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    FiniGet分必得®人CD3 + 细胞正选试剂盒

    17分钟快速分选,纯度超95%

    人CD3 + 细胞正选试剂盒,FiniGet,120-5001
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    ¥ 800

    货号:

    120-5001

    • 规格
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    • 产品描述
    • 组成成分
    • 注意事项
    • 产品简介

      TL;DRFiniGet 分必得® 120-5001 人 CD3+ 细胞正选试剂盒,采用生物素-链霉亲和素免疫磁珠正选法17 min 快速分选、纯度高达 99.1%无需裂红,倾倒法操作,分选细胞活性好、无异常激活适配新鲜/冻存 PBMC,广泛用于肿瘤免疫研究、CAR-T 制备研究、自身免疫病研究、感染免疫研究等科研实验,2-8℃ 保存,有效期一年。



       

      核心参数总表

      储存与订购



       

      参数规格
      品牌FiniGet 分必得®
      货号120-5001(2×10⁹ cells)/ 120-5001-S(1×10⁸ cells)
      方法免疫磁珠正选(生物素标记单克隆抗体 cocktail + 链霉亲和素磁珠)
      样本人 PBMC
      目的细胞CD3+ 细胞(总 T 细胞)
      分选时间约 17 min
      分选纯度可从分选前 57.3% 提升至分选后 99.1%(人 PBMC,厂家测试)
      储存2-8℃,不可冷冻,有效期一年
      配套磁力架FiniGet 分必得® 140-2000(单孔)/ 140-2002(八联排)
      配套缓冲液FiniGet 分必得® 140-2001
      目录价¥ 4000

      人 CD3+ 细胞正选试剂盒(货号 120-5001)采用免疫磁珠正选法,通过生物素标记单克隆抗体 cocktail 识别人 PBMC 中的 CD3 表面标志物,将 CD3+ 细胞标记,再通过链霉亲和素磁珠捕获目标细胞。经磁力分离后,非目标细胞直接弃掉,所需 CD3+ 细胞被磁珠保留在管中。洗涤后释放纯化的人 CD3+ T 细胞,纯度高达 99.1%,活性好,可直接用于下游实验。



       

      产品特点

      17 min 快速分选:抗体孵育 3 min + 磁珠孵育 3 min + 磁选与洗涤约 11 min,17 min 内获得高纯度 CD3+ 细胞。

      纯度高:正选法直接富集 CD3+ 细胞,流式验证纯度可从分选前 57.3% 提升至分选后 99.1%。

      细胞活性好、无异常激活:磁珠温和捕获目标细胞,分选后细胞活性好,可直接用于下游分子生物学或细胞生物学实验。

      无需裂红、操作简便无需分离柱,搭配 FiniGet 分必得® 磁力架即可使用,支持倾倒法或吸弃法操作,操作门槛低。

      样本兼容:支持新鲜或冻存人 PBMC



       

      操作流程图

      人 CD3+ 细胞正选试剂盒操作流程图 FiniGet 120-5001 正选法流程

      FiniGet 120-5001 人 CD3+ 细胞正选试剂盒操作流程图 正选法 Cocktail 3 min Beads 3 min 磁选 倾倒 洗涤

       



       

      使用说明

      本试剂盒提供三种操作方案,可根据实验室磁力架型号、流式管规格和起始细胞量灵活选择。以下为以分选人 PBMC 中 CD3+ 细胞为例的完整操作流程。



       

      方案 A使用 FiniGet 分必得® 140-2000 磁力架(单孔磁力架)+ 5 mL 无菌流式管,处理 0.1-2 mL 样品(多达 2×10⁸ cells)

      1. 制备人 PBMC:利用 Ficoll 密度梯度离心法从人外周血中分离 PBMC,收集 PBMC,以 PBS 洗涤细胞,离心后将 PBMC 重悬于分选缓冲液中,调整细胞密度为 1×10⁸ cells/mL

      · 如果使用的是冻存的 PBMC,复苏后细胞成团块状,分选前样品需在室温下用浓度为 100 μg/mL 的 DNase I 溶液孵育至少 15 min 并用细胞筛过滤。

      · 分选缓冲液推荐使用含有 1 mM EDTA 和 2% 胎牛血清(FBS)的 PBS,需预先使用 0.22 μm 滤膜过滤除菌。缓冲液中不能含有钙离子、镁离子和生物素。也可以使用 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液。

      2. 吸取 100 μL 细胞悬液(1×10⁷ cells)加入无菌流式管底部,加入 10 μL Human CD3 Positive Selection Cocktail,轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Human CD3 Positive Selection Cocktail 的用量。

      3. 加入 10 μL Magnetic Beads(使用前需涡旋震荡约 30 s,混匀后不可高速离心),轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Magnetic Beads 的用量。

      4. 加入分选缓冲液补至 2.5 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 5 min

      · 实验体系不可超过 2.5 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      5. 拿起磁力架,连贯地将磁力架和流式管倾倒,将上清弃掉。将磁力架和流式管回置,从磁力架中取出流式管,迅速加入 2 mL 分选缓冲液,用移液器轻轻吹打几次,分散磁珠。将流式管置于磁力架上,静置 3 min

      · 倾倒过程中流式管不能脱离磁力架。

      6. 重复步骤 5。

      7. 拿起磁力架,连贯地将磁力架和流式管倾倒,将上清弃掉。将磁力架和流式管回置,从磁力架中取出流式管,其中包含纯化的人 CD3+ 细胞。将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中,确保细胞从流式管壁上收集完全,即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验。



       

      方案 B使用 FiniGet 分必得® 140-2002 磁力架(八联排磁力架)+ 5 mL 无菌流式管,处理 0.1-2 mL 样品(多达 2×10⁸ cells)

      1. 制备人 PBMC:同方案 A 步骤 1。

      2. 吸取 100 μL 细胞悬液(1×10⁷ cells)加入无菌流式管底部,加入 10 μL Human CD3 Positive Selection Cocktail,轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Human CD3 Positive Selection Cocktail 的用量。

      3. 加入 10 μL Magnetic Beads(使用前需涡旋震荡约 30 s,混匀后不可高速离心),轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Magnetic Beads 的用量。

      4. 加入分选缓冲液补至 2.5 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 10 min

      · 实验体系不可超过 2.5 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      5. 小心将细胞悬液吸弃后,从磁力架中取出流式管,迅速加入 2 mL 分选缓冲液,用移液器轻轻吹打几次,分散磁珠。将流式管置于磁力架上,静置 5 min

      · 吸弃过程中请勿倾倒磁力架,枪头不要触碰到磁珠。

      6. 重复步骤 5。

      7. 小心将细胞悬液吸弃后,从磁力架中取出流式管,其中包含纯化的人 CD3+ 细胞。将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中,确保细胞从流式管壁上收集完全,即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验。



       

      方案 C使用 FiniGet 分必得® 140-2002 磁力架(八联排磁力架)+ 14 mL 无菌流式管,处理 0.5-8 mL 样品(多达 8×10⁸ cells)

      1. 制备人 PBMC:同方案 A 步骤 1。

      2. 吸取 500 μL 细胞悬液(5×10⁷ cells)加入 14 mL 无菌流式管底部,加入 50 μL Human CD3 Positive Selection Cocktail,轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Human CD3 Positive Selection Cocktail 的用量。

      3. 加入 50 μL Magnetic Beads(使用前需涡旋震荡约 30 s,混匀后不可高速离心),轻轻混匀,室温孵育 3 min

      · 若分选更大数量的细胞可按比例增加 Magnetic Beads 的用量。

      4. 加入分选缓冲液补至 5-10 mL,吹打混匀后流式管插入磁力架中静置 10 min

      · 实验体系不可超过 10 mL,以避免超过磁极的分选范围。

      5. 小心将细胞悬液吸弃后,从磁力架中取出流式管,迅速加入 5-10 mL 分选缓冲液,用移液器轻轻吹打几次,分散磁珠。将流式管置于磁力架上,静置 10 min

      · 吸弃过程中请勿倾倒磁力架,枪头不要触碰到磁珠。

      6. 重复步骤 5。

      7. 小心将细胞悬液吸弃后,从磁力架中取出流式管,其中包含纯化的人 CD3+ 细胞。将细胞重悬于所需缓冲液或培养基中,确保细胞从流式管壁上收集完全,即可用于后续分子生物学或细胞生物学实验。



       

      分选效果

       

      人 PBMC 分选 CD3+ 细胞流式效果 Before isolation 57.3% After isolation 99.1%

       

      从人 PBMC 中分选 CD3+ 细胞,分选前后的 CD3+ 细胞比例分别为 57.3% 和 99.1%

      本 CD3+ 细胞正选试剂盒使用的抗 CD3 抗体克隆可能会完全或部分阻断用于流式细胞术评估纯度的抗 CD3 抗体克隆。建议使用以下克隆号的荧光素偶联抗体进行下游的流式检测:

      • Anti-Human CD3 Antibody, Clone UCTH1
      • Anti-Human CD3 Antibody, Clone OKT3



       

      应用场景

      自身免疫病研究:提取患者 T 细胞做单细胞测序、流式表型分析、细胞因子谱检测。如 SLE(系统性红斑狼疮)患者外周血 T 细胞亚群分析、类风湿关节炎 T 细胞活化标志物检测、I 型糖尿病患者调节性 T 细胞(Treg)频率检测。

      肿瘤免疫研究:CAR-T 制备前的 T 细胞纯化与体外扩增。如靶向 CD19 的 CAR-T(B 细胞白血病/淋巴瘤)、靶向 BCMA 的 CAR-T(多发性骨髓瘤)制备中 T 细胞起始材料的纯化。

      感染免疫研究:HIV、COVID-19、HBV 等感染中 T 细胞功能与耗竭分析。如 HIV 特异性 CD8+ T 细胞功能检测与病毒储藏库分析、COVID-19 康复者 T 细胞免疫记忆与长效抗体应答研究、慢性 HBV 感染者 T 细胞耗竭标志物(PD-1/TIM-3)检测。

      移植免疫研究:GVHD 机制研究与免疫耐受诱导。如异基因造血干细胞移植(HSCT)后供者 T 细胞追踪与残留病灶(MRD)监测、实体器官移植后免疫耐受诱导 T 细胞亚群(iTreg/pTreg)分析。

      细胞治疗研究:MSC 共培养、DC-T 共培养前的 T 细胞富集。如 MSC-T 共培养实验中的 T 细胞富集、DC 疫苗制备前的 T 细胞纯化、类器官培养前的 T 细胞富集。



       

      选择指南

      推荐使用:从人 PBMC 中快速获得CD3+ T 细胞(含 CD4+ 和 CD8+ 亚群),用于下游分析、培养、测序等实验。

      其他实验方案推荐:

      需要未标记的 T 细胞:正选法分选后 CD3+ 细胞表面有抗体/磁珠标记,如需无标记 T 细胞,请选择阴性分选产品 120-6001(人 CD3+ T 细胞分选试剂盒)

      需要单独 CD4+ 或 CD8+ T 细胞:请选择 120-6002(人 CD4+ T 细胞分选试剂盒)120-6003(人 CD8+ T 细胞分选试剂盒)

      样本是小鼠来源:请选择 130-6001(小鼠 CD3+ T 细胞分选试剂盒)系列

      起始样本是全血:建议先做 Ficoll 密度梯度离心分离 PBMC

      需要静息态 T 细胞:本产品分选后细胞可直接用于下游实验,但表面有抗体标记,需根据实验需求选择



       

      常见问题 FAQ

      Q: 120-5001 与 120-6001 / 120-6002 / 120-6003 / 120-6004 / 120-6005 / 130-6001 的关键差异是什么?

      A: 120-5001 采用正选法分选总 CD3+ 细胞(含 CD4+ 和 CD8+ 亚群),120-6001 采用阴性分选法分选总 CD3+ T 细胞,120-6002 分选 CD4+ T 细胞,120-6003 分选 CD8+ T 细胞,120-6004 分选 B 细胞,120-6005 分选 NK 细胞,130-6001 分选小鼠 CD3+ T 细胞。120-5001 起始样本是人 PBMC,130-6001 起始样本是小鼠脾脏和淋巴结单细胞悬液
       

      Q: 120-5001 是正选还是负选?分选后细胞表面有抗体标记吗?

      A: 120-5001 是正选法。试剂盒中的生物素标记单克隆抗体 cocktail 结合人 PBMC 中的 CD3+ 细胞,通过链霉亲和素磁珠捕获目标细胞。分选后 CD3+ 细胞表面有抗体标记。如需无标记 T 细胞,请选择阴性分选产品 120-6001
       

      Q: 120-5001 分选后的细胞可以做流式检测吗?

      A: 可以。由于本产品使用的抗 CD3 抗体克隆可能会阻断部分检测抗体,建议使用 UCTH1OKT3 克隆号的荧光素偶联抗 CD3 抗体进行下游流式检测。
       

      Q: 120-5001 分选纯度是多少?

      A: 从人 PBMC 中分选 CD3+ 细胞,分选前 CD3+ 细胞比例为 57.3%,分选后可提升至 99.1%(厂家测试数据,详见分选效果图)。
       

      Q: 120-5001 分选需要多长时间?

      A: 约 17 min。抗体 Cocktail 室温孵育 3 min + Magnetic Beads 室温孵育 3 min + 磁选与洗涤约 11 min。


       

      Q: 120-5001 需要哪些配套设备?

      A: 推荐与 FiniGet 分必得® 磁力架配套使用:140-2000 单孔磁力架(搭配 5 mL 流式管,处理 ≤2×10⁸ cells)或 FiniGet 分必得® 140-2002 八联排磁力架(搭配 5 mL 流式管处理 ≤2×10⁸ cells,或搭配 14 mL 流式管处理 ≤8×10⁸ cells)。三种方案详见上方"使用说明"。分选缓冲液推荐 FiniGet 分必得® 140-2001 细胞分选缓冲液


       

      Q: 120-5001 起始样本支持哪些组织?需要裂红吗?

      A: 起始样本是人外周血单个核细胞(PBMC),通过 Ficoll 密度梯度离心法分离 PBMC,使用前无需裂红处理——PBMC 层不含红细胞。冻存 PBMC 复苏后需用 100 μg/mL DNase I 溶液室温孵育至少 15 min 并用细胞筛过滤,去除细胞团块。起始细胞量推荐 1×10⁷ cells(100 μL 体系),单次处理上限 2×10⁸ cells


       

      Q: 120-5001 与 120-6001(阴性分选)相比有什么区别?

      A: 两者均用于从人 PBMC 中分选 CD3+ T 细胞,主要差异:

      分选原理——120-5001 正选法(直接捕获 CD3+ 细胞),120-6001 阴性分选法(去除非 T 细胞);

      细胞标记——120-5001 分选后细胞表面有抗体标记,120-6001 分选后细胞表面无标记;

      分选时间——120-5001 约 17 min,120-6001 约 15 min;

      适用场景——如需无标记 T 细胞用于下游激活、培养、测序,推荐 120-6001;如仅需快速获得高纯度 CD3+ 细胞且不介意表面标记,可选 120-5001。

       

      Q: 什么情况下可以申请 FiniGet 分必得® 上门技术支持?

      A: 首次使用 FiniGet 分必得® 试剂盒、样本类型特殊(罕见样本/高难度分选)、课题组集中采购(≥3 个试剂盒)等情况均可申请,其他需求详询客服。广州/深圳 24-48h 响应,其他城市提前半个月预约。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。


       

      Q: FiniGet 分必得® 上门技术支持是免费的吗?有次数限制吗?

      A: 完全免费,不限单位、不限次数。预约:400-090-1923 / service@gooniebio.com。


       

      技术支持

      FiniGet 分必得® 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,深耕免疫磁珠细胞分选技术。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com



       

      上门技术支持

      细胞分选实验首次跑不通?FiniGet 分必得® 技术团队可上门带您跑一遍——现场操作演示 + 设备调试 + 技术培训。客服热线同技术支持,预约后会有专人对接细节。



       

      覆盖范围与响应时效:

      城市响应时效备注
      广州 / 深圳24-48h
      其他主要城市提前半个月预约北京、上海、杭州、成都、武汉、南京、西安、苏州等
      偏远地区提前半个月预约可申请远程对接(视频指导),详询客服

      申请方式:

      • 客服热线:400-090-1923
      • 邮箱:service@gooniebio.com
      • 申请所需信息:单位名称、样本类型、地址、期望时间等

      注:以上响应时效为常规情况,节假日顺延;具体上门时间以客服确认为准。



       

      页面总结

      FiniGet 分必得® 120-5001 人 CD3+ 细胞正选试剂盒,免疫磁珠正选法,17 min 快速分选、纯度可从分选前 57.3% 提升至分选后 99.1%(人 PBMC,厂家测试);使用前无需裂红处理,倾倒法操作,分选细胞活性好、无异常激活,适配人外周血单个核细胞(PBMC),2-8℃ 保存。



       

    • 组分名称货号:120-5001 规格(For 2×10⁹ cells)货号:120-5001-S 规格(For 1×10⁸ cells)
      120-5001A Human CD3 Positive Selection Cocktail1 mL × 2100 μL
      120-5001B Magnetic Beads1 mL × 2100 μL
    • 注意事项

      1. 如使用其他品牌磁力架,请先联系技术支持。
      2. 本试剂盒在保存和使用过程中应避免冷冻。
      3. 建议使用低吸附移液器吸头和离心管,避免因吸附造成抗体和磁珠的损耗。
      4. 分选过程应尽量轻柔,避免磁珠对细胞造成机械损伤。
      5. 若后续进行细胞培养实验,分选过程需在无菌环境中进行。
      6. 加入磁珠孵育时若出现沉淀,可每 1-2 min 轻弹管壁或吸打混匀。
      7. 本产品仅可用于科研,不可用于诊断。

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