商用冻存PBMC怎么做CD8磁珠分选？FiniGet分必得®120-6003中山大学附属肿瘤医院客户实测纯度94%
发布时间:2026-07-30
做肿瘤免疫体外杀伤、细胞因子分泌实验，大量实验室会采购标准化商用冻存PBMC。但不少分选方案存在多重操作损耗：裂红步骤损伤淋巴细胞、多轮离心导致细胞流失，最终珍贵样本造成浪费。
7月27日FiniGet分必得®技术老师拜访中山大学附属肿瘤医院客户，开展线下实体Demo。本次实验采用FiniGet分必得®120-6003人CD8+ T细胞分选试剂盒，选用客户库存状态优良的商用冻存PBMC，全程遵循标准化磁珠分选流程，无需裂红，仅15分钟完成整套细胞分选；样本原生CD8占比仅40%，最终流式检测目标细胞纯度稳定达到94%，有效保留细胞天然功能表型。
• 核心产品：FiniGet分必得®120-6003人CD8+ T细胞分选试剂盒
• 配套耗材：GOONIE 140-2000磁力架、GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液
• 样本类型：外购商用冻存PBMC，复苏后碎片少、无明显细胞团，细胞整体活性优异
• 分选方式：阴性免疫磁珠分选，全流程无需裂红
2. 分选收获CD8+ T细胞：8×10⁶
3. 原始样本CD8细胞占比：40%
4. 流式检测CD8分选纯度：94%
1. 商用优质样本直上，省去冗余前处理
试剂盒适配完整人源PBMC体系，新鲜PBMC、冻存PBMC均可适配，无需裂红；本次客户优质样本无细胞团块，复苏重悬后直接进入磁珠分选流程，减少多步操作带来的细胞损耗。
2. 低原生占比样本，依旧稳定高纯度
常规PBMC中CD8+细胞天然占比普遍偏低，本套试剂盒配套复合Isolation Cocktail可同步标记B细胞、单核、NK、CD4等各类杂细胞，40%原始占比无需预富集，一次磁珠分选即可达到94%纯度，省去梯度离心富集步骤。
3. 阴性分选有效保留细胞天然功能
采用排除式分离逻辑，仅通过磁珠吸附清除杂细胞，CD8+ T细胞全程不接触任何抗体、磁珠，细胞表面CD8、TCR功能性受体有效保留，减少了外界刺激可能带来的表型改变，适配肿瘤杀伤、共刺激检测、细胞因子分泌等下游T细胞分选实验。
4. 无柱式极简体系，批量样本处理效率高
整套磁珠分选仅需15分钟，仅搭配磁力架即可完成，无需分选柱，减少了柱体吸附导致的细胞流失，医院大批量临床同步样本可并行孵育，有效缩短单日实验工时。
本次商用PBMC细胞状态优良，无大量碎片团块，无需DNase预处理；若复苏样本结块可增加DNase孵育消解步骤。
1. 细胞重悬定标
复苏商用PBMC后离心弃上清，使用GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液重悬，调整细胞浓度至1×10⁸ cells/mL；缓冲液标准配方：含1 mM EDTA、2%FBS，不含钙离子、镁离子、游离生物素。
2. Cocktail混合孵育
取2.4×10⁷细胞悬液，加入试剂盒配套Human CD8+ T Cell Isolation Cocktail，轻柔吹打混匀，室温孵育10 min，同步标记多种非CD8杂细胞群体。
3. 磁珠结合孵育
试剂盒内Streptavidin Beads使用前充分涡旋30 s打散沉淀，按说明书标准比例加入细胞体系，轻柔混匀，室温孵育2.5 min；孵育间隔每2 min轻弹管壁，避免磁珠局部沉降聚集。
4. 磁力静置分离
分选缓冲液补足体系至2.5 mL，将流式管卡入GOONIE 140-2000磁力架，室温静置2.5 min，体系总体积不可超过磁极适配上限。
5. 收集纯化CD8细胞
流式管全程不脱离磁力架，平稳连贯倾倒上层上清至无菌新管，收集液体包含为纯化CD8+ T细胞，洗涤后可直接开展各类功能检测。
分选缓冲液是保障磁珠分选效果的关键耗材，配方经过全系FiniGet分必得®试剂盒适配优化：
1. EDTA螯合体系：结合溶液中二价阳离子，阻断DNA介导的细胞交联抱团，并防止凝血，从源头减少样本结块；
2. 2%FBS添加：封闭离心管、移液管内壁疏水吸附位点，降低淋巴细胞管壁黏附损耗，为细胞提供营养，提升细胞收获量，维持细胞活性；
3. 无钙镁、无游离生物素配方：避免阳离子促细胞聚集，同时防止游离生物素竞争性消耗磁珠结合位点，保障杂细胞标记效率。
1. 广谱样本兼容：白膜层、新鲜PBMC，自制/商用冻存PBMC均可适配，统一省去裂红操作；
2. 短周期温和分选：全套磁珠分选仅15 min，缩短细胞体外离体时间，降低自发凋亡概率；
3. 完整试剂套装：内含Human CD8+ T Cell Isolation Cocktail与Streptavidin Beads，2–8℃存放，严禁冷冻，有效期12个月；
4. 稳定批次重现：多批次商用PBMC平行分选数据波动较小，实验室长期实验数据可稳定复现。
针对长期使用商用PBMC做肿瘤CD8功能实验的科研人员，总结3条实操优化要点：
1. 样本复苏后尽快上机，避免室温长时间放置，防止细胞活性自然下降；
2. 全部吹打、倾倒操作动作轻柔，减少机械剪切力对CD8+ T细胞的损伤；
3. 如需大批量同步分选，可多管同步完成Cocktail、磁珠孵育，仅磁力分离步骤依次操作，节省实验时长。
FiniGet分必得®千人细胞分选上门实操服务持续面向全国三甲医院、高校免疫实验室开放预约：
• 在校硕博学生：可免费申领试剂盒小样，在实验室自主复刻本次人CD8+细胞分选实验；
• 医院科研平台：预约技术老师上门免费开展实体Demo，现场出具流式纯度实测数据；
• 长期高通量实验室：可对接批量试剂采购专属方案，配套标准化全套磁珠分选操作培训。
如果你长期需要商用冻存PBMC开展肿瘤免疫杀伤、T细胞功能研究，想要一套低损耗、高纯度稳定磁珠分选方案，均可预约线下实操演示。
Q1 商用冻存PBMC原生CD8占比仅40%，直接磁分选能达到94%纯度吗？
可以，本次中山大学附属肿瘤医院实测可验证。FiniGet分必得®120-6003配套复合Isolation Cocktail可同步标记多种非CD8杂细胞，，原生低占比样本一次细胞分选即可获得高纯CD8+ T细胞。
Q2 优质商用PBMC使用FiniGet分必得®120-6003，还需要提前做裂红处理吗？
不需要。本套人CD8+ T细胞分选试剂盒设计适配人源PBMC样本，PBMC均无需裂红，直接重悬即可进入磁珠分选流程，减少裂解试剂对淋巴细胞的活性损伤。
Q3 GOONIE 140-2001分选缓冲液里添加FBS有什么实操价值？
缓冲液内2%FBS可封闭塑料管壁吸附位点，分选全程减少淋巴细胞黏附损耗；同时为细胞提供一定的营养，能维持细胞活性，提升整套磁珠分选的细胞收获效率。
Q4 阴性分选得到的CD8+ T细胞，能直接用于肿瘤细胞共培养杀伤实验吗？
适配。阴性分选模式下CD8+ T细胞无抗体、磁珠结合，细胞表面功能抗原有效保留，减少了外界刺激可能引发的表型漂移，分选洗涤后无需额外处理，可直接铺板开展杀伤、细胞因子检测等下游T细胞分选相关实验。
Q5 同一批商用PBMC做多组平行磁珠分选，纯度波动会很大吗？
波动较小。FiniGet分必得®120-6003试剂盒批次质控严格，标准化孵育、磁力静置时长下，同批次PBMC平行细胞分选纯度差值控制在3%以内，实验重复性良好。
咨询热线：400-090-1923
品牌：FiniGet分必得®｜样本分离专家
出品：信天翁生物科技(广州)有限公司
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