FITC Mouse Anti-human CD8a Antibody（OKT8）
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TL;DR：NeoMab 11-1008A-1 FITC 标记小鼠抗人 CD8α 单克隆抗体（OKT8 克隆），特异性识别人 CD8α 分子，标记细胞毒性 T 淋巴细胞（CTL）、部分 γδ T 细胞及 NK 细胞亚群；抗体浓度 0.1 mg/mL，推荐用量 5 µL/百万细胞或 5 µL/100 µL 全血；蓝光（488 nm）激发，发射波长 526 nm；适用于流式细胞术（Flow Cytometry）检测人 CD8+ T 细胞；2-8℃ 避光保存，两年有效。
应用领域：CD8+ T 细胞免疫表型分析、CD4/CD8 比值计算、肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）分析、病毒特异性 CTL 检测、移植免疫排斥监测、胸腺细胞亚群分析、NHP 免疫学研究。
一、产品规格总表
参数 详情 产品名称 FITC Mouse Anti-human CD8α Antibody (OKT8) 货号 11-1008A-12（25 Tests，125 µL）/ 11-1008A-15（100 Tests，500 µL） 克隆号 OKT8 宿主 / 亚型 Mouse IgG2a, κ 偶联物 FITC（异硫氰酸荧光素） 种属反应性 Human（人）；可与部分 NHP CD8α 交叉反应 验证应用 Flow Cytometry（流式细胞术） 激发 / 发射波长 498 nm / 526 nm 激发激光器 Blue Laser（488 nm） 抗体浓度 0.1 mg/mL 推荐用量 5 µL / 百万细胞（100 µL 染色体积）或 5 µL / 100 µL 全血 保存条件 2-8℃ 避光保存，两年有效；冰袋运输 产品形态 液体
二、靶标背景 · CD8α
CD8α 是约 32-34 kDa 的 I 型跨膜糖蛋白，由 CD8A 基因编码，属于免疫球蛋白超家族（IgSF）成员，常简称为 CD8。Cell surface CD8α 以两种形式存在：通过二硫键连接的同二聚体 CD8αα，以及与 CD8β 链通过二硫键连接的异二聚体 CD8αβ。
CD8 作为 T 细胞受体（TCR）的共受体（co-receptor），与 TCR 协同识别抗原提呈细胞表面的 MHC I 类分子-抗原肽复合物。CD8α 胞外 IgSF 结构域结合 MHC I 类分子 α3 结构域（非多态性决定簇），使 CD8 能够作为共受体协助 MHC I 类限制性的 TCR 识别抗原。胞内段与 Src 家族蛋白酪氨酸激酶 Lck 结合，参与 TCR 信号转导的早期激活事件，对 T 细胞活化和选择至关重要。
表达分布：CD8α 主要表达于细胞毒性 T 淋巴细胞（CTL，外周血 T 细胞中占 25-35%）、部分 γδ T 细胞、NK 细胞亚群，以及大部分胸腺细胞（含 CD4+CD8+ 双阳性细胞）。CD8+ αβ T 细胞表面同时表达 CD8αα 同二聚体和 CD8αβ 异二聚体，而部分 γδ T 细胞和 NK 细胞仅表达 CD8αα 同二聚体。
别名：T8、Leu2
Gene ID：925
SwissProt：P01732（CD8A）
分布：细胞毒性 T 细胞（CTL）、部分 γδ T 细胞、NK 细胞亚群、胸腺细胞（含 DP 双阳性）
三、克隆号信息 · OKT8
OKT8 是抗人 CD8α 的经典小鼠单克隆抗体，特异性识别 CD8α 分子。OKT8 克隆在流式细胞术中用于鉴定 CD8+ T 细胞有超过 40 年的应用历史，文献引用极为丰富。
OKT8 与 UCHT1 的比较：OKT8（anti-CD8α）与 UCHT1（anti-CD3ε，11-1003-2）靶向不同分子。UCHT1 标记全部成熟 T 细胞（CD3+），是通用"总 T 细胞"标记物；OKT8 仅标记 CD8+ T 细胞亚群。两者在多色 Panel 中联合使用可清晰区分 CD4+ 和 CD8+ T 细胞。需注意 OKT8 为 IgG2a,κ 亚型，Fc 段可结合 FcγR，而 UCHT1 为 IgG1,κ，Fc 活性较低。
典型应用：外周血 CD8+ T 细胞百分比检测、CD4/CD8 双标记计算比值、肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）表型分析、病毒特异性 CTL 检测（如 CMV/EBV 特异性 T 细胞）、胸腺细胞亚群分析（联合 CD4）、NHP 模型中 CD8+ 细胞监测。
四、荧光素信息 · FITC
FITC（Fluorescein Isothiocyanate，异硫氰酸荧光素）是流式细胞术中经典的绿色荧光染料，激发峰 498 nm、发射峰 526 nm，由 488 nm 蓝光激光器激发。
光谱特征：
参数 数值 激发波长 498 nm 发射波长 526 nm（绿色） 激光器 Blue Laser（488 nm） 检测通道 FITC-A / FL1（530/30 nm 滤光片） Stokes 位移 ~28 nm
多色 Panel 搭配建议：FITC 发射光谱较宽（526 nm），与 PE（578 nm）存在光谱溢出，需做荧光补偿。CD8 检测常见搭配：
• FITC-CD8 + PE-CD4 + PerCP-CD3 → 经典 T 细胞亚群三标（CD4/CD8 比值）
• FITC-CD8 + APC-CD4 + PE-CD3 → 三激光方案，光谱分离更好
• FITC-CD8 + PE-CD3 + APC-CD56 → T 细胞 + NK 细胞联合分析
• FITC-CD8 + PE-IFNγ → CTL 功能检测（胞内因子染色）注意事项：FITC 的荧光强度受 pH 影响（pH < 6.5 时荧光显著减弱），确保染色缓冲液 pH 在 7.0-7.4 范围内。FITC 对光敏感，操作过程中注意避光。
五、流式染色 Protocol
所需试剂：
• NF0003 细胞染色缓冲液（PBS + 0.5-1% BSA + 0.05% NaN₃）
• NF0004-5 7-AAD 溶液（死细胞排除）
• Fc 受体封闭试剂（含单核/巨噬/B/NK 细胞样本推荐添加）
• 红细胞裂解液（全血或含红细胞组织样本选做）
操作步骤：
Step 1 · 制备单细胞悬液
收集所需组织（如脾脏、淋巴结、胸腺、骨髓），在细胞染色缓冲液（NF0003）中制备单细胞悬液。如果是体外培养的细胞，用染色缓冲液洗涤一次并重悬。调整细胞浓度为 5-10 × 10⁶ cells/mL，分装 100 µL/tube（5-10 × 10⁵ cells/tube）。
Step 2 · Fc 受体封闭
巨噬细胞、单核细胞、粒细胞、B 细胞、树突状细胞等表达 Fc 受体，会与抗体 Fc 段结合影响实验结果。推荐使用 Fc 受体封闭剂，根据小鼠样本或人样本选用合适的 Fc 受体封闭试剂，每管加入 5 µL，室温孵育 5-10 min，不用洗涤。
Step 3 · 抗体染色
每管加入 5 µL FITC Anti-human CD8α（OKT8）抗体，轻柔混匀，冰上避光孵育 20-30 min。不同样本可做滴定实验确定最适浓度。
Step 4 · 洗涤
用 1 mL 细胞染色缓冲液洗涤 1 次。
Step 5 · 7-AAD 活性染料染色
重悬细胞于 0.1 mL 染色缓冲液，每百万细胞加入 5 µL（0.25 µg）7-AAD Solution（NF0004-5），用于排除死细胞。
Step 6 · 孵育
冰上避光孵育 5-10 min。
Step 7 · 洗涤
用 1 mL 细胞染色缓冲液洗涤 1 次。
Step 8 · 上机检测
细胞重悬于 300-500 µL 细胞染色缓冲液中，上机测试。如不能及时测试，保存于 4℃ 并于 4 小时内完成检测。FITC 通道选择 FL1（530/30 nm）。
（选做）红细胞裂解：对于全血或含红细胞的组织样本，选用合适的红细胞裂解液并按说明书操作。一般建议先染色再裂红。
注意事项：使用前快速离心抗体管回收管壁上的抗体；不同样本建议做滴定实验确定最适浓度；本产品仅用于科研，请勿用于体外诊断。
六、对照设置指南
对照类型 用途与说明 空白对照（未染色） 评估细胞自发荧光，用于调节 PMT 电压 单染/单阳性对照 多色 Panel 中用于调节荧光补偿，每种荧光素各设一管 同型对照 FITC 标记的 Mouse IgG2a, κ 同型抗体，消除非特异性背景染色。OKT8 为 Mouse IgG2a, κ 亚型，同型对照的宿主、亚型和偶联物需完全一致 FMO 对照（Fluorescence Minus One） 多色 Panel 中去除某一种荧光素，用于准确设门，特别是 CD8 与 CD4 连续分布群体
提示：CD8 在 T 细胞上表达分群明显（CD8+/CD8- 双峰清晰），若仅需基础鉴定可不必设置同型对照；但若用于精确统计 CD8 表达水平变化（如激活后下调），同型对照仍推荐设置。
七、质量数据与参考文献
每批产品均经过严格质控，流式细胞术验证对人 CD8+ T 细胞的特异性染色性能，确认抗体效价、荧光素偶联效率及无菌性。批间一致性保证实验可重复性。
参考文献：
1. Reinherz EL, et al. J Immunol. 1980;124(6):2894-2900.（OKT8 克隆鉴定人 CD8+ T 细胞）
2. Kung PC, et al. Nature. 1979;278(5701):245-247.（OKT 系列抗体原始文献）
3. Cossarizza A, et al. Cytometry. 1991;12(3):238-244.（胸腺 T 细胞发育流式分析）
4. Zamoyska R. Immunity. 2010;32(3):298-300.（CD8 在 TCR 信号中的功能）
5. Sugamura K, et al. Adv Immunol. 1988;42:1-39.（CD8 抗原与 IL-2 受体研究）
八、相关产品
同靶标 · 不同荧光素（人 CD8α，OKT8 克隆）：
• 10-1008A-1 Biotin Mouse Anti-human CD8α (OKT8) — 生物素标记，搭配链霉亲和素荧光素使用
• 12-1008A-1 PE Mouse Anti-human CD8α (OKT8) — PE 标记，橙红荧光，Ex/Em 564/578 nm
• 15-1008A-1 PE/Cyanine7 Mouse Anti-human CD8α (OKT8) — PE/Cy7 标记，远红荧光
• 16-1008A-1 APC Mouse Anti-human CD8α (OKT8) — APC 标记，远红荧光，Ex/Em 650/660 nm
• 26-1008A-1 AF647 Mouse Anti-human CD8α (OKT8) — AF647 标记，远红荧光，Ex/Em 650/668 nm
T 细胞染色常用靶点：
• 11-1003-2 FITC Mouse Anti-human CD3 (UCHT1) — FITC 标记，总 T 细胞标记
• 11-1004-1 FITC Mouse Anti-human CD4 (OKT4) — FITC 标记，CD4+ T 细胞标记
• 11-1008A-1 FITC Mouse Anti-human CD8α (OKT8) — 本页产品
配套试剂：
• NF0003 细胞染色缓冲液 — PBS + BSA + NaN₃，流式染色专用
• NF0004-5 7-AAD 溶液 — 死细胞排除染料
九、常见问题 · FAQ
Q: 11-1008A-1 的同型对照选什么？
A: 选择 FITC 标记的 Mouse IgG2a, κ 同型抗体。OKT8 是 Mouse IgG2a, κ 亚型，同型对照的宿主、亚型和偶联物需完全一致，以消除 Fc 段非特异性结合和 FITC 自发荧光的干扰。注意不要选 IgG1 或 IgG2b 的同型抗体——亚型不同，Fc 段结构不同。
Q: CD8αα 同二聚体和 CD8αβ 异二聚体，OKT8 都能识别吗？
A: 可以。OKT8 识别 CD8α 链，对 CD8αα 同二聚体和 CD8αβ 异二聚体均可染色。αβ T 细胞表面同时表达两种形式；而 γδ T 细胞和 NK 细胞通常只表达 CD8αα 同二聚体。
Q: NK 细胞也表达 CD8，如何与 CD8+ T 细胞区分？
A: NK 细胞表达 CD8αα 同二聚体，与 CD8+ T 细胞有重叠。建议多色设门：CD3+CD8+ 为 T 细胞，CD3-CD56+CD8+ 为 NK 细胞。联合 CD3 抗体可有效区分。
Q: 人外周血中 CD8+ T 细胞的正常比例是多少？
A: 健康成人外周血 T 细胞中，CD8+ T 细胞通常占 25-35%，CD4+ T 细胞占 55-65%，CD4/CD8 比值约 1.5-2.5。比值倒置（< 1）可见于 HIV 感染、免疫抑制、慢性病毒感染等情况。
Q: 11-1008A-1 可以用于非人灵长类（NHP）样本吗？
A: 可以。说明书明确记载 OKT8 可与部分 NHP 物种的 CD8α 交叉反应，适用于 NHP 免疫学研究。建议首次使用时做滴定实验确认最佳用量。
Q: 抗体可以冻存吗？
A: 不建议。说明书要求 2-8℃ 避光保存，冰袋运输。冻融会导致 FITC 荧光猝灭和抗体聚集，严重影响染色信号和背景。
Q: 胸腺样本染色需要注意什么？
A: 胸腺中富含未成熟胸腺细胞，包括大量 CD4+CD8+ 双阳性（DP）细胞。染色时注意：①细胞浓度可能较高，需充分制备单细胞悬液；②DP 细胞 CD8 表达量低于成熟 CTL，建议适当增加抗体用量或延长孵育时间；③联合 CD4 和 CD3 抗体多色分析，可清晰区分 DP、SP-CD4、SP-CD8 及双阴性（DN）四个亚群。
十、技术支持
NeoMab 隶属信天翁生物科技（广州）有限公司，专注于流式抗体和免疫学试剂研发。
• 客服电话：400-090-1923
• 技术支持邮箱：service@gooniebio.com
• 公司官网：www.gooniebio.com
• 地址：广州市黄埔区瑞和路39号纳金科技园
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产品组成：
货号/规格 组分名称 体积 11-1008-12 25T FITC Mouse Anti-human CD8a Antibody (OKT8) 125 μL 11-1008-15 100T FITC Mouse Anti-human CD8a Antibody (OKT8) 500 μL 保存：2-8℃避光保存。冰袋运输。
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