低占比脾脏样本还能分出高纯度小鼠CD8⁺T?—中山大学附属肿瘤医院课题组Demo
不少科研人员处理小鼠脾脏样本时会遇到棘手情况:CD8⁺T 细胞本底占比很低,杂细胞基数庞大,很容易出现杂细胞去除不彻底,分选纯度不达标的问题。
本次 FiniGet® 分必得 ® 技术团队前往中山大学肿瘤防治中心开展上门分选 Demo。客户此前使用 B品牌 分选试剂盒处理同批次新鲜脾脏样本,分选后细胞纯度达不到实验预期,希望现场验证 FiniGet® 分必得 ®130‑6003 小鼠 CD8⁺T 细胞阴性分选试剂盒在低靶细胞占比样本中的分选表现,分选收获的 CD8⁺T 细胞将用于药物‑细胞共培养功能实验。

整套分选严格遵循试剂盒官方标准操作方案,全程 15 分钟完成细胞分离,适配实验室常规脾脏原代样本前处理流程。

实测场景:中山大学肿瘤防治中心 上门分选 Demo
分选方案:小鼠 CD8⁺T 细胞无柱磁珠阴性分选
实验样本:小鼠新鲜脾脏单细胞悬液,T 细胞本底占比仅 5%
原始样本红细胞占比:41.7%
CD8⁺T 细胞本底占比:仅 5%
前期背景:客户既往采用 B品牌,分选后细胞纯度不理想
下游用途:分选获得 CD8⁺T 细胞用于药物与细胞共培养功能实验

本次现场分选全部原始样本、计数、流式检测数据记录如下:
分选前总细胞:1×10⁷
分选前 CD8⁺T 细胞占比:5%
原始样本红细胞占比:41.7%
分选后流式检测 CD8⁺T 细胞纯度:93.79%
阴性分选,获得未标记 Untouched CD8⁺T 细胞 采用阴性去除策略,仅去除非靶细胞,CD8⁺T 细胞不结合磁珠与抗体,保留细胞天然原始表型,避免抗体交联引发细胞预激活,非常适合药物共培养、细胞因子分泌、杀伤功能等各类功能学实验。
无柱磁珠体系,操作简便快速 无需分选柱,依靠普通磁力架即可完成分选,整套流程约 15 分钟完成;无需大型专用设备,普通免疫实验室即可开展,也支持上门现场演示分选。
低频靶细胞样本依旧保证高纯度输出 面对本底占比仅 5% 这类低丰度 CD8⁺T 脾脏样本,依旧可以实现 90% 以上纯度,解决部分品牌在低频靶细胞、杂质多样本下纯度跳水的痛点。
兼容新鲜脾脏原代样本,适配科研常规起始细胞量 适配小鼠新鲜脾脏制备单细胞悬液,支持 10⁷级别常规起始细胞量,兼顾科研日常样本处理通量,分选产物直接对接下游共培养、体外刺激等实验。
A:得率受多方面影响:
①样本本身 CD8⁺T 本底占比低;
②脾脏取材、研磨制备过程细胞活性受损;
③孵育、磁珠结合、磁力吸附时间未严格按说明书;
④洗涤步骤操作造成细胞丢失。低本底样本优先看纯度指标,得率会随靶细胞初始占比同步变化。
A:可以。阴性分选细胞无磁珠、无抗体标记,无预激活,分选收集得到的细胞洗涤后即可铺板开展药物共培养、杀伤实验、细胞因子检测等功能实验,不需要额外脱磁处理。
A:部分品牌在靶细胞占比低的样本中,杂细胞去除能力不足,最终纯度下滑。本次客户过往B品牌试剂盒实测就遇到纯度不佳问题;FiniGet 分必得 ® 针对小鼠脾脏复杂样本优化抗体组合,在低频亚群场景下纯度稳定性表现更优。
A:建议根据厂家建议选择磁力架;不建议使用磁力强度不足的磁力架,会造成非靶细胞去除不完全,拉低最终纯度。
全国高校、动物科研实验室均可预约上门磁珠分选实操教学:
完整演示 FiniGet® 分必得 ® 细胞分选试剂盒全套标准化分选流程;
现场解决靶细胞本底低、样本结块等实验痛点;
线下 Demo 现场出具流式纯度数据,直观对比不同试剂盒分选效果;
手把手规范 Cocktail 配比、磁珠混匀、磁力静置等关键操作,规避分选纯度不足、细胞回收率低等常见问题。
经常处理低丰度 T 亚群样本,遇到竞品分选效果差的课题组,可以预约上门实操,采用 FiniGet® 分必得 ®130‑6003+GOONIE 140‑2001 缓冲液成套方案获取高纯度功能性 CD8⁺T 细胞。
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