CentriSep™ 人粒细胞去除试剂盒
无需磁极、分选柱，仅需常规离心机即可完成去除
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- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
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产品简介
TL;DR：FiniGet 分必得® 120-7003 CentriSep™ 人粒细胞去除试剂盒，基于密度梯度离心分离技术，无需磁力架或分选柱，仅需常规离心机即可从人全血中特异性去除粒细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞），去除率约 99.4%（CD66b+ 粒细胞占比从 12.66% 降至 0.08%，流式验证）；适用于人全血样本，2-8℃ 保存，有效期一年。
核心参数总表
产品特点
无需磁力架：仅需常规离心机即可完成分选，设备门槛低，实验室普适性强。
特异性去除：通过 CentriSep™ 研发平台研制的特异性试剂，在密度梯度离心中将粒细胞随红细胞沉降至管底，目标细胞保留在界面层。
去除效率高：流式验证粒细胞（CD66b+）占比从 12.66% 降至 0.08%，去除率约 99.4%。
操作简便：全血样本直接处理，无需预先分离 PBMC，简化实验流程。
样本兼容：针对人全血优化。
操作流程图
使用说明
本实验全程室温操作。
方案 A：使用普通离心管的实验步骤
1. 混匀血液样本。
2. 在血液样本中加入 CentriSep™ Human Granulocyte Depletion Reagent，每 1 mL 全血加入 50 μL，混匀。
3. 室温下孵育 20 min 至 30 min。
4. 加入等体积的细胞分选缓冲液稀释血液样本，混合均匀。
5. 在离心管或流式管中加入对应体积的淋巴细胞分离液（参考下文推荐用量）。
6. 在分离液上方轻轻加入稀释过的血液样本，缓慢轻柔加入，避免样本与分离液混合。
7. 1200 ×g 离心 20 min，注意将离心机减速（deceleration）设置为 0。
· 减速过快会扰动密度梯度界面，影响去除效果。
8. 使用移液器将分离液界面层上方的细胞收集到新的离心管，尽量不要吸到分离液。
9. 在收集的细胞中加入 PBS，用移液器轻轻吹打。
10. 800 ×g 离心 4 min，注意将离心机的减速调低。离心后弃上清。
11. PBS 重悬后，600 ×g 再次离心 4 min，注意将离心机的减速度调低。
12. 弃去上清后用所需的培养基或缓冲液重悬细胞，进行后续实验。
方案 B：使用含隔层的 PBMC 专用离心管的实验步骤
1. 混匀血液样本。
2. 在样本中加入 CentriSep™ Human Granulocyte Depletion Reagent，每 1 mL 全血加入 50 μL，混匀。
3. 室温下孵育 20 min 至 30 min。
4. 加入等体积的细胞分选缓冲液稀释血液样本，混合均匀。
5. 在专用离心管中加入对应体积的淋巴细胞分离液（参考下文推荐用量）。
6. 在分离液上方轻轻加入稀释过的血液样本。
7. 1200 ×g 离心 10 min，无需调低离心机的减速设置。
· 如果样本收集时间超过 24 小时，本步骤需离心 20 min。
8. 将分离液上层的细胞倒入新的离心管中。
· 本步骤有可能混入少量红细胞，属正常现象。
9. 清洗富集的细胞：在收集的细胞中加入 PBS，用移液器轻轻吹打。
10. 800 ×g 离心 4 min，注意将离心机的减速设置调低。离心后弃上清。
11. PBS 重悬后，600 ×g 再次离心 4 min，注意将离心机的减速度调低。
12. 弃去上清后用所需的培养基或缓冲液重悬细胞，进行后续实验。
淋巴细胞分离液推荐用量：
血液体积 离心管规格 分离液用量 < 2 mL 5 mL 离心管 1.5 mL 2 - 5 mL 15 mL 离心管（普通） 3 - 4 mL 2 - 5 mL 15 mL 离心管（含隔层专用） 4.5 mL ≥ 5 mL 50 mL 离心管 15 mL
去除效果
图片 Alt：人全血去除粒细胞前后流式结果对比 粒细胞从 12.66% 降至 0.08%
从人全血中去除粒细胞，密度梯度离心后，未去除和去除处理的细胞用 FITC anti-human CD66b 抗体标记后进行流式细胞仪分析：
指标 未去除（Without depletion） 去除后（With depletion） 粒细胞占 PBMC 比例 12.66% 0.08% 去除率约 99.4%，获得高纯度的无粒细胞的细胞群。
应用场景
免疫学研究：去除粒细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞）干扰，研究 T 细胞、B 细胞、NK 细胞等其他免疫细胞的功能与表型
肿瘤免疫研究：在无粒细胞背景下研究肿瘤微环境中其他免疫细胞的作用，排除粒细胞对肿瘤免疫应答的干扰
感染免疫研究：分析非粒细胞群体在感染免疫应答中的贡献，尤其适用于细菌感染后中性粒细胞大量激活的场景
炎症研究：在去除粒细胞后研究其他免疫细胞在炎症反应中的角色，避免粒细胞释放的活性氧和蛋白酶干扰
自身免疫病研究：在去除粒细胞后研究其他免疫细胞在自身免疫病中的角色
选择指南
推荐使用：从人全血中特异性去除粒细胞，保留其他 PBMC 用于下游实验，无需磁力架。
其他产品推荐
需要去除 CD3+ 细胞：请选择 FiniGet 分必得® 120-7001（人 CD3+ 细胞去除试剂盒），基于密度梯度离心法从全血中去除 CD3+ 细胞。
需要去除 CD4+ 细胞：请选择 FiniGet 分必得® 120-7002（人 CD4+ 细胞去除试剂盒），基于密度梯度离心法从全血中去除 CD4+ 细胞。
需要富集 CD4+ T 细胞：请选择 FiniGet 分必得® 120-6002（人 CD4+ T 细胞分选试剂盒），采用免疫磁珠阳性分选法富集 CD4+ T 细胞。
需要 CD8+ T 细胞：请选择 FiniGet 分必得® 120-6003（人 CD8+ T 细胞分选试剂盒）
常见问题 FAQ
Q: 120-7003 需要哪些配套设备？
A: 仅需常规水平转子离心机，无需磁力架或分选柱。配套试剂：GOONIE 人外周血淋巴细胞分离液（货号 100-306）、FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。
Q: 120-7003 可以处理多少全血？
A: 每管试剂（2 mL）可处理最多 40 mL 全血。不同体积样本需搭配不同规格离心管和分离液用量，详见"使用说明"中的推荐用量表。
Q: 120-7003 可以用于冻存 PBMC 吗？
A: 本产品针对全血优化。如起始样本为冻存 PBMC，建议复苏后使用 FiniGet 分必得® 系列免疫磁珠分选试剂盒。
Q: 去除效果如何验证？
A: 建议使用流式细胞仪检测。取分选前后细胞，用 FITC anti-human CD66b 抗体标记，分析粒细胞占 PBMC 的比例。厂家实测数据：从 12.66% 降至 0.08%。
Q: 离心参数为什么要求减速设置为 0 或调低？
A: 减速过快会扰动已形成的密度梯度界面，导致界面层细胞与底层细胞混合，影响去除效果和回收细胞纯度。
Q: 使用含隔层的专用离心管和普通离心管有什么区别？
A: 含隔层的专用离心管可简化铺层操作、缩短离心时间（10 min vs 20 min），且无需调低减速设置，适合批量样本处理。
技术支持
FiniGet 分必得® 隶属信天翁生物科技（广州）有限公司，深耕细胞分离技术。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com
页面总结
FiniGet 分必得® 120-7003 CentriSep™人粒细胞去除试剂盒，基于密度梯度离心技术，从人全血中特异性去除粒细胞，去除率约 99.4%（CD66b+ 粒细胞占比从 12.66% 降至 0.08%）。全程无需磁力架或分选柱，仅需常规离心机即可完成操作。适用于人全血样本，2-8℃ 保存。
实验方案干货推荐
《从人全血分离 PBMC 实操指南，免疫磁珠细胞分选前置标准流程》
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产品组成
组分 规格 CentriSep™ Human Granulocyte Depletion Reagent 2 mL（可处理 40 mL 全血）
2 mL×5（可处理 200 mL 全血）
其他所需试剂
1. 密度为 1.077 g/mL 的淋巴细胞分离液，推荐使用 GOONIE 人外周血淋巴细胞分离液（货号 100-306）。
2. 细胞分选缓冲液：含 1 mM EDTA 和 2% 胎牛血清（FBS）的 PBS，需预先使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。缓冲液中不能含有钙离子、镁离子和生物素。推荐使用 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。
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注意事项
1. 本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。
2. 若后续进行细胞培养实验，分选过程需在无菌环境中进行。
3. 本产品仅可用于科研，不可用于诊断。
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