FiniGet分必得®小鼠Naive CD4+T细胞分选试剂盒
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FiniGet 分必得® · 小鼠 Naïve CD4+ T 细胞分选试剂盒 · 130-6012
产品简介
TL;DR：FiniGet 分必得® 130-6012 小鼠 naïve CD4+ T 细胞分选试剂盒，采用生物素-链霉亲和素免疫磁珠法，两步 cocktail 协同分选（CD4+ T Cell Isolation Cocktail + Memory T Cell Depletion Cocktail）、15 min 快速分选、纯度可从 5.92% 提升至 92.3%；使用前无需裂红处理，可直接倾倒法操作，分选细胞表面无抗体/磁珠标记、无异常激活，适配小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液，广泛用于T 细胞激活研究、过继转移研究、疫苗评价研究、自身免疫病研究、感染免疫研究等科研实验，2-8℃ 保存，有效期一年。
核心参数总表
储存与订购
参数 规格 品牌 FiniGet 分必得® 货号 130-6012（1×10⁹ cells）/ 130-6012S（1×10⁸ cells） 方法 免疫磁珠阴性分选（两步 cocktail：CD4+ T Cell Isolation Cocktail + Memory T Cell Depletion Cocktail + 链霉亲和素磁珠） 样本 小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液 目的细胞 naïve CD4+ T 细胞（CD4+CD44-CD62L+） 分选时间 15 min 分选纯度 可从分选前 5.92% 提升至分选后 92.3%（C57BL/6 小鼠脾脏，100 μL/1×10⁷ cells 体系，厂家测试） 储存 2-8℃，不可冷冻，有效期一年 配套磁力架 FiniGet 分必得® 140-2000（单孔）、140-2002（八连排） 配套缓冲液 FiniGet 分必得® 140-2001
产品特点
15 min 快速分选：CD4 Cocktail 室温孵育 7.5 min + Memory Cocktail 室温孵育 2.5 min + Beads 室温孵育 2.5 min + 磁极孵育 2.5 min，15 min 内获得目的细胞。
纯度可从 5.92% 提升至 92.3%：两步 cocktail 协同阴性分选——先以 CD4+ T Cell Isolation Cocktail 富集总 CD4+ T 细胞，再以 Memory T Cell Depletion Cocktail 去除 memory/effector 亚群，高纯度获取 naïve CD4+ T 细胞，C57BL/6 小鼠脾脏实测纯度可从 5.92% 提升至 92.3%。
无抗体/磁珠标记、无异常激活：阴性分选不触发表面受体交联，分选后细胞表面不结合任何抗体或磁珠，保持原始静息状态，可直接用于下游激活、培养、测序。
使用前无需裂红处理、倾倒法操作：无需分离柱，倾倒法即可获得未标记的目的细胞，单孔磁力架（140-2000）即可，操作门槛低。
样本兼容：支持小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液，可适配 C57BL/6、BALB/c 等常见品系。
产品保存
2-8℃保存，不可冷冻，避免反复冻融。有效期一年。
操作流程图
样本准备
制备单细胞悬液：在 70 μm 细胞筛网上研磨脾脏，以预冷的分选缓冲液冲洗细胞筛网，收集细胞悬液于 50 mL 离心管中，500 g，离心 5 min 后弃去上清。将细胞重悬于缓冲液中，调整细胞浓度为 1×10⁸ cells/mL。
◼ 分选缓冲液推荐使用含有 1 mM EDTA 和 2% 胎牛血清（FBS）的 PBS，需预先使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。缓冲液中不能含有钙离子、镁离子和生物素。也可使用 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。
◼ 推荐使用含 3% 乙酸的亚甲基蓝进行有核细胞计数，并按照有核细胞数量进行操作。
使用说明
磁力架方案：
140-2000 单孔磁力架 + 5 mL 流式管，处理 0.1-2 mL 样品（多达 2×10⁸ cells）
操作流程（脾脏起始，倾倒法）：
1. 吸取 100 μL 细胞悬液（1×10⁷ cells）加至流式管底部。
2. 加入 5 μL Mouse FcR Blocker，轻轻混匀。
◼ 此步骤为非必需流程，可根据实际需求选择执行；若分选更大数量的细胞可按比例增加 Mouse FcR Blocker 的用量。
3. 加入 10 μL Mouse CD4+ T Cell Isolation Cocktail，轻轻混匀，室温孵育 7.5 min。
◼ 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Mouse CD4+ T Cell Isolation Cocktail 的用量。
4. 加入 10 μL Mouse Memory T Cell Depletion Cocktail，轻轻混匀，室温孵育 2.5 min。
◼ 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Mouse Memory T Cell Depletion Cocktail 的用量。
5. 加入 7.5 μL Streptavidin Beads（使用前涡旋震荡 30 s 充分混匀），轻轻混匀，室温孵育 2.5 min。
◼ 磁珠在使用前需在涡旋震荡仪上充分混匀约 30 s，混匀后不可进行高速离心操作；若分选更大数量的细胞可按比例增加 Streptavidin Beads 的用量。
6. 加入分选缓冲液补至 2.5 mL，吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 2.5 min。
◼ 实验体系不可超过 2.5 mL，以避免超过磁极的分选范围。
7. 拿起磁力架，将细胞悬液轻柔、连贯地倾倒于无菌离心管，倾倒状态下保持 2-3 s 再恢复正立。此悬液中即包含纯化的小鼠 naïve CD4+ T 细胞。
◼ 倾倒过程中流式管不能脱离磁力架。
◼ 请勿摇晃或通过管口接触可能仍挂在流式管口的液滴。此液滴应丢弃。
8. 洗涤细胞后重悬于所需缓冲液或培养基，即可用于下游实验。
注意事项
1. 本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。
2. 建议使用低吸附移液器吸头和离心管，避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。
3. 分选过程应尽量轻柔，避免磁珠对细胞造成机械损伤。
4. 若后续进行细胞培养实验，分选过程需在无菌环境中进行。
5. 加入磁珠孵育时若出现沉淀，可每 1-2 min 轻弹管壁或吸打混匀。
6. 本产品仅可用于科研，不可用于诊断。
分选效果
小鼠脾脏分选 naïve CD4+ T 细胞前后流式结果对比 纯度分选前 5.92% 提升至分选后 92.3%
从 C57BL/6 小鼠脾脏细胞中分选 naïve CD4+ T 细胞（CD4+CD44-CD62L+），分选前后的细胞用 APC anti-mouse CD4 抗体（克隆号 GK1.5）、PE anti-mouse CD62L 抗体（克隆号 MEL-14） 和 FITC anti-mouse CD44 抗体（克隆号 NIM-R8） 标记后进行流式细胞仪分析，分选前后 naïve CD4+ T 细胞纯度分别为 5.92% 和 92.3%。
客户反馈：中山大学客户反馈，起始样本 1×10⁷ cells，C57 小鼠脾脏，分选后获得 9×10⁵ cells，目的细胞占比 19.9%，纯度 98.46%。
应用场景
T 细胞激活研究：naïve CD4+ T 细胞经 TCR 刺激（anti-CD3/CD28）后的增殖、分化（Th1/Th2/Th17/Treg）与细胞因子分泌分析
过继转移研究：纯化 naïve CD4+ T 细胞回输受体小鼠（如 CD4 敲除 / T 细胞缺陷模型），追踪体内归巢、扩增与分化命运
疫苗评价研究：评估疫苗诱导的 CD4+ T 细胞免疫应答，检测抗原特异性 Th1/Th2 平衡与细胞因子分泌
自身免疫病研究：EAE 模型（多发性硬化）+ NOD 模型（1 型糖尿病）+ SLE 模型中自身反应性 CD4+ T 细胞功能研究
感染免疫研究：利什曼原虫 / 结核分枝杆菌 / 流感病毒等感染模型中病原特异性 CD4+ T 细胞应答
选择指南
推荐使用：从小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液中快速获得naïve CD4+ T 细胞（CD4+CD44-CD62L+），用于下游 T 细胞激活 / 过继转移 / 疫苗评价 / 自身免疫病 / 感染免疫等实验。
不推荐使用：
需要 total CD4+ T 细胞（含 effector / memory 亚群）：请选择 130-6002（小鼠 CD4+ T 细胞分选试剂盒）
需要 CD8+ T 细胞：请选择 130-6003（小鼠 CD8+ T 细胞分选试剂盒） 或 130-6013（小鼠 Naïve CD8+ T 细胞分选试剂盒）
需要 pan B 细胞：请选择 130-6024（小鼠 Pan B 细胞分选试剂盒）
需要 NK 细胞：请选择 130-6005（小鼠 NK 细胞分选试剂盒）
样本是人 PBMC：请选择 120-6002（人 CD4+ T 细胞分选试剂盒）
常见问题 FAQ
Q: 130-6012 与 130-6002（小鼠 CD4+ T 细胞分选试剂盒）有什么区别？
A: 130-6002 用于分选 total CD4+ T 细胞（含 naïve / effector / memory 全部亚群），一步 cocktail 标记非 CD4 细胞即可；130-6012 专为分选 naïve CD4+ T 细胞（CD4+CD44-CD62L+）设计，需两步 cocktail——先以 CD4+ T Cell Isolation Cocktail 富集总 CD4+ T 细胞，再以 Memory T Cell Depletion Cocktail 去除 memory/effector 亚群，适合需要未接触抗原的初始 CD4+ T 细胞的实验，如 T 细胞激活与分化研究、过继转移实验。
Q: 130-6012 是正选还是负选？
A: 阴性分选。试剂盒中的生物素标记单克隆抗体 cocktail（CD4+ T Cell Isolation Cocktail + Memory T Cell Depletion Cocktail）结合小鼠脾脏细胞中的非 naïve CD4+ T 细胞（包括 CD8+ T 细胞、B 细胞、NK 细胞、单核细胞、粒细胞及 effector/memory CD4+ T 细胞等），通过链霉亲和素磁珠去除这些细胞，目的 naïve CD4+ T 细胞表面不结合任何抗体，保持原始静息状态。
Q: 130-6012 对分选缓冲液有什么要求？
A: 推荐使用含有 1 mM EDTA 和 2% 胎牛血清（FBS）的 PBS，需预先使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。缓冲液中不能含有钙离子、镁离子和生物素（生物素会与链霉亲和素磁珠竞争结合位点；钙镁离子会增加细胞聚集，影响分选）。也可使用 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。
Q: 130-6012 分选后的 naïve CD4+ T 细胞可以做激活/培养实验吗？
A: 可以。阴性分选不触发表面受体交联，分选后 naïve CD4+ T 细胞保持静息状态，可用 anti-CD3/CD28 抗体或抗原肽进行激活，用于增殖、分化（Th1/Th2/Th17/Treg）、细胞因子分泌等下游实验。
Q: 130-6012 需要哪些配套设备？
A: 推荐与 FiniGet 分必得® 磁力架配套使用：140-2000 单孔磁力架（0.1-2 mL / 2×10⁸ cells）。分选缓冲液推荐 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。操作流程使用 70 μm 细胞筛网 + 50 mL 离心管。
Q: 130-6012 分选 naïve CD4+ T 细胞需要多长时间？
A: 15 min。CD4 Cocktail 室温孵育 7.5 min + Memory Cocktail 室温孵育 2.5 min + Beads 室温孵育 2.5 min + 磁极孵育 2.5 min。
Q: 130-6012 起始样本是脾脏吗？需要裂红吗？
A: 起始样本是小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液，使用前无需裂红处理——样本准备阶段直接走 70 μm 筛网研磨 + 500 g 离心 5 min 弃上清的物理方法，不需 ACK 裂解液。个别红细胞残留极多的样本可参考通用小鼠脾脏单细胞悬液制备方法自行处理。
Q: 130-6012 需要 Mouse FcR Blocker 吗？
A: 非必需步骤。试剂盒附带 Mouse FcR Blocker（5 μL/次），可用于减少 Fc 受体介导的非特异性结合；若分选普通小鼠脾脏细胞，可跳过此步直接使用 cocktail。分选高 Fc 表达细胞群（如激活后的细胞、粒细胞比例高的样本）时建议使用。
Q: FiniGet 与进口头部品牌细胞分选试剂盒相比有什么异同？
A: 两者均能实现高纯度、高活性的细胞分选。
主要差异体现在 6 个维度：
分选速度：FiniGet 约 15 min，进口头部品牌人负选约 25 min、小鼠负选需 45-120 min；
分离柱：FiniGet 无需分离柱，进口头部品牌需额外采购分离柱；
裂红步骤：FiniGet 无需小鼠红细胞裂红，进口头部品牌需裂红处理；
操作温度：FiniGet 室温操作，进口头部品牌需 4℃ 低温；
样本处理量：均为 1×10⁷ cells；
试剂盒价格：FiniGet 约为进口品牌的 1/3 至 1/2。
Q: 什么情况下可以申请 FiniGet 分必得® 上门技术支持？
A: 首次使用 FiniGet 分必得® 试剂盒、样本类型特殊（罕见样本/高难度分选）、课题组集中采购（≥3 个试剂盒）等情况均可申请，其他需求详询客服。广州/深圳 24-48h 响应，其他城市提前半个月预约。预约：400-090-1923 / service@gooniebio.com。
Q: FiniGet 分必得® 上门技术支持是免费的吗？有次数限制吗？
A: 完全免费，不限单位、不限次数。预约：400-090-1923 / service@gooniebio.com。
技术支持
FiniGet 分必得® 隶属信天翁生物科技（广州）有限公司，深耕免疫磁珠细胞分选技术。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com
上门技术支持
细胞分选实验首次跑不通？FiniGet 分必得® 技术团队可上门带您跑一遍——现场操作演示 + 设备调试 + 技术培训。客服热线同技术支持，预约后会有专人对接细节。
覆盖范围与响应时效：
城市 响应时效 备注 广州 / 深圳 24-48h — 其他主要城市 提前半个月预约 北京、上海、杭州、成都、武汉、南京、西安、苏州等 偏远地区 提前半个月预约 可申请远程对接（视频指导），详询客服 申请方式：
- 客服热线：400-090-1923
- 邮箱：service@gooniebio.com
- 申请所需信息：单位名称、样本类型、地址、期望时间等
注：以上响应时效为常规情况，节假日顺延；具体上门时间以客服确认为准。
页面总结
FiniGet 分必得® 130-6012 小鼠 naïve CD4+ T 细胞分选试剂盒，免疫磁珠阴性分选，两步 cocktail 协同（CD4+ T Cell Isolation Cocktail + Memory T Cell Depletion Cocktail），15 min 快速分选、纯度可从分选前 5.92% 提升至分选后 92.3%；使用前无需裂红处理，可直接倾倒法操作，分选细胞无抗体/磁珠标记、无异常激活，适配小鼠脾脏、淋巴结单细胞悬液，2-8℃ 保存。
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产品组成
组成成分 货号 规格（大/小） Mouse CD4+ T Cell Isolation Cocktail 130-6012A 1 mL / 100 μL Mouse Memory T Cell Depletion Cocktail 130-6012B 1 mL / 100 μL Streptavidin Beads 150-2001 800 μL / 80 μL Mouse FcR Blocker 150-2003 500 μL / 50 μL -
注意事项
1. 本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。
2. 建议使用低吸附移液器吸头和离心管，避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。
3. 分选过程应尽量轻柔，避免磁珠对细胞造成机械损伤。
4. 若后续进行细胞培养实验，分选过程需在无菌环境中进行。
5. 加入磁珠孵育时若出现沉淀，可每1-2 min轻弹管壁或吸打混匀。
6. 本产品仅可用于科研，不可用于诊断。
关键词
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