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    FiniGet分必得®人CD4 + 细胞正选试剂盒

    应用:

    种属反应性:

    宿主种属:

    15分钟极速分选,纯度大于95%

    产品名称:FiniGet分必得®人CD4 + 细胞正选试剂盒 货号:120-5002 / 120-5002-S 规格:1kit(1x10^9),1kit(1x10^8) 目录价:¥4,000.00,¥800.00 品牌:FiniGet分必得® 厂家:信天翁生物科技(广州)有限公司 官网产品链接:https://www.gooniebio.cn/products/finiget/human-cd4-positive-selection-kit-120-5002.html
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    货号:

    120-5002

    • 规格:
      • 1×10^8
      • 1×10^9

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    • 产品描述
    • 组成成分
    • 注意事项
    • 产品简介

      TL;DRFiniGet 分必得® 120-5002 人 CD4+ 细胞正选试剂盒,采用生物素-链霉亲和素免疫磁珠阳选富集法15 min 快速分选、纯度从 30.03% 提升至 98.02%无需裂红,支持倾倒法或吸弃法操作,分选细胞活性好、无异常激活适配新鲜/冻存 PBMC,广泛用于HIV 感染研究、自身免疫病、过敏与哮喘、移植免疫、疫苗研发、肿瘤免疫等科研实验,2-8℃ 保存,有效期一年。



       

      核心参数总表

      储存与订购



       

      参数规格
      品牌FiniGet 分必得®
      货号120-5002(1×10⁹ cells)/ 120-5002-S(1×10⁸ cells)
      方法免疫磁珠阳选富集(生物素标记单克隆抗体 cocktail + Positive Selection Beads)
      样本人 PBMC
      目的细胞CD4+ 细胞(辅助性 T 细胞)
      分选时间约 15 min
      分选纯度可从分选前 30.03% 提升至分选后 98.02%(人 PBMC,厂家测试)
      储存2-8℃,不可冷冻,有效期一年
      配套磁力架FiniGet 分必得® 140-2000(单孔)/ 140-2002(八联排)
      配套缓冲液FiniGet 分必得® 140-2001
      目录价120-5002(1×10⁹ cells)¥4,000 / 120-5002-S(1×10⁸ cells)¥800

      人 CD4+ 细胞正选试剂盒(货号 120-5002)采用免疫磁珠阳选富集法,通过生物素标记单克隆抗体 cocktail 识别人 PBMC 中的 CD4 表面标志物,将 CD4+ 细胞标记,再通过 Positive Selection Beads 捕获目标细胞。经磁力分离后,非目标细胞直接弃掉,所需 CD4+ 细胞被磁珠保留在管中。洗涤后释放纯化的人 CD4+ 辅助性 T 细胞,纯度高达 98.02%,活性好、无异常激活,可直接用于下游实验。



       

      产品特点

      15 min 快速分选:抗体孵育 3 min + 磁珠孵育 3 min + 磁选与洗涤约 9 min,15 min 内获得高纯度 CD4+ 细胞。

      纯度高:阳选法直接富集 CD4+ 细胞,流式验证纯度可从分选前 30.03% 提升至 98.02%。

      细胞活性好、无异常激活:磁珠温和捕获目标细胞,分选后细胞活性好、无异常激活,可直接用于下游分子生物学或细胞生物学实验。

      无需裂红、操作简便无需分离柱,搭配 FiniGet 分必得® 磁力架即可使用,支持倾倒法或吸弃法操作,操作门槛低。

      样本兼容:支持新鲜或冻存人 PBMC



       

      操作流程图

      人 CD4+ 细胞正选试剂盒操作流程图 FiniGet 120-5002 阳选富集法流程

      人 CD4+ 细胞正选试剂盒操作流程图 FiniGet 120-5002 阳选富集法流程


       

      使用说明

      本试剂盒提供三种操作方案,可根据实验室磁力架型号、流式管规格和起始细胞量灵活选择。以下为以分选人 PBMC 中 CD4+ 细胞为例的完整操作流程。



       

      方案 A使用 FiniGet 分必得® 140-2000 磁力架(单孔磁力架)+ 5 mL 无菌流式管,处理 0.1-2 mL 样品(多达 2×10⁸ cells)

      1. 制备人 PBMC:利用 Ficoll 密度梯度离心法从人外周血中分离 PBMC,收集 PBMC,以 PBS 洗涤细胞,离心后将 PBMC 重悬于分选缓冲液中,调整细胞密度为 1×10⁸ cells/mL

      · 如果使用的是冻存的 PBMC,复苏后细胞成团块状,分选前样品需在室温下用浓度为 100 μg/mL 的 DNase I 溶液孵育至少 15 min 并用细胞筛过滤。

      · 分选缓冲液推荐使用含有 1 mM EDTA 和 2% 胎牛血清(FBS)的 PBS,需预先使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。缓冲液中不能含有钙离子、镁离子和生物素。也可以使用 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。

      2. 吸取 100 μL 细胞悬液(1×10⁷ cells)加入无菌流式管底部,加入 10 μL Human CD4 Positive Selection Cocktail,轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Human CD4 Positive Selection Cocktail 的用量。

      3. 加入 10 μL Positive Selection Beads(使用前需涡旋震荡约 30 s,混匀后不可高速离心),轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Positive Selection Beads 的用量。

      4. 加入分选缓冲液补至 2.5 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 3 min

      · 实验体系不可超过 2.5 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      5. 拿起磁力架,连贯地将磁力架和流式管倾倒,将上清弃掉。将磁力架和流式管回置,从磁力架中取出流式管,迅速加入 2 mL 分选缓冲液,用移液器轻轻吹打几次,分散磁珠。将流式管置于磁力架上,静置 3 min

      · 倾倒过程中流式管不能脱离磁力架。

      6. 重复步骤 5。

      7. 拿起磁力架,连贯地将磁力架和流式管倾倒,将上清弃掉。将磁力架和流式管回置,从磁力架中取出流式管,其中包含纯化的人 CD4+ 细胞。将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中,确保细胞从流式管壁上收集完全,即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验。



       

      方案 B使用 FiniGet 分必得® 140-2002 磁力架(八联排磁力架)+ 5 mL 无菌流式管,处理 0.1-2 mL 样品(多达 2×10⁸ cells)

      1. 制备人 PBMC:同方案 A 步骤 1。

      2. 吸取 100 μL 细胞悬液(1×10⁷ cells)加入无菌流式管底部,加入 10 μL Human CD4 Positive Selection Cocktail,轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Human CD4 Positive Selection Cocktail 的用量。

      3. 加入 10 μL Positive Selection Beads(使用前需涡旋震荡约 30 s,混匀后不可高速离心),轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Positive Selection Beads 的用量。

      4. 加入分选缓冲液补至 2.5 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 10 min

      · 实验体系不可超过 2.5 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      5. 小心将细胞悬液吸弃后,从磁力架中取出流式管,迅速加入 2 mL 分选缓冲液,用移液器轻轻吹打几次,分散磁珠。将流式管置于磁力架上,静置 5 min

      · 吸弃过程中请勿倾倒磁力架,枪头不要触碰到磁珠。

      6. 重复步骤 5。

      7. 小心将细胞悬液吸弃后,从磁力架中取出流式管,其中包含纯化的人 CD4+ 细胞。将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中,确保细胞从流式管壁上收集完全,即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验。



       

      方案 C使用 FiniGet 分必得® 140-2002 磁力架(八联排磁力架)+ 14 mL 无菌流式管,处理 0.5-8 mL 样品(多达 8×10⁸ cells)

      1. 制备人 PBMC:同方案 A 步骤 1。

      2. 吸取 500 μL 细胞悬液(5×10⁷ cells)加入 14 mL 无菌流式管底部,加入 50 μL Human CD4 Positive Selection Cocktail,轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Human CD4 Positive Selection Cocktail 的用量。

      3. 加入 50 μL Positive Selection Beads(使用前需涡旋震荡约 30 s,混匀后不可高速离心),轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Positive Selection Beads 的用量。

      4. 加入分选缓冲液补至 5-10 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 10 min

      · 实验体系不可超过 10 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      5. 小心将细胞悬液吸弃后,从磁力架中取出流式管,迅速加入 5-10 mL 分选缓冲液,用移液器轻轻吹打几次,分散磁珠。将流式管置于磁力架上,静置 5 min

      · 吸弃过程中请勿倾倒磁力架,枪头不要触碰到磁珠。

      6. 重复步骤 5。

      7. 小心将细胞悬液吸弃后,从磁力架中取出流式管,其中包含纯化的人 CD4+ 细胞。将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中,确保细胞从流式管壁上收集完全,即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验。



       

      分选效果

      从人 PBMC 中分选 CD4+ 细胞,分选前后的 CD4+ 细胞比例分别为 28% 和 95.7%

      本 CD4+ 细胞正选试剂盒使用的抗 CD4 抗体克隆可能会完全或部分阻断用于流式细胞术评估纯度的抗 CD4 抗体克隆。建议使用以下克隆号的荧光素偶联抗体进行下游的流式检测:

      • Anti-Human CD4 Antibody, Clone OKT4(FiniGet 分必得® 自有 11-1004-1 FITC Mouse Anti-human CD4 Antibody)
      • Anti-Human CD4 Antibody, Clone RPA-T4
      • Anti-Human CD4 Antibody, Clone SK3

      也可采用以下方法:

      • 使用荧光染料偶联的二抗,例如 Goat Anti-Mouse IgG (H+L) Antibody。



       

      应用场景

      HIV 感染与免疫研究:CD4+ T 细胞是 HIV 的主要靶细胞,分选 CD4+ 细胞用于 HIV 感染机制、病毒潜伏库(latent reservoir)、潜伏与激活、抗病毒免疫及治疗策略研究。

      自身免疫病研究:从患者外周血中分离 CD4+ T 细胞,用于 Th1/Th2/Th17/Treg 亚群分化与平衡、自身反应性 T 细胞分析。如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)、1 型糖尿病、多发性硬化等疾病中 CD4+ T 细胞功能与表型研究。

      过敏与哮喘研究:分选 CD4+ T 细胞用于 Th2 型免疫应答、IL-4/IL-5/IL-13 等细胞因子分泌、IgE 类别转换调控及过敏性气道炎症机制研究。

      移植免疫研究:异基因造血干细胞移植或实体器官移植后,CD4+ T 细胞重建动力学监测、移植物抗宿主病(GVHD)与免疫排斥反应中 CD4+ T 细胞的作用分析。

      疫苗研发:分析疫苗免疫后抗原特异性 CD4+ T 细胞应答,分离 CD4+ T 细胞用于 T 细胞受体(TCR)库分析、细胞因子分泌谱与免疫记忆研究。

      肿瘤免疫与细胞治疗研究:分选 CD4+ T 细胞用于肿瘤微环境中辅助性 T 细胞功能、CAR-T 细胞制备中 CD4+/CD8+ 起始材料配比,以及免疫检查点(如 PD-1/PD-L1)相关机制研究。



       

      选择指南

      推荐使用:从人 PBMC 中快速获得CD4+ 辅助性 T 细胞,用于下游分析、培养、测序等实验。

      其他实验方案推荐:

      需要未标记的 CD4+ T 细胞:阳选法分选后 CD4+ 细胞表面有抗体/磁珠标记,如需无标记 CD4+ T 细胞,请选择阴性分选产品 120-6002(人 CD4+ T 细胞分选试剂盒)

      需要总 T 细胞:请选择 120-6001(人 CD3+ T 细胞分选试剂盒),或 120-5001(人 CD3+ 细胞正选试剂盒)

      需要 CD8+ T 细胞:请选择 120-6003(人 CD8+ T 细胞分选试剂盒),或 120-5003(人 CD8+ 细胞正选试剂盒)

      需要 B 细胞 / NK 细胞:请选择 120-5004(人 CD19+ 细胞正选试剂盒)120-5005(人 CD56+ 细胞正选试剂盒)

      样本是小鼠来源:请选择 130-6002(小鼠 CD4+ T 细胞分选试剂盒)系列

      起始样本是全血:建议先做 Ficoll 密度梯度离心分离 PBMC



       

      常见问题 FAQ

      Q: 120-5002 与 FiniGet 分必得® 其他细胞分选试剂盒的关键差异是什么?

      A: 120-5002 采用阳选法分选CD4+ 辅助性 T 细胞,120-5001 分选 CD3+ T 细胞,120-5003 分选 CD8+ T 细胞,120-5004 分选 CD19+ B 细胞,120-5005 分选 CD56+ NK 细胞;120-6001 阴性分选总 CD3+ T 细胞、120-6002 阴性分选 CD4+ T 细胞、120-6003 阴性分选 CD8+ T 细胞、120-6004 阴性分选 B 细胞、120-6005 阴性分选 NK 细胞,。所有产品起始样本均为人 PBMC(130 系列为小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液)。



       

      Q: 120-5002 是正选还是负选?分选后细胞表面有抗体标记吗?

      A: 120-5002 是阳选法(正选法)。试剂盒中的生物素标记单克隆抗体 cocktail 结合人 PBMC 中的 CD4+ 细胞,通过 Positive Selection Beads 捕获目标细胞。分选后 CD4+ 细胞表面有抗体标记,细胞无异常激活,可直接用于下游实验。如需无标记 CD4+ T 细胞,请选择阴性分选产品 120-6002



       

      Q: 120-5002 分选后的细胞可以做流式检测吗?

      A: 可以。由于本产品使用的抗 CD4 抗体克隆可能会阻断部分检测抗体,建议使用 OKT4RPA-T4SK3 克隆号的荧光素偶联抗 CD4 抗体进行下游流式检测;也可使用荧光染料偶联的二抗(如 Goat Anti-Mouse IgG)。其中 OKT4 克隆可直接选用 FiniGet 分必得® 自有抗体 11-1004-1



       

      Q: 120-5002 分选纯度是多少?

      A: 从人 PBMC 中分选 CD4+ 细胞,分选前 CD4+ 细胞比例为 28%,分选后可提升至 95.7%(厂家测试数据,详见分选效果图)。



       

      Q: 120-5002 需要哪些配套设备?

      A: 推荐与 FiniGet 分必得® 磁力架配套使用:140-2000 单孔磁力架(搭配 5 mL 流式管,处理 ≤2×10⁸ cells)或 FiniGet 分必得® 140-2002 八联排磁力架(搭配 5 mL 流式管处理 ≤2×10⁸ cells,或搭配 14 mL 流式管处理 ≤8×10⁸ cells)。三种方案详见上方"使用说明"。分选缓冲液推荐 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液
       

       

       

      Q: 120-5002 起始样本支持哪些组织?需要裂红吗?

      A: 起始样本是人外周血单个核细胞(PBMC),通过 Ficoll 密度梯度离心法分离 PBMC,使用前无需裂红处理——PBMC 层不含红细胞。冻存 PBMC 复苏后需用 100 μg/mL DNase I 溶液室温孵育至少 15 min 并用细胞筛过滤,去除细胞团块。起始细胞量推荐 1×10⁷ cells(100 μL 体系,方案 A/B),方案 C 支持 5×10⁷ cells(500 μL 体系),单次处理上限 8×10⁸ cells
       

       

       

       

      Q: 120-5002 与 120-6002(阴性分选)相比有什么区别?

      A: 两者均用于从人 PBMC 中分选 CD4+ T 细胞,主要差异:

      分选原理——120-5002 阳选法(直接捕获 CD4+ 细胞),120-6002 阴性分选法(去除非 CD4+ 细胞);

      细胞标记——120-5002 分选后细胞表面有抗体标记,120-6002 分选后细胞表面无标记;

      适用场景——两种方案分选的细胞均无异常激活、均可直接用于下游实验;如需表面完全无标记的 CD4+ T 细胞用于特定下游,推荐 120-6002,如追求快速高纯度富集可选 120-5002。


       

      Q: 什么情况下可以申请 FiniGet 分必得® 上门技术支持?

      A: 首次使用 FiniGet 分必得® 试剂盒、样本类型特殊(罕见样本/高难度分选)、课题组集中采购(≥3 个试剂盒)等情况均可申请,其他需求详询客服。广州/深圳 24-48h 响应,其他城市提前半个月预约。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。


       

      Q: FiniGet 分必得® 上门技术支持是免费的吗?有次数限制吗?

      A: 完全免费,不限单位、不限次数。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。



       

      技术支持

      FiniGet 分必得® 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,深耕免疫磁珠细胞分选技术。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com



       

      上门技术支持

      细胞分选实验首次跑不通?FiniGet 分必得® 技术团队可上门带您跑一遍——现场操作演示 + 设备调试 + 技术培训。客服热线同技术支持,预约后会有专人对接细节。



       

      覆盖范围与响应时效:

      城市响应时效备注
      广州 / 深圳24-48h 
      其他主要城市提前半个月预约北京、上海、杭州、成都、武汉、南京、西安、苏州等
      偏远地区提前半个月预约可申请远程对接(视频指导),详询客服

      申请方式:

      • 客服热线:400-090-1923
      • 邮箱:service@gooniebio.com
      • 申请所需信息:单位名称、样本类型、地址、期望时间等

      注:以上响应时效为常规情况,节假日顺延;具体上门时间以客服确认为准。



       

      页面总结

      FiniGet 分必得® 120-5002 人 CD4+ 细胞正选试剂盒,免疫磁珠阳选富集法,15 min 快速分选、纯度可从分选前 30.03% 提升至分选后 98.02%(人 PBMC,厂家测试);使用前无需裂红处理,支持倾倒法或吸弃法操作,分选细胞活性好、无异常激活,适配人外周血单个核细胞(PBMC),2-8℃ 保存。



       

    • 组分名称货号:120-5002 规格(For 1×10⁹ cells)货号:120-5002-S 规格(For 1×10⁸ cells)
      120-5002A Human CD4 Positive Selection Cocktail1 mL 100 μL
      150-2002 Positive Selection Beads1 mL 100 μL
    • 注意事项

      1.   本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。
      2.   建议使用低吸附移液器吸头和离心管,避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。
      3.   分选过程应尽量轻柔,避免磁珠对细胞造成机械损伤。
      4.   若后续进行细胞培养实验,分选过程需在无菌环境中进行。
      5.   加入磁珠孵育时若出现沉淀,可每1-2 min轻弹管壁或吸打混匀。
      6.   本产品仅可用于科研,不可用于诊断。

    关键词

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