脾脏样本不裂红，如何获得高纯度CD8⁺T细胞？|华南理工Demo
发布时间:2026-09-08
做小鼠脾脏的单细胞分选，很多人的第一反应是裂红——红细胞一多，体系里的细胞基数变大，分选容易"吃不消"。可裂红本身对原代 T 细胞就是一顿折腾，处理完细胞状态还能不能打，心里没底。
这次我们带着 FiniGet 分必得®130-6003 小鼠 CD8⁺T 细胞阴性分选试剂盒，到华南理工做了场线下 Demo：新鲜 C57 小鼠脾脏，红细胞占比高达 31%，全程不做裂红处理，按试剂盒标准流程操作，15 分钟完成分选。
核心结果：流式纯度 90.96%，细胞活性 99%——全程不裂红，沉淀无红细胞、无磁珠残留。
为什么专挑这个样本条件？脾脏单细胞悬液制备时红细胞几乎不可避免，31% 已经是不低的背景。传统思路靠裂红消除干扰，但裂红操作会对原代 T 细胞造成损伤，影响后续细胞功能实验。这次想验证的就是：不裂红，阴性分选到底能不能扛住高红细胞样本。
整套流程严格遵循试剂盒官方标准操作方案，15 分钟完成细胞分离，全程无需裂红、无需避光，适配动物实验室常规脾脏样本前处理，不依赖特殊设备。
| 实测场景 | 华南理工大学科研客户线下分选 Demo |
| 分选方案 | 小鼠 CD8⁺T 细胞阴性磁珠分选（无柱式） |
| 实验样本 | C57 小鼠新鲜脾脏单细胞悬液 |
| 样本背景 | 红细胞占比 31%；分选前细胞活性 90%；CD8⁺T 细胞本底占比 10% |
| 实测试剂盒 | FiniGet 分必得® 小鼠 CD8⁺T 细胞分选试剂盒（货号 130-6003） |
| 生产厂商 | 信天翁生物科技（广州）有限公司 |
| 配套耗材 | FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液、140-2000 磁力架 |
| 下游实验需求 | 分选后 CD8⁺T 细胞与抗原、药物共培养，开展细胞功能检测（IFN-γ、PD-1 等指标） |
本次分选起始细胞总量 1×10⁷，严格按照试剂盒标准操作流程开展分选，完成后用流式检测纯度与细胞活性：
| 分选前总细胞 | 1×10⁷ |
| 分选前细胞活性 | 90% |
| 分选前脾脏样本 CD8⁺T 细胞本底占比 | 10% |
| 样本红细胞占比 | 31% |
| 分选后细胞活性 | 99% |
| 分选后沉淀状态 | 无红细胞、无磁珠残留 |
| 分选后 CD8⁺T 细胞流式纯度 | 90.96% |
这次华南理工 Demo 实测，验证了 FiniGet 分必得®130-6003 在红细胞占比 31% 背景样本下的纯化表现。支撑这一表现的，是阴性分选的思路本身：
阴性分选用生物素标记的抗体组合结合非目标杂细胞，再通过链霉亲和素磁珠统一去除；CD8⁺T 细胞全程不结合磁珠、不结合抗体，不会被异常激活，收获细胞可直接用于抗原-药物-细胞共培养，以及 IFN-γ、PD-1 表达等功能学检测。
样本制备无需裂红，试剂全程无需避光，分选缓冲液添加胎牛血清无需灭活——预处理步骤省下来，样本状态也更稳。
整套流程 15 分钟完成分离，无分选柱依赖，搭配常规磁力架即可操作，动物实验室的日常脾脏样本前处理流程基本不用额外调整。
经本试剂盒分离得到的 CD8⁺T 细胞，可用于肿瘤免疫、T 细胞活化与功能评价、细胞因子分泌检测、PD-1 等免疫检查点分析，以及转录组、单细胞测序等免疫方向研究。
A：可以。红细胞背景样本会增加分选体系内的总细胞基数，对抗体 Cocktail 与磁珠的去除效率要求更高。本次华南理工客户实测，新鲜 C57 脾脏样本红细胞占比 31%，不做裂红处理，分选后流式纯度 90.96%、细胞活性 99%，沉淀无红细胞与磁珠残留。分选效果受样本新鲜度、细胞活性、试剂盒效期、磁力静置时间影响，建议使用效期充足的试剂盒批次。
A：可行。该试剂盒是阴性分选模式，CD8⁺T 细胞不结合任何抗体与磁珠，不会造成细胞非特异性激活。本次实测分选后细胞活性 99%、沉淀无磁珠残留，收获细胞可直接铺板开展抗原、药物共培养，后续检测 IFN-γ 分泌、PD-1 表达等功能指标。
A：建议配套 FiniGet 分必得® 140-2000 磁力架使用，适配 0.1-2 mL 样本体系，磁极作用范围与试剂盒操作体积匹配，可降低杂细胞、红细胞残留，保障分选纯度。
FiniGet 分必得® 千人细胞分选上门行动持续面向全国高校、动物科研实验室开放免费预约：技术人员上门演示 FiniGet 分必得® 全系分选试剂盒标准化流程，现场出具流式纯度数据，针对脾脏高红细胞背景样本、试剂盒批次效期风险、低丰度靶细胞分选纯度不足等高频痛点提供实操解决方案。
长期处理小鼠脾脏样本的实验室，可预约 FiniGet 分必得®130-6003 搭配 140-2001 分选缓冲液的成套方案，优化实验流程。更多 Demo 实测案例与试剂盒详情，详见 FiniGet 分必得® 细胞分选产品全集。
咨询热线：400-090-1923
品牌：FiniGet分必得®｜无需裂红 · 无需避光 · FBS无需灭活，无柱式细胞分选
出品：信天翁生物科技（广州）有限公司
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