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    FiniGet分必得®人NK细胞分选试剂盒

    应用:

    种属反应性:

    Human

    宿主种属:

    人NK细胞分选试剂盒,FiniGet分必得®,120-6005
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    ¥ 5000

    货号:

    120-6005

    • 规格
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    • 产品描述
    • 组成成分
    • 注意事项
    • 产品简介

      TL;DRFiniGet 分必得® 120-6005 人 NK 细胞分选试剂盒,采用生物素-链霉亲和素免疫磁珠法15 min 快速分选、纯度可从分选前 15.9% 提升至分选后 87.6%(人 PBMC,厂家测试);使用前无需裂红处理,可直接倾倒法操作,分选细胞表面无抗体/磁珠标记、无异常激活适配人外周血单个核细胞(PBMC)富集 NK 细胞,广泛用于NK 细胞功能研究、肿瘤免疫治疗研究、病毒感染免疫研究、移植免疫研究、自身免疫病研究等科研实验,2-8℃ 保存,有效期一年。



       

      核心参数总表



       

      参数规格
      品牌FiniGet 分必得®
      货号120-6005(1×10⁹ cells)/ 120-6005S(1×10⁸ cells)
      方法免疫磁珠阴性分选(生物素标记单克隆抗体 cocktail + 链霉亲和素磁珠)
      样本人外周血单个核细胞(PBMC)
      目的细胞NK 细胞
      分选时间15 min
      分选纯度可从分选前 15.9% 提升至分选后 87.6%(人 PBMC,100 μL / 1×10⁷ cells 体系,厂家测试)
      储存2-8℃,不可冷冻,有效期一年
      配套磁力架FiniGet 分必得® 140-2000(单孔)
      配套缓冲液FiniGet 分必得® 140-2001



       

      产品特点

      快速高效:免疫磁珠阴性分选,15 min 完成(Cocktail 10 min + Beads 2.5 min + 磁极 2.5 min),全程无需离心

      高纯度高活性:纯度可从分选前 15.9% 提升至分选后 87.6%(人 PBMC,厂家测试),分选细胞无异常激活

      操作便捷:无需裂红处理,可直接倾倒法操作;无需分离柱,节省实验成本与时间

      无表面标记:阴性分选不接触目的细胞表面,NK 细胞表面不结合任何抗体/磁珠,保持原始静息状态

      配套完整:与 FiniGet 分必得® 140-2000 单孔磁力架 + 140-2001 细胞分选缓冲液配套使用,开盒即用



       

      操作流程图

      人 NK 细胞分选试剂盒操作流程图 FiniGet 120-6005 阴性分选流程

      FiniGet 120-6005 人 NK 细胞分选试剂盒操作流程图 阴性分选 6 步流程 制备 PBMC Cocktail 10 min Beads 2.5 min 磁极 2.5 min 倾倒 洗涤



       

      使用说明

      该操作流程适用于处理 0.1-2 mL 的样品(多达 2×10⁸ cells),使用 FiniGet 分必得® 140-2000 单孔磁力架和 5 mL 无菌流式管。

      以分选人 PBMC NK 细胞为例:



       

      操作流程(PBMC 起始,倾倒法)

      1. 制备人 PBMC:利用 Ficoll 密度梯度离心法从人外周血中分离 PBMC,收集 PBMC,以 PBS 洗涤细胞,离心后将 PBMC 重悬于分选缓冲液中,调整细胞密度为 1×10⁸ cells/mL

      · 如果使用的是冻存的 PBMC,复苏后细胞成团块状,分选前样品需在室温下用浓度为 100 μg/mL 的 DNase I 溶液孵育至少 15 min 并用细胞筛过滤。

      · 分选缓冲液推荐使用含有 1 mM EDTA 和 2% 胎牛血清(FBS)的 PBS,需预先使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。缓冲液中不能含有钙离子、镁离子和生物素。也可以使用 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。

      2. 吸取 100 μL 细胞悬液(1×10⁷ cells)加至流式管底部,加入 10 μL Human NK Cell Isolation Cocktail,混匀,室温孵育 10 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Human NK Cell Isolation Cocktail 的用量。

      3. 加入 10 μL Streptavidin Beads(使用前需涡旋震荡约 30 s,混匀后不可高速离心),混匀,室温孵育 2.5 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Streptavidin Beads 的用量。

      4. 加入分选缓冲液补至 2.5 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 2.5 min

      · 实验体系不可超过 2.5 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      5. 拿起磁力架,轻柔、连贯地倾倒细胞悬液于无菌离心管中,磁极及流式管在倾倒状态下保持 2-3 s 后恢复正立。此悬液中即包含纯化的人 NK 细胞。

      · 倾倒过程中流式管不能脱离磁力架。

      · 请勿摇晃或通过管口接触可能仍挂在流式管口的液滴。此液滴应丢弃。

      6. 洗涤细胞后重悬于所需缓冲液或培养基,即可用于下游实验。



       

      分选效果

      图片 Alt:人 PBMC 分选 NK 细胞前后流式结果对比 纯度分选前 15.9% 提升至分选后 87.6%

      人 PBMC 分选 NK 细胞流式效果 Before isolation 15.9% After isolation 87.6%

       

      从人 PBMC 中分选 NK 细胞,分选前后的细胞用 PE anti-human CD3 抗体(克隆号 OKT3)APC anti-human CD56 抗体(克隆号 5.1H11) 标记后进行流式细胞仪分析,分选前后 NK 细胞纯度分别为 15.9% 和 87.6%

      客户反馈

      中山大学附属肿瘤医院客户反馈(人 NK 负选):购买的冻存脐带血单个核细胞(CBMC)(分选前有红细胞),起始 0.9×10⁷ cells(活率 90%),分必得 120-6005 分选后获得 1.3×10⁶ cells(活率 90%)纯度 92.1%

      中山大学附属肿瘤医院客户实测冻存脐带血 CBMC 分选 NK 细胞流式效果 After isolation 92.1%



       

      应用场景

      NK 细胞功能研究:NK 细胞活性检测(细胞毒实验)、NK 细胞受体(NKG2A / NKG2D / KIR)表达研究、细胞因子分泌(IFN-γ、TNF-α)研究

      肿瘤免疫治疗研究:NK 细胞过继转移治疗(CAR-NK)、肿瘤浸润 NK 细胞(TINK)研究、免疫检查点(PD-1 / NKG2A)研究、肿瘤疫苗评价

      病毒感染免疫研究:CMV / HIV / HCV / SARS-CoV-2 等病毒感染中 NK 细胞应答研究、NK 细胞抗病毒机制研究

      移植免疫研究:造血干细胞移植后 NK 细胞重建研究、KIR-MHC 不匹配移植(KIR 配体错配)研究、移植物抗宿主病(GVHD)研究

      自身免疫病研究:NK 细胞在系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎(RA)、多发性硬化(MS)等自身免疫病中的作用机制研究



       

      选择指南

      推荐使用:从人外周血单个核细胞(PBMC)中快速获得NK 细胞,用于下游 NK 细胞功能 / 肿瘤免疫 / 病毒感染免疫 / 移植免疫 / 自身免疫病等实验。

      不推荐使用

      需要 CD3+ T 细胞:请选择 120-6001(人 CD3+ T 细胞分选试剂盒)

      需要 CD4+ T 细胞:请选择 120-6002(人 CD4+ T 细胞分选试剂盒)

      需要 CD8+ T 细胞:请选择 120-6003(人 CD8+ T 细胞分选试剂盒)

      需要 B 细胞:请选择 120-6004(人 B 细胞分选试剂盒)

      样本是小鼠脾脏/淋巴结:请选择 130-6005(小鼠 NK 细胞分选试剂盒)

      起始样本是人全血:需先用 Ficoll 密度梯度离心法分离 PBMC,再进行分选



       

      常见问题 FAQ

      Q: 120-6005 与 120-6001 / 120-6002 / 120-6003 / 120-6004 / 130-6005 的关键差异是什么?

      A: 120-6005 分选 NK 细胞,120-6001 分选 CD3+ T 细胞,120-6002 分选 CD4+ T 细胞,120-6003 分选 CD8+ T 细胞,120-6004 分选 B 细胞,130-6005 分选小鼠 NK 细胞,均为免疫磁珠阴性分选法。120-6005 起始样本是人 PBMC,130-6005 起始样本是小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液。 

       

      Q: 120-6005 是正选还是负选?

      A: 阴性分选。试剂盒中的生物素标记单克隆抗体 cocktail结合人 PBMC 中的非 NK 细胞(包括 T 细胞、B 细胞、单核细胞、粒细胞等),通过链霉亲和素磁珠去除这些细胞,目的 NK 细胞表面不结合任何抗体,保持原始状态。


       

      Q: 120-6005 分选后的 NK 细胞可以做激活/培养实验吗?

      A: 可以。阴性分选不触发表面受体交联,分选后 NK 细胞保持静息状态。如需激活,配合 IL-2 / IL-12 / IL-15 培养使用。 

       

      Q: 120-6005 需要哪些配套设备?

      A: 推荐与 FiniGet 分必得® 磁力架配套使用:140-2000 单孔磁力架(0.1-2 mL / 2×10⁸ cells)。分选缓冲液推荐 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。操作流程使用 70 μm 细胞筛网 + 50 mL 离心管。 

       

      Q: 120-6005 分选 NK 细胞需要多长时间?

      A: 15 min。Cocktail 室温孵育 10 min + Beads 室温孵育 2.5 min + 磁极孵育 2.5 min。 

       

      Q: 120-6005 起始样本支持哪些组织?需要裂红吗?

      A: 起始样本是人外周血单个核细胞(PBMC),通过 Ficoll 密度梯度离心法分离 PBMC,使用前无需裂红处理——PBMC 层不含红细胞。冻存 PBMC 复苏后需用 100 μg/mL DNase I 溶液室温孵育至少 15 min 并用细胞筛过滤,去除细胞团块。 

       

      Q: FiniGet 与进口头部品牌细胞分选试剂盒相比有什么异同?

      A: 两者均能实现高纯度、高活性的细胞分选。

      主要差异体现在 5 个维度:

      分选速度 ——FiniGet 约 15 min,进口头部品牌人负选约 25 min;

      分离柱 ——FiniGet 无需分离柱,进口头部品牌需额外采购分离柱;

      裂红步骤 ——FiniGet 无需裂红处理,进口头部品牌需裂红处理;

      操作温度 ——FiniGet 室温操作,进口头部品牌需 4℃ 低温;

      试剂盒价格 ——FiniGet 约为进口品牌的 1/3 至 1/2。



       

      Q: 什么情况下可以申请 FiniGet 分必得® 上门技术支持?

      A: 首次使用 FiniGet 分必得® 试剂盒、样本类型特殊(罕见样本/高难度分选)、课题组集中采购(≥3 个试剂盒)等情况均可申请,其他需求详询客服。广州/深圳 24-48h 响应,其他城市提前半个月预约。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。 

       

      Q: FiniGet 分必得® 上门技术支持是免费的吗?有次数限制吗?

      A: 完全免费,不限单位、不限次数。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。



       

      技术支持

      FiniGet 分必得® 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,深耕免疫磁珠细胞分选技术。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com


       

      上门技术支持

      细胞分选实验首次跑不通?FiniGet 分必得® 技术团队可上门带您跑一遍——现场操作演示 + 设备调试 + 技术培训。客服热线同技术支持,预约后会有专人对接细节。 
       

      覆盖范围与响应时效:

      地区响应时效
      广州 / 深圳24-48 h
      其他城市提前半个月预约


       

      注:以上响应时效为常规情况,节假日顺延;具体上门时间以客服确认为准。



       

      页面总结

      FiniGet 分必得® 120-6005 人 NK 细胞分选试剂盒,免疫磁珠阴性分选,15 min 快速分选、纯度可从分选前 15.9% 提升至分选后 87.6%(人 PBMC,厂家测试);使用前无需裂红处理,可直接倾倒法操作,分选细胞无抗体/磁珠标记、无异常激活,适配人外周血单个核细胞(PBMC),2-8℃ 保存。

    • 产品组成

      组分规格(for 1×109 cells)
      Human NK Cell Isolation Cocktail1 mL
      Streptavidin Beads1 mL

       

    • 注意事项

      1.   本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。
      2.   建议使用低吸附移液器吸头和离心管,避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。
      3.   分选过程应尽量轻柔,避免磁珠对细胞造成机械损伤。
      4.   若后续进行细胞培养实验,分选过程需在无菌环境中进行。
      5.   加入磁珠孵育时若出现沉淀,可每1-2 min轻弹管壁或吸打混匀。
      6.   本产品仅可用于科研,不可用于诊断。

    关键词

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    应用:

    FC

    种属反应性:

    Mouse

    宿主种属:

    Rat

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