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    小鼠NK细胞分选试剂盒

    小鼠NK细胞分选试剂盒,FiniGet分必得®,130-6005
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    130-6005

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    • FiniGet 分必得® · 小鼠 NK 细胞分选试剂盒 · 130-6005

      产品简介

      TL;DRFiniGet 分必得® 130-6005 小鼠 NK 细胞分选试剂盒,采用生物素-链霉亲和素免疫磁珠法15 min 快速分选、纯度可高达 90.9%使用前无需裂红处理,可直接倾倒法操作,分选细胞表面无抗体/磁珠标记、无异常激活适配小鼠脾脏单细胞悬液,广泛用于抗肿瘤免疫研究、抗病毒免疫研究、移植免疫研究、自身免疫病研究、CAR-NK 制备研究等科研实验,2-8℃ 保存,有效期一年。



       

      核心参数总表

      储存与订购



       

      参数规格
      品牌FiniGet 分必得®
      货号130-6005(1×10⁹ cells)/ 130-6005S(1×10⁸ cells)
      方法免疫磁珠阴性分选(生物素标记单克隆抗体 cocktail + 链霉亲和素磁珠)
      样本小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液
      目的细胞NK 细胞
      分选时间15 min
      分选纯度可高达 90.9%
      储存2-8℃,不可冷冻,有效期一年
      配套磁力架FiniGet 分必得® 140-2000(单孔)
      配套缓冲液FiniGet 分必得® 140-2001



       

      产品特点

      15 min 快速分选:Cocktail 室温孵育 10 min + Beads 室温孵育 2.5 min + 磁极孵育 2.5 min,快至15 min 内获得目的细胞。

      纯度可高达 90.9%:阴性分选法高纯度富集 NK 细胞,C57BL/6 小鼠脾脏实测纯度可达 90.9%。

      无抗体/磁珠标记、无异常激活:阴性分选不触发表面受体交联,分选后细胞表面不结合任何抗体或磁珠,保持原始静息状态,可直接用于下游激活、杀伤、测序。

      使用前无需裂红处理、倾倒法操作无需分离柱倾倒法即可获得未标记的目的细胞,单孔磁力架(140-2000)即可,操作门槛低。

      样本兼容:支持小鼠脾脏单细胞悬液,可适配 C57BL/6、BALB/c 等常见品系。



       

      产品保存

      2-8℃保存,不可冷冻,避免反复冻融。有效期一年。



       

      操作流程图

       

      FiniGet 130-6005 小鼠 NK 细胞分选试剂盒操作流程图 阴性分选 7 步流程 物理制备单细胞悬液 Cocktail 10 min Beads 2.5 min 磁极 2.5 min 倾倒 2-3 s 洗涤



       

      使用说明

      支持 1 种磁力架方案:

      方案 A140-2000 单孔磁力架 + 5 mL 流式管,处理 0.1-2 mL 样品(多达 2×10⁸ cells)



       

      方案 A 操作流程(脾脏起始,倾倒法)

      1. 制备单细胞悬液:在 70 μm 细胞筛网上研磨脾脏,以预冷的分选缓冲液冲洗细胞筛网,收集细胞悬液于 50 mL 离心管中,500 g,离心 5 min 后弃去上清

      2. 将细胞重悬于缓冲液中,调整细胞浓度为 1×10⁸ cells/mL

      3. 吸取 100 μL 细胞悬液(1×10⁷ cells)加至流式管底部,加入 10 μL Mouse NK Cell Isolation Cocktail,混匀,室温孵育 10 min

      4. 加入 15 μL Streptavidin Beads,混匀,室温孵育 2.5 min

      5. 加入分选缓冲液补至 2.5 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 2.5 min

      6. 拿起磁力架,将细胞悬液轻柔、连贯地倾倒于无菌离心管,倾倒状态下保持 2-3 s 再恢复正立。此悬液中即包含纯化的小鼠 NK 细胞。

      7. 洗涤细胞后重悬于所需缓冲液或培养基,即可用于下游实验。



       

      分选效果

       

      C57BL/6 小鼠脾脏分选 NK 细胞流式效果 Before isolation 2.25% After isolation 90.9%

      从 C57BL/6 小鼠脾脏细胞中分选 NK 细胞,分选前后的细胞用 APC anti-mouse CD3 抗体(克隆号 17A2)PE/Cy7 anti-mouse CD49b 抗体(克隆号 HMα2) 标记后进行流式细胞仪分析,分选前后 NK 细胞纯度分别为 2.25% 和 90.9%





       

      应用场景

      抗肿瘤免疫研究:小鼠黑色素瘤(B16)、肺癌(LLC)、肝癌(Hepa1-6)等实体瘤模型 + 骨髓瘤 / 淋巴瘤血液肿瘤模型。分选后的 NK 细胞可与 K562 共培养做杀伤实验,LDH 释放 / CFSE-PI 流式检测杀伤效率。

      抗病毒免疫研究:MCMV 感染模型(Ly49H+ NK 细胞扩增关键模型)、流感病毒感染、李斯特菌感染等。分选后的 NK 细胞可做 IFN-γ 分泌检测、CD107a 脱颗粒实验。

      移植免疫研究:同种异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)模型 + KIR-MHC 错配机制研究 + 移植物抗白血病(GVL)效应评估。分选后的供体 NK 细胞可过继转移给受体小鼠。

      自身免疫病研究:SLE 模型(NZB/W F1、MRL/lpr)+ EAE 模型(多发性硬化)。分选后的 NK 细胞可做亚群分析(cNK vs ILC1)和功能检测。

      细胞治疗研究:CAR-NK 制备(CD19 CAR-NK、BCMA CAR-NK、HER2 CAR-NK 等)。分选后的 NK 细胞经 IL-2 / IL-15 激活 + 基因修饰 + 扩增后用于体内外功能验证。



       

      选择指南

      推荐使用:从小鼠脾脏单细胞悬液中快速获得NK 细胞(CD3- CD49b+),用于下游激活、杀伤、培养、测序等实验。

      不推荐使用

      需要单独 CD4+ 或 CD8+ T 细胞:请选择 130-6002(小鼠 CD4+ T 细胞分选试剂盒)130-6003(小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒)

      样本是人 PBMC:请选择 120-6001(人 CD3+ T 细胞分选试剂盒)系列

      需要 T 细胞或 B 细胞:请选择 130-6001(小鼠 CD3+ T 细胞分选试剂盒)130-6004(小鼠 B 细胞分选试剂盒)

      需要激活态 NK 细胞:本产品分选后细胞为静息态,需配合 IL-2(1000 U/mL)+ IL-15(10 ng/mL)激活使用



       

      常见问题 FAQ

      Q: 130-6005 是正选还是负选?

      A: 阴性分选。试剂盒中的生物素标记单克隆抗体 cocktail结合小鼠脾脏细胞中的非 NK 细胞(包括 T 细胞、B 细胞、单核细胞、粒细胞等),通过链霉亲和素磁珠去除这些细胞,目的 NK 细胞表面不结合任何抗体,保持原始状态。

      Q: 130-6005 分选后的 NK 细胞可以做激活/杀伤实验吗?

      A: 可以。阴性分选不触发表面受体交联,分选后 NK 细胞保持静息状态。如需激活,配合 IL-2+ IL-15培养 。杀伤实验推荐 K562 共培养 + LDH 释放 / CFSE-PI 流式检测。

      Q: 130-6005 需要哪些配套设备?

      A: 推荐与 FiniGet 分必得® 磁力架配套使用:140-2000 单孔磁力架(0.1-2 mL / 2×10⁸ cells)。分选缓冲液推荐 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。操作流程使用 70 μm 细胞筛网 + 50 mL 离心管。

      Q: 130-6005 分选 NK 细胞需要多长时间?

      A: 15 min。Cocktail 室温孵育 10 min + Beads 室温孵育 2.5 min + 磁极孵育 2.5 min。

      Q: 130-6005 起始样本是脾脏吗?需要裂红吗?

      A: 起始样本是小鼠脾脏单细胞悬液使用前无需裂红处理—— 步骤 1 直接走 70 μm 筛网研磨 + 500 g 离心 5 min 弃上清的物理方法,不需 ACK 裂解液。个别红细胞残留极多的样本可参考通用小鼠脾脏单细胞悬液制备方法自行处理。

      Q: 130-6005 可以分选小鼠其他细胞类型吗?

      A: 不可以。本品专为小鼠 NK 细胞设计。小鼠其他细胞类型推荐 FiniGet 分必得®:130-6001(小鼠 CD3+ T 细胞分选试剂盒)130-6002(小鼠 CD4+ T 细胞分选试剂盒)130-6003(小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒)130-6004(小鼠 B 细胞分选试剂盒)

      Q: 130-6005 分选后的 NK 细胞可以用于单细胞测序吗?

      A: 可以。分选后细胞活性高、表面无抗体/磁珠标记,适配 10x Genomics 等主流单细胞测序平台。



       

      页面总结

      FiniGet 分必得® 130-6005 小鼠 NK 细胞分选试剂盒,免疫磁珠阴性分选,15 min 快速分选、纯度可高达 90.9%使用前无需裂红处理,可直接倾倒法操作,分选细胞无抗体/磁珠标记、无异常激活,适配小鼠脾脏单细胞悬液,2-8℃ 保存。



       

      技术支持

      FiniGet 分必得® 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,深耕免疫磁珠细胞分选技术。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com



       

    • 产品组成

      组分规格(for 1×109 cells)
      Mouse NK Cell Isolation Cocktail
      1 mL
      Streptavidin Beads1.5mL

       

    • 注意事项

      1.   本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。
      2.   建议使用低吸附移液器吸头和离心管,避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。
      3.   分选过程应尽量轻柔,避免磁珠对细胞造成机械损伤。
      4.   若后续进行细胞培养实验,分选过程需在无菌环境中进行。
      5.   加入磁珠孵育时若出现沉淀,可每1-2 min轻弹管壁或吸打混匀。
      6.   本产品仅可用于科研,不可用于诊断。

    关键词

    FiniGet

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    Mouse

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    Rat

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