-192品牌：FiniGet 分必得®｜样本分离专家出品：信天翁生物科技 (广州) 有限公司
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