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    FiniGet分必得®人CD8+ T细胞分选试剂盒

    应用:

    种属反应性:

    Human

    宿主种属:

    人CD8+ T细胞分选试剂盒,FiniGet分必得®,120-6003
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    目录价:

    ¥ 5000

    货号:

    120-6003

    • 规格
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    • 产品描述
    • 组成成分
    • 注意事项
    • 产品简介

      TL;DRFiniGet 分必得® 120-6003 人 CD8+ T 细胞分选试剂盒,采用生物素-链霉亲和素免疫磁珠法15 min 快速分选、纯度可从分选前 31.7% 提升至分选后 95.3%(人 PBMC,厂家测试);使用前无需裂红处理,可直接倾倒法操作,分选细胞表面无抗体/磁珠标记、无异常激活适配人外周血单个核细胞(PBMC)富集 CD8+ T 细胞,广泛用于病毒感染研究、肿瘤免疫治疗、自身免疫病研究、移植免疫研究、疫苗免疫效果评价、胞内病原体感染免疫研究等科研实验,2-8℃ 保存,有效期一年。



       

      核心参数总表


       

      参数规格
      品牌FiniGet 分必得®
      货号120-6003(1×10⁹ cells)/ 120-6003S(1×10⁸ cells)
      方法免疫磁珠阴性分选(生物素标记单克隆抗体 cocktail + 链霉亲和素磁珠)
      样本人外周血单个核细胞(PBMC)
      目的细胞CD8+ T 细胞
      分选时间15 min
      分选纯度可从分选前 31.7% 提升至分选后 95.3%(人 PBMC,100 μL / 1×10⁷ cells 体系,厂家测试)
      储存2-8℃,不可冷冻,有效期一年
      配套磁力架FiniGet 分必得® 140-2000(单孔)
      配套缓冲液FiniGet 分必得® 140-2001
      目录价¥5000



       

      产品特点

      快速高效:免疫磁珠阴性分选,15 min 完成(Cocktail 10 min + Beads 2.5 min + 磁极 2.5 min),全程无需离心

      高纯度高活性:纯度可从分选前 31.7% 提升至分选后 95.3%(人 PBMC,厂家测试),客户实测 95%(中山大学孙逸仙纪念医院 口腔癌患者外周血 PBMC),分选细胞无异常激活

      无需裂红:使用前无需裂红处理,客户实测肿瘤患者 PBMC 也能稳定使用

      无表面标记:阴性分选不接触目的细胞表面,CD8+ T 细胞表面不结合任何抗体/磁珠,保持原始静息状态

      配套完整:与 FiniGet 分必得® 140-2000 单孔磁力架 + 140-2001 细胞分选缓冲液配套使用,开盒即用



       

      操作流程图

      人 CD8+ T 细胞分选试剂盒操作流程图 FiniGet 120-6003 阴性分选流程

      FiniGet 120-6003 人 CD8+ T 细胞分选试剂盒操作流程图 阴性分选 6 步流程 制备 PBMC Cocktail 10 min Beads 2.5 min 磁极 2.5 min 倾倒 洗涤



       

      使用说明

      该操作流程适用于处理 0.1-2 mL 的样品(多达 2×10⁸ cells),使用 FiniGet 分必得® 140-2000 单孔磁力架和 5 mL 无菌流式管。

      以分选人 PBMC CD8+ T 细胞为例:



       

      操作流程(PBMC 起始,倾倒法)

      1. 制备人 PBMC:利用 Ficoll 密度梯度离心法从人外周血中分离 PBMC,收集 PBMC,以 PBS 洗涤细胞,离心后将 PBMC 重悬于分选缓冲液中,调整细胞密度为 1×10⁸ cells/mL

      · 如果使用的是冻存的 PBMC,复苏后细胞成团块状,分选前样品需在室温下用浓度为 100 μg/mL 的 DNase I 溶液孵育至少 15 min 并用细胞筛过滤。

      · 分选缓冲液推荐使用含有 1 mM EDTA 和 2% 胎牛血清(FBS)的 PBS,需预先使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。缓冲液中不能含有钙离子、镁离子和生物素。也可以使用 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。

      2. 吸取 100 μL 细胞悬液(1×10⁷ cells)加至流式管底部,加入 10 μL Human CD8+ T Cell Isolation Cocktail,混匀,室温孵育 10 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Human CD8+ T Cell Isolation Cocktail 的用量。

      3. 加入 10 μL Streptavidin Beads(使用前需涡旋震荡约 30 s,混匀后不可高速离心),混匀,室温孵育 2.5 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Streptavidin Beads 的用量。

      4. 加入分选缓冲液补至 2.5 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 2.5 min

      · 实验体系不可超过 2.5 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      5. 拿起磁力架,轻柔、连贯地倾倒细胞悬液于无菌离心管中,磁极及流式管在倾倒状态下保持 2-3 s 后恢复正立。此悬液中即包含纯化的人 CD8+ T 细胞。

      · 倾倒过程中流式管不能脱离磁力架。

      · 请勿摇晃或通过管口接触可能仍挂在流式管口的液滴。此液滴应丢弃。

      6. 洗涤细胞后重悬于所需缓冲液或培养基,即可用于下游实验。



       

      分选效果

      人 PBMC 分选 CD8+ T 细胞流式效果 Before isolation 31.7% After isolation 95.3%

      从人 PBMC 中分选 CD8+ T 细胞,分选前后的细胞用 PE anti-human CD8 抗体(克隆号 SK1)标记后进行流式细胞仪分析,分选前后 CD8+ T 细胞纯度分别为 31.7% 和 95.3%

      客户反馈

      中山大学孙逸仙纪念医院客户反馈(人 CD8+ T 负选 demo,口腔癌):口腔癌患者外周血 PBMC,起始 2.8×10⁷ cells,分必得 120-6003 分选后获得 5×10⁶ cells,CD8+ T 细胞纯度 95%

      中山大学孙逸仙纪念医院客户实测 口腔癌患者 PBMC 分选 CD8+ T 细胞流式效果 After isolation 95% 起始 2.8×10⁷ cells 5×10⁶ cells

       



       

      应用场景

      病毒感染研究:CD8+ 细胞毒性 T 淋巴细胞(CTL)在抗病毒免疫中起核心作用,研究 HIV / SARS-CoV-2 / EBV / HCV / CMV / 流感病毒等感染中 CD8+ T 免疫应答机制

      肿瘤免疫治疗:CD8+ T 细胞过继免疫治疗(CAR-T、TCR-T、TIL)、肿瘤新抗原筛选、免疫检查点(PD-1 / PD-L1 / CTLA-4)研究,适用于实体瘤患者外周血样本(如口腔癌、肝癌、肺癌等)

      自身免疫病研究:CD8+ T 细胞在多发性硬化(MS)、1 型糖尿病(T1D)、银屑病、炎症性肠病(IBD)等自身免疫病中的作用机制研究

      移植免疫研究:CD8+ T 细胞在器官/骨髓移植排斥反应中的作用机制、抗 CD8 单抗延长移植物存活研究

      疫苗免疫效果评价:抗原特异性 CD8+ T 细胞应答检测(HIV 疫苗、肿瘤疫苗、mRNA 疫苗等)

      胞内病原体研究:胞内菌(李斯特菌、结核分枝杆菌)和胞内寄生虫(疟原虫、弓形虫)感染中 CD8+ T 细胞免疫应答研究



       

      选择指南

      推荐使用:从人外周血单个核细胞(PBMC)中快速获得CD8+ T 细胞,用于下游病毒感染 / 肿瘤免疫 / 自身免疫病 / 移植免疫 / 疫苗评价 / 胞内病原体研究等实验。

      不推荐使用

      需要 NK 细胞:请选择 120-6005(人 NK 细胞分选试剂盒)

      需要 CD3+ T 细胞:请选择 120-6001(人 CD3+ T 细胞分选试剂盒)

      需要 CD4+ T 细胞:请选择 120-6002(人 CD4+ T 细胞分选试剂盒)

      需要 B 细胞:请选择 120-6004(人 B 细胞分选试剂盒)

      样本是小鼠脾脏/淋巴结:请选择 130-6003(小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒)

      起始样本是人全血:需先用 Ficoll 密度梯度离心法分离 PBMC,再进行分选



       

      常见问题 FAQ

      Q: 120-6003 是正选还是负选?

      A: 阴性分选。试剂盒中的生物素标记单克隆抗体 cocktail结合人 PBMC 中的非 CD8+ T 细胞(包括 CD4+ T 细胞、B 细胞、NK 细胞、单核细胞、粒细胞等),通过链霉亲和素磁珠去除这些细胞,目的 CD8+ T 细胞表面不结合任何抗体,保持原始状态。


       

      Q: 120-6003 分选后的 CD8+ T 细胞可以做激活/培养实验吗?

      A: 可以。阴性分选不触发表面受体交联,分选后 CD8+ T 细胞保持静息状态。如需激活,配合 抗 CD3 / 抗 CD28 抗体 + IL-2 培养使用,可诱导 CD8+ T 细胞活化扩增。


       

      Q: 120-6003 需要哪些配套设备?

      A: 推荐与 FiniGet 分必得® 磁力架配套使用:140-2000 单孔磁力架(0.1-2 mL / 2×10⁸ cells)。分选缓冲液推荐 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。操作流程使用 70 μm 细胞筛网 + 50 mL 离心管。

       

      Q: 120-6003 分选 CD8+ T 细胞需要多长时间?

      A: 15 min。Cocktail 室温孵育 10 min + Beads 室温孵育 2.5 min + 磁极孵育 2.5 min。
       

      Q: 120-6003 起始样本支持哪些组织?需要裂红吗?

      A: 起始样本是人外周血单个核细胞(PBMC),通过 Ficoll 密度梯度离心法分离 PBMC,使用前无需裂红处理——PBMC 层不含红细胞。冻存 PBMC 复苏后需用 100 μg/mL DNase I 溶液室温孵育至少 15 min 并用细胞筛过滤,去除细胞团块。客户实测口腔癌患者外周血 PBMC(2.8×10⁷ cells),分必得 120-6003 分选后获得 5×10⁶ cells,CD8+ T 细胞纯度 95%,肿瘤患者 PBMC 也能稳定使用。(注仅用于科研,不可用于临床诊断)

       

      Q: FiniGet 与进口头部品牌细胞分选试剂盒相比有什么异同?

      A: 两者均能实现高纯度、高活性的细胞分选。

      主要差异体现在 5 个维度:

      分选速度 ——FiniGet 约 15 min,进口头部品牌人负选约 25 min;

      分离柱 ——FiniGet 无需分离柱,进口头部品牌需额外采购分离柱;

      裂红步骤 ——FiniGet 无需裂红处理,进口头部品牌需裂红处理;

      操作温度 ——FiniGet 室温操作,进口头部品牌需 4℃ 低温;

      试剂盒价格 ——FiniGet 约为进口品牌的 1/3 至 1/2。

       

      Q: 什么情况下可以申请 FiniGet 分必得® 上门技术支持?

      A: 首次使用 FiniGet 分必得® 试剂盒、样本类型特殊(罕见样本/高难度分选)、课题组集中采购(≥3 个试剂盒)等情况均可申请,其他需求详询客服。广州/深圳 24-48h 响应,其他城市提前半个月预约。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。

       

      Q: FiniGet 分必得® 上门技术支持是免费的吗?有次数限制吗?

      A: 完全免费,不限单位、不限次数。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。

       

      技术支持

      FiniGet 分必得® 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,深耕免疫磁珠细胞分选技术。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com


       

      上门技术支持

      细胞分选实验首次跑不通?FiniGet 分必得® 技术团队可上门带您跑一遍——现场操作演示 + 设备调试 + 技术培训。客服热线同技术支持,预约后会有专人对接细节。

       

      覆盖范围与响应时效:

      城市响应时效备注
      广州 / 深圳24-48h 
      其他主要城市提前半个月预约北京、上海、杭州、成都、武汉、南京、西安、苏州等
      偏远地区提前半个月预约可申请远程对接(视频指导),详询客服

      申请方式:

      • 客服热线:400-090-1923
      • 邮箱:service@gooniebio.com
      • 申请所需信息:单位名称、样本类型、地址、期望时间等

      注:以上响应时效为常规情况,节假日顺延;具体上门时间以客服确认为准。


       

      页面总结

      FiniGet 分必得® 120-6003 人 CD8+ T 细胞分选试剂盒,免疫磁珠阴性分选,15 min 快速分选、纯度可从分选前 31.7% 提升至分选后 95.3%(人 PBMC,厂家测试);使用前无需裂红处理,可直接倾倒法操作,分选细胞无抗体/磁珠标记、无异常激活,适配人外周血单个核细胞(PBMC),2-8℃ 保存。

    • 产品组成

      组分规格(for 1×109 cells)
      Human CD8+  T Cell Isolation Cocktail1 mL
      Streptavidin Beads1 mL

       

    • 注意事项

      1.   本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。

      2.   建议使用低吸附移液器吸头和离心管,避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。

      3.   分选过程应尽量轻柔,避免磁珠对细胞造成机械损伤。

      4.   若后续进行细胞培养实验,分选过程需在无菌环境中进行。

      5.   加入磁珠孵育时若出现沉淀,可每1-2 min轻弹管壁或吸打混匀。

      6.   本产品仅可用于科研,不可用于诊断。

    关键词

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    应用:

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    Mouse

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    AF647 Mouse anti-mouse NK1.1 Antibody (PK136)

    货号:

    26-27014-1

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    FC

    种属反应性:

    Mouse

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    Mouse

    AF647 Rat Anti-mouse CD366(Tim-3) Antibody (RMT3-23)

    货号:

    26-2336-1

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    FC

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    Mouse

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    货号:

    26-2226-1

    应用:

    FC

    种属反应性:

    Mouse

    宿主种属:

    Rat

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