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    FiniGet分必得®小鼠CD8+ T细胞分选试剂盒

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    宿主种属:

    产品名称:FiniGet分必得®小鼠CD8+ T细胞分选试剂盒 货号:130-6003 / 130-6003-S 规格:1kit(1x10^9),1kit(1x10^8) 目录价:¥4,000.00,¥800.00 品牌:FiniGet分必得® 厂家:信天翁生物科技(广州)有限公司 官网产品链接:https://www.gooniebio.cn/products/finiget/mouse-cd8-t-cell-isolation-kit-130-6003.html
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    货号:

    130-6003

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      • 1×10^9
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    • 产品描述
    • 组成成分
    • 注意事项
    • FiniGet 分必得® · 小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒 · 130-6003

      产品简介

      TL;DRFiniGet 分必得® 130-6003 小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒,采用生物素-链霉亲和素免疫磁珠法15 min 快速分选、纯度可从分选前 12.4% 提升至分选后 97.5%(C57BL/6 小鼠脾脏,厂家测试);使用前无需裂红处理,可直接倾倒法操作,分选细胞表面无抗体/磁珠标记、无异常激活适配小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液富集 total CD8+ T 细胞(含 naïve / effector / memory 全部亚群),广泛用于T 细胞激活研究、过继转移研究、疫苗评价研究、自身免疫病研究、感染免疫研究等科研实验,2-8℃ 保存,有效期一年。



       

      核心参数总表

      储存与订购



       

      参数规格
      品牌FiniGet 分必得®
      货号130-6003(1×10⁹ cells)/ 130-6003S(1×10⁸ cells)
      方法免疫磁珠阴性分选(生物素标记单克隆抗体 cocktail + 链霉亲和素磁珠)
      样本小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液
      目的细胞total CD8+ T 细胞(CD8a+,含 naïve / effector / memory 全部亚群)
      分选时间15 min
      分选纯度可从分选前 12.4% 提升至分选后 97.5%(C57BL/6 小鼠脾脏,100 μL / 1×10⁷ cells 体系,厂家测试)
      储存2-8℃,不可冷冻,有效期一年
      配套磁力架FiniGet 分必得® 140-2000(单孔)、140-2002(八连排)
      配套缓冲液FiniGet 分必得® 140-2001



       

      产品特点

      15 min 快速分选:Cocktail 室温孵育 10 min + Beads 室温孵育 2.5 min + 磁极孵育 2.5 min,15 min 内获得目的细胞。

      纯度可从分选前 12.4% 提升至分选后 97.5%:阴性分选法高纯度富集 total CD8+ T 细胞(含 naïve / effector / memory 全部亚群),C57BL/6 小鼠脾脏实测纯度可从分选前 12.4% 提升至分选后 97.5%(厂家测试)。

      无抗体/磁珠标记、无异常激活:阴性分选不触发表面受体交联,分选后细胞表面不结合任何抗体或磁珠,保持原始静息状态,可直接用于下游激活、培养、测序。

      使用前无需裂红处理、倾倒法操作无需分离柱倾倒法即可获得未标记的目的细胞,单孔磁力架(140-2000)即可,操作门槛低。

      样本兼容:支持小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液,可适配 C57BL/6、BALB/c 等常见品系。



       

      产品保存

      2-8℃保存,不可冷冻,避免反复冻融。有效期一年。



       

      操作流程图

      小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒操作流程图 FiniGet 130-6003 阴性分选流程

      FiniGet 130-6003 小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒操作流程图 阴性分选 7 步流程 物理制备单细胞悬液 Cocktail 10 min Beads 2.5 min 磁极 2.5 min 倾倒 2-3 s 洗涤



       

      样本准备

      制备单细胞悬液:在 70 μm 细胞筛网上研磨脾脏,以预冷的分选缓冲液冲洗细胞筛网,收集细胞悬液于 50 mL 离心管中,500 g,离心 5 min 后弃去上清。将细胞重悬于缓冲液中,调整细胞浓度为 1×10⁸ cells/mL

      · 分选缓冲液推荐使用含有 1 mM EDTA 和 2% 胎牛血清(FBS)的 PBS,需预先使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。缓冲液中不能含有钙离子、镁离子和生物素。也可以使用 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。

      · 推荐使用含 3% 乙酸的亚甲基蓝进行有核细胞计数,并按照有核细胞数量进行操作。



       

      使用说明

      该操作流程适用于处理 0.1-2 mL 的样品(多达 2×10⁸ cells),使用 FiniGet 分必得® 140-2000 单孔磁力架和 5 mL 无菌流式管。

      以分选小鼠脾脏 CD8+ T 细胞为例:



       

      操作流程(脾脏起始,倾倒法)

      1. 吸取 100 μL 细胞悬液(1×10⁷ cells)加至无菌流式管底部。

      2. 加入 5 μL Mouse FcR Blocker,轻轻混匀。

      · 此步骤为非必需流程,可根据实际需求选择执行;若分选更大数量的细胞可按比例增加 Mouse FcR Blocker 的用量。

      3. 加入 10 μL Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail,轻轻混匀,室温孵育 10 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail 的用量。

      4. 孵育完成后,加入 10 μL Streptavidin Beads,轻轻混匀,室温孵育 2.5 min

      · 磁珠在使用前需在涡旋震荡仪上充分混匀约 30 s,混匀后不可进行高速离心操作;若分选更大数量的细胞可按比例增加 Streptavidin Beads 的用量。

      5. 孵育完成后,加入分选缓冲液将体积补至 2.5 mL,使用移液器轻轻吹打几次后将流式管置于磁力架上静置 2.5 min

      · 实验体系不可超过 2.5 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      6. 拿起磁力架,将细胞悬液轻柔、连贯地倾倒于无菌离心管中,将磁极及流式管在倾倒状态下保持 2-3 s 后恢复正立状态。此细胞悬液中即包含纯化的小鼠 total CD8+ T 细胞。

      · 倾倒过程中流式管不能脱离磁力架。

      · 请勿摇晃或通过管口接触可能仍挂在流式管口的液滴。此液滴应丢弃。

      7. 根据实验需要洗涤细胞后,将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中,即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验。



       

      注意事项

      1. 本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。

      2. 建议使用低吸附移液器吸头和离心管,避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。

      3. 分选过程应尽量轻柔,避免磁珠对细胞造成机械损伤。

      4. 若后续进行细胞培养实验,分选过程需在无菌环境中进行。

      5. 加入磁珠孵育时若出现沉淀,可每 1-2 min 轻弹管壁或吸打混匀。

      6. 本产品仅可用于科研,不可用于诊断。



       

      分选效果

      小鼠脾脏分选 CD8+ T 细胞前后流式结果对比 纯度分选前 12.4% 提升至分选后 97.5%

      C57BL/6 小鼠脾脏分选 total CD8+ T 细胞流式效果 Before isolation 12.4% After isolation 97.5%

       

      从 C57BL/6 小鼠脾脏细胞中分选 total CD8+ T 细胞,分选前后的细胞用 PE anti-mouse CD8a 抗体(克隆号 53-7.6) 标记后进行流式细胞仪分析,分选前后 CD8+ T 细胞纯度分别为 12.4% 和 97.5%

       



       

      客户实测反馈

      以下数据来自实际客户的实验室使用反馈,样本均为小鼠脾脏或淋巴结单细胞悬液,使用130-6003试剂盒按标准流程操作,流式细胞术检测分选纯度。完整数据分析详见小鼠CD8+T细胞分选实测数据汇总


       

      序号客户单位样本类型分选纯度备注
      1中山大学P老师OT1小鼠脾脏96%基因敲除小鼠,CD8+T细胞本身占比较低
      2中山大学M老师C57BL/6小鼠脾脏95.8%
      3中山大学孙逸仙纪念医院L老师C57BL/6小鼠脾脏90%~94.4%B*L品牌对照纯度83%,客户反馈已替换为FiniGet
      4广东省人民医院Y老师C385A小鼠脾脏91.3%
      5深圳湾实验室L老师OT1小鼠脾脏+淋巴结95%B*L品牌对照,两者纯度持平
      6合作科研平台C57BL/6小鼠脾脏95.8%NeoMab流抗APC/Cy7 CD8a(53-6.7)验证
      7广州医科大学W老师条件敲除小鼠脾脏98%S品牌对照,客户反馈效果持平
      8广州实验室Z老师敲基因小鼠脾脏≥95%三只敲基因鼠纯度达95%以上
      9珠江医院W老师C57BL/6新鲜脾脏94.31%
      10深圳湾实验室W老师C57BL/6新鲜脾脏92.26%Y品牌对照(90.16%),FiniGet纯度更高



       

      多组客户实测数据显示,130-6003试剂盒在C57BL/6、OT1、C385A、条件敲除等多种小鼠品系中可稳定达到90%~98%的分选纯度。在与B*L品牌、S品牌、Y品牌等品牌的对照实验中,FiniGet 分必得®纯度持平或更优,部分客户已用FiniGet替代原有进口品牌试剂盒。



       

      应用场景

      T 细胞激活研究:CD8+ T 细胞激活、增殖、细胞因子分泌(IFN-γ、TNF-α、IL-2)、细胞毒性实验

      过继转移研究:CD8+ T 细胞过继转移至荷瘤小鼠 / 感染模型小鼠,评估抗肿瘤 / 抗病毒效果

      疫苗评价研究:病毒疫苗(流感、新冠、HIV)+ 肿瘤疫苗(neoantigen)的 CD8+ T 细胞应答评估

      自身免疫病研究:1 型糖尿病(T1D)模型(NOD 小鼠)+ 多发性硬化(EAE 模型)+ 类风湿关节炎(RA)模型(胶原诱导关节炎 CIA)

      感染免疫研究:病毒感染(LCMV、流感、HIV)+ 胞内菌感染(李斯特菌、结核分枝杆菌)的 CD8+ T 细胞应答

      CD8+ T 细胞亚群分析:本产品分选后细胞为 total CD8+ T(含 naïve / effector / memory 全部亚群),如需单独 naïve CD8+ T(CD8+CD44-CD62L+)请选择 130-6013(小鼠 Naïve CD8+ T 细胞分选试剂盒)



       

      选择指南

      推荐使用:从小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液中快速获得total CD8+ T 细胞(含 naïve / effector / memory 全部亚群),用于下游 T 细胞激活 / 过继转移 / 疫苗评价 / 自身免疫 / 感染免疫等实验。

      不推荐使用

      需要 CD4+ T 细胞:请选择 130-6002(小鼠 CD4+ T 细胞分选试剂盒)

      需要 Pan T 细胞(CD3+):请选择 130-6001(小鼠 Pan T 细胞分选试剂盒)

      需要单独 naïve CD8+ T 细胞(CD8+CD44-CD62L+):请选择 130-6013(小鼠 Naïve CD8+ T 细胞分选试剂盒)

      需要 B 细胞:请选择 130-6004(小鼠 B 细胞分选试剂盒)130-6024(小鼠 Pan B 细胞分选试剂盒)

      需要 NK 细胞:请选择 130-6005(小鼠 NK 细胞分选试剂盒)

      样本是人 PBMC:请选择 120-6003(人 CD8+ T 细胞分选试剂盒)

      起始样本是小鼠骨髓:建议先优化单细胞悬液制备方法,再进行分选



       

      常见问题 FAQ

      Q: 130-6003 与 130-6013(小鼠 Naïve CD8+ T 细胞分选试剂盒)有什么区别?

      A: 130-6003 用于分选 total CD8+ T 细胞(含 naïve / effector / memory 全部亚群),适合 T 细胞激活 / 过继转移 / 疫苗评价 / 自身免疫 / 感染免疫等全亚群研究;130-6013 专为分选 naïve CD8+ T 细胞(CD8+CD44-CD62L+,仅初始态)设计,采用三色标记(CD8+CD44-CD62L+),适合 T 细胞发育 / 胸腺研究 / 初始态 T 细胞功能研究。

       

      Q: 130-6003 是正选还是负选?

      A: 阴性分选。试剂盒中的生物素标记单克隆抗体 cocktail结合小鼠脾脏细胞中的非 CD8+ T 细胞(包括 CD4+ T 细胞、B 细胞、NK 细胞、单核细胞、粒细胞等),通过链霉亲和素磁珠去除这些细胞,目的 CD8+ T 细胞表面不结合任何抗体,保持原始状态。

       

      Q: 130-6003 需要 Mouse FcR Blocker 吗?

      A: Mouse FcR Blocker 为非必需步骤。如使用含大量巨噬细胞 / 粒细胞的样本(如骨髓),建议加入以提升特异性。

       

      Q: 130-6003 分选后的 CD8+ T 细胞可以做激活/培养实验吗?

      A: 可以。阴性分选不触发表面受体交联,分选后 CD8+ T 细胞保持静息状态。如需激活,配合 anti-CD3 + anti-CD28 培养激活使用;细胞毒性实验可用 OVA / 肽脉冲 + 抗原递呈细胞共培养。

       

      Q: 130-6003 需要哪些配套设备?

      A: 推荐与 FiniGet 分必得® 磁力架配套使用:140-2000 单孔磁力架(0.1-2 mL / 2×10⁸ cells)。分选缓冲液推荐 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。操作流程使用 70 μm 细胞筛网 + 50 mL 离心管。

       

      Q: 130-6003 分选 CD8+ T 细胞需要多长时间?

      A: 15 min。Cocktail 室温孵育 10 min + Beads 室温孵育 2.5 min + 磁极孵育 2.5 min。

       

      Q: 130-6003 起始样本是脾脏吗?需要裂红吗?

      A: 起始样本是小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液使用前无需裂红处理——样本准备阶段直接走 70 μm 筛网研磨 + 500 g 离心 5 min 弃上清的物理方法,不需 ACK 裂解液。个别红细胞残留极多的样本可参考通用小鼠脾脏单细胞悬液制备方法自行处理。

       

      Q: 130-6003 与 130-6002(小鼠 CD4+ T 细胞分选试剂盒)的关键差异是什么?

      A: 130-6003 分选 CD8+ T 细胞,130-6002 分选 CD4+ T 细胞,两者均为免疫磁珠阴性分选法。130-6003 步骤 4 用量 10 μL Streptavidin Beads,130-6002 步骤 4 用量 7.5 μL Streptavidin Beads

       

      Q: FiniGet 与进口头部品牌细胞分选试剂盒相比有什么异同?

      A: 两者均能实现高纯度、高活性的细胞分选。

      主要差异体现在 6 个维度:

      分选速度 ——FiniGet 约 15 min,进口头部品牌人负选约 25 min、小鼠负选需 45-120 min;

      分离柱 ——FiniGet 无需分离柱,进口头部品牌需额外采购分离柱;

      裂红步骤 ——FiniGet 无需小鼠红细胞裂红,进口头部品牌需裂红处理;

      操作温度 ——FiniGet 室温操作,进口头部品牌需 4℃ 低温;

      样本处理量 ——均为 1×10⁷ cell;

      试剂盒价格 ——FiniGet 约为进口品牌的 1/3 至 1/2。 

       

      Q: 什么情况下可以申请 FiniGet 分必得® 上门技术支持?

      A: 首次使用 FiniGet 分必得® 试剂盒、样本类型特殊(罕见样本/高难度分选)、课题组集中采购(≥3 个试剂盒)等情况均可申请,其他需求详询客服。广州/深圳 24-48h 响应,其他城市提前半个月预约。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。

       

      Q: FiniGet 分必得® 上门技术支持是免费的吗?有次数限制吗?

      A: 完全免费(含差旅费),不限单位、不限次数。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。



       

      技术支持

      FiniGet 分必得® 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,深耕免疫磁珠细胞分选技术。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com



       

      上门技术支持

      细胞分选实验首次跑不通?FiniGet 分必得® 技术团队可上门带您跑一遍——现场操作演示 + 设备调试 + 技术培训。客服热线同技术支持,预约后会有专人对接细节。



       

      覆盖范围与响应时效:

      城市响应时效备注
      广州 / 深圳24-48h 
      其他主要城市提前半个月预约北京、上海、杭州、成都、武汉、南京、西安、苏州等
      偏远地区提前半个月预约可申请远程对接(视频指导),详询客服

      申请方式:

      • 客服热线:400-090-1923
      • 邮箱:service@gooniebio.com
      • 申请所需信息:单位名称、样本类型、起始细胞量、地址、期望时间

      注:以上响应时效为常规情况,节假日顺延;具体上门时间以客服确认为准。



       

      页面总结

      FiniGet 分必得® 130-6003 小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒,免疫磁珠阴性分选,15 min 快速分选、纯度可从分选前 12.4% 提升至分选后 97.5%(C57BL/6 小鼠脾脏,厂家测试);使用前无需裂红处理,可直接倾倒法操作,分选细胞无抗体/磁珠标记、无异常激活,适配小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液,2-8℃ 保存。



       

    • 产品组成

      组成成分货号规格(大/小)
      Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail130-6003A1 mL / 100 μL
      Streptavidin Beads150-2001800 μL / 80 μL
      Mouse FcR Blocker150-2003500 μL / 50 μL
    • 注意事项

      1.   本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。
      2.   建议使用低吸附移液器吸头和离心管,避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。
      3.   分选过程应尽量轻柔,避免磁珠对细胞造成机械损伤。
      4.   若后续进行细胞培养实验,分选过程需在无菌环境中进行。
      5.   加入磁珠孵育时若出现沉淀,可每1-2 min轻弹管壁或吸打混匀。
      6.   本产品仅可用于科研,不可用于诊断。

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