小鼠CD8 T细胞分选试剂盒哪个好？FiniGet分必得®130-6003华南实验室流式实测数据汇总
发布时间:2026-07-21
一、实验概述
CD8+ T细胞是抗肿瘤免疫、抗感染免疫、T细胞功能学研究核心原代细胞，小鼠CD8分离是动物免疫课题常规样本处理手段。FiniGet分必得®130-6003小鼠CD8+T细胞阴性分离试剂盒采用阴性剔除方案，整套操作周期控制在15分钟，分离所得CD8+细胞无磁珠偶联、无表面受体交联损伤，可直接投入细胞杀伤、体外活化、多色流式分型等下游实验。
此前，我们收集广东省内高校、三甲医院、重点科研平台多批次动物Demo实验数据，所有操作严格遵循试剂盒官方操作手册，每组实验保存对应的原始流式检测图谱，直观呈现不同小鼠品系、不同脾脏处理条件下CD8+细胞富集纯度，文中收录多品牌同步对照实验数据。华南地区从事动物免疫研究的科研工作者，可根据这些实测数据筛选适配的细胞分离试剂。
二、实验基础参数
1. 分离试剂：FiniGet分必得®130-6003小鼠CD8+T细胞负选试剂盒，配套小规格型号130-6003-S
2. 分离机制：采用生物素标记Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail特异性结合CD4细胞、B细胞、髓系细胞等非目标免疫细胞，再通过链霉亲和素修饰磁珠捕获杂细胞，管内上清即为富集CD8+T细胞；阴性分离模式不会结合T细胞表面功能性分子，细胞维持静息原生状态。
3. 配套磁力载体：FiniGet分必得®140-2000单管磁力架、140-2002八联管磁力架
4. 流式鉴定标记：APC/Cy7 Rat Anti-mouse CD8a Antibody（克隆53-6.7）等流式抗体
5. 实验小鼠品系：C57BL/6常规品系、OT1抗原特异性小鼠、条件基因敲除小鼠、造模荷瘤失败小鼠
6. 组织来源：新鲜小鼠脾脏、脾脏+淋巴结混合单细胞悬液
7. 统一执行标准：无菌研磨脾脏后经细胞筛去除组织团块；如红细胞占比偏高样本可进行配套裂解流程；分选缓冲液不得含有Ca²⁺、Mg²⁺与游离生物素；磁珠使用前充分涡旋混匀。
说明：厂家实测数据展示，未经分选的C57小鼠脾脏单细胞中CD8细胞占比12.4%，使用FiniGet分必得®130-6003完成阴性分离后，流式检测纯度可达97.5%
三、华南地区动物实验室实测纯度统计
| 实验日期 | 客户 | 小鼠品系&组织样本 | 分选前CD8占比 | 分选后纯度 | 实验特殊处理条件 |
| 2026.01.06 | 中山大学P老师 | OT1小鼠脾脏 | 基因鼠天然低占比 | 96% | 完全遵照说明书试剂添加标准执行 |
| 2026.01.23 | 中山大学M老师 | C57新鲜脾脏 | 10% | 95.8% | 实验室计数设备故障，仅完成流式纯度判定 |
| 2026.02.01 | 中山大学孙逸仙纪念医院L老师 | 造模失败C57脾脏 | 14% | 90% | 同批次同步完成进口B*L品牌试剂对照实验 |
| 2026.02.25 | 广东省人民医院Y老师 | C385A小鼠脾脏 | 8.83% | 91.3% | 两种上样量平行测试（1×10⁸与1×10⁷），纯度一致 |
| 2026.03.03 | 深圳湾实验室L老师 | OT1小鼠脾脏+淋巴结 | 32% | 95% | 同步完成进口B*L品牌对照，FiniGet分必得®得率显著更优 |
| 2026.04.18 | 合作科研 | C57新鲜脾脏 | 10% | 95.8% | 完整复刻试剂盒推荐整套操作流程 |
| 2026.05.27 | 广州医科大学W老师 | 条件敲除小鼠脾脏 | 未检测 | 98% | 最终细胞收获量与S品牌无明显差异 |
| 2026.06.01 | 广州实验室Z老师 | 基因敲除小鼠脾脏 | 未检测 | 95%以上 | 多份脾脏组织合并制备单细胞悬液 |
| 2026.06.02 | 南方医科大学珠江医院W老师 | C57新鲜脾脏 | 5% | 94.31% | 分选前细胞活性维持95%，脾脏原生CD8占比偏低 |
| 2026.06.16 | 深圳湾实验室W老师 | C57新鲜脾脏 | 11.5% | 92% | 同等细胞量、同步操作流程开展平行比对 |
四、不同小鼠组织样本分离效果解析
4.1 常规C57BL/6小鼠脾脏富集表现
华南绝大多数动物实验室选用C57BL/6小鼠搭建免疫模型，新鲜脾脏完成研磨过滤后，采用FiniGet分必得®130-6003体系进行阴性分离，CD8细胞流式纯度稳定落在92%~97.1%区间。
4.2 OT1抗原特异性小鼠分离稳定性
OT1小鼠体内CD8+细胞为抗原特异性亚群，脾脏原生阳性细胞基线低于常规C57品系。中山大学、深圳湾实验室客户多组标准化平行实验证实，严格按照说明书配比添加试剂，即便起始目标细胞数量偏少，最终富集纯度仍可稳定维持95%~96%区间。深圳湾实验室客户采用OT1脾脏联合淋巴结混合样本进行分选，同步完成B*L进口品牌对照，FiniGet分必得®在纯度持平（均约95%）的前提下，细胞得率显著优于进口品牌，适配抗原递呈、T细胞活化等精细化功能实验。
4.3 基因敲除小鼠样本富集表现
广东省人民医院C385A条件敲除小鼠、广州医科大学、广州实验室等多客户多组敲除小鼠平行数据显示：FiniGet分必得®配套Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail可完整覆盖各类非目标杂细胞，即便CD8起始占比仅8.83%，分选后纯度仍可达91.3%；多份脾脏组织合并制备悬液后，细胞富集纯度稳定维持95%以上，适配基因编辑动物免疫机制研究。
4.4 多品牌平行分离数据对比
对标B*L进口品牌小鼠CD8阴性分离试剂盒：相同脾脏细胞上样总量、统一操作步骤前提下，FiniGet分必得®富集纯度具有可比性或更优表现；深圳湾实验室客户OT1脾脏+淋巴结混合样本同步对照中，两者纯度均约95%，但FiniGet分必得®细胞得率显著高于进口品牌；
五、FiniGet分必得®130-6003标准化细胞分离操作流程
方案A：140-2000单管磁力架（5mL流式管，单次最大处理2×10⁸细胞）
1. 小鼠脾脏单细胞制备：无菌摘取脾脏并剔除表面脂肪结缔组织，轻柔研磨后过细胞筛去除组织残渣；离心沉淀重悬于FiniGet分必得®专用分选缓冲液，细胞密度调整至1×10⁸ cells/mL；冻存脾脏组织复苏后，使用DNase I室温孵育15min打散交联细胞团。
2. Mouse FcR Blocker封闭：每1×10⁷脾脏单细胞添加 5 μL Mouse FcR Blocker，轻轻混匀。
3. Cocktail孵育：每1×10⁷脾脏单细胞添加10 μL Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail，轻柔吹打混匀，室温静置10min。
4. 磁珠结合孵育：每1×10⁷细胞添加10 μL充分涡旋30s的链霉亲和素磁珠，轻柔混匀，室温避光静置2.5min。
5. 磁力捕获分离：分选缓冲液补足至2.5mL，将流式管插入磁力架中，静置2.5min；保持试管贴合磁极倾倒上清，收集液体即为富集CD8+T细胞。
6. 细胞重悬处理：按需洗涤细胞沉淀，重悬于完全培养基或流式染色缓冲液，直接开展各类下游功能检测。
方案B：140-2002八联管磁力架（5mL流式管）
整套操作逻辑与方案A保持一致，磁力捕获静置时长调整至5min；禁止直接倾倒试管，采用移液器吸取上清，枪头避开管壁磁珠吸附区域。
方案C：140-2002八联管磁力架（14mL大体积流式管，大批量多鼠合并样本）
适配多只小鼠脾脏同步处理，根据总细胞数量等比例放大Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail与磁珠添加量；体系总体积控制在5~10mL，磁力捕获静置5min，吸取上清时避免枪头接触管壁。
分选缓冲液硬性规范
优先选用添加1mM EDTA、2%胎牛血清的无菌PBS，或是FiniGet分必得®140-2001专用分选缓冲液；缓冲体系中禁止混入Ca²⁺、Mg²⁺与游离生物素，该类物质会阻断磁珠与Cocktail的特异性结合，直接拉低细胞富集纯度。
六、科研高频技术答疑
Q1 分选完成后CD8+流式纯度偏低，该从哪些环节排查并修正？
纯度不足主要分为样本前处理、试剂操作、磁力分离三类诱因，对应标准化修正方案：
1. 样本层面：脾脏研磨残留组织碎片、DNA交联细胞团会引发非特异性吸附；分选前必须完整执行裂解流程，细胞悬液经筛网充分过滤打散团块。
2. 试剂操作层面：Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail、磁珠未按细胞总量匹配添加，磁珠使用前未充分涡旋；严格遵循每1×10⁷细胞对应的试剂添加体积，每次取用磁珠前涡旋30s。
3. 磁力分离层面：磁力静置时长不足、取液时试管脱离磁极；延长磁力捕获至标准时长，收集上清全程保持管壁贴合磁力架磁极。
Q2 脾脏制备单细胞后细胞活性低于90%，如何优化制备流程？
可从4个关键环节调整操作细节：1. 脾脏研磨动作轻柔，杜绝暴力挤压造成细胞膜机械破损；2. 全程使用预冷分选缓冲液，离心参数设定300×g 10min，高转速会造成细胞破裂；3. 冻存脾脏复苏必须配套DNase I孵育步骤，消除DNA交联形成的细胞聚集团。
Q3 阴性分离得到的CD8细胞能否直接用于体外增殖、细胞杀伤功能检测？
适用。本试剂盒为无柱阴性分离体系，磁珠仅标记杂细胞，CD8细胞全程无表面抗体交联、无活化刺激，分离后可铺板活化。
Q5 多只小鼠脾脏合并制备悬液同步分选，是否会降低最终CD8富集纯度？
标准化操作下纯度无明显下降。多份脾脏组织合并前，需单独制备合格单细胞悬液（细胞活率≥90%、无肉眼可见团块），再依据合并总细胞数等比例扩充Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail与磁珠用量，孵育、磁力捕获全部遵循标准时长，实测富集纯度与单鼠分选无明显差异。
Q6 流式检测CD8阳性细胞推荐荧光标记与上机设置要点？
通过负选分选试剂盒得到的细胞无需挑选特定克隆号的抗体，可以选择任意小鼠CD8a荧光流式抗体进行检测。
七、试剂盒储存与操作规范
1. 整套FiniGet分必得®130-6003试剂2~8℃避光冷藏，禁止冷冻处理，未开封状态有效期12个月；
2. 链霉亲和素磁珠取用前必须充分涡旋震荡30s，不可高速离心；
3. FiniGet分必得®130-6003仅限科研体外细胞分离使用，不得用于动物体内给药、人体临床诊断；
4. Mouse CD8+ T Cell Isolation Cocktail添加后轻柔混匀，剧烈震荡会破坏抗体空间构象，降低结合特异性；
八、全文总结
本文整合华南地区高校、三甲医院实验室采用FiniGet分必得®130-6003完成小鼠CD8细胞富集的多批次流式实测数据，搭配可溯源脾脏流式结果图，清晰展示该试剂在常规C57、OT1、基因敲除、荷瘤造模小鼠样本中稳定的靶细胞富集能力，同时提供一套完整标准化脾脏单细胞制备与阴性分离操作流程。华南从事动物肿瘤免疫、抗感染免疫课题的科研人员，可将本文作为试剂选型、标准化动物样本处理的参考资料。
如需浏览同系列细胞分离实测内容，可查阅人CD3细胞分选实测汇总，更多FiniGet分必得®产品信息请访问FiniGet品牌专区。
广州技术中心可提供FiniGet分必得®小鼠细胞分离免费Demo测试，有小鼠CD8细胞富集、小鼠T细胞分离相关动物实验需求的课题组，均可联系技术专员咨询。
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