FITC Mouse Anti-human CD4 Antibody（OKT4）
一键复制信息
- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
-
TL;DR：NeoMab 11-1004-1 FITC 标记小鼠抗人 CD4 单克隆抗体（OKT4 克隆），特异性识别人 CD4 分子，标记外周血辅助性 T 细胞（Th）、胸腺细胞亚群及单核/巨噬细胞；抗体浓度 100 µg/mL，推荐用量 5 µL/百万细胞；蓝光（488 nm）激发，发射波长 526 nm；适用于流式细胞术（Flow Cytometry）检测人 CD4+ T 细胞；2-8℃ 避光保存，两年有效。
应用领域：CD4+ T 细胞免疫表型分析、CD4/CD8 比值计算、HIV/AIDS 免疫监测、自身免疫病研究、肿瘤免疫微环境分析、疫苗免疫应答评估、移植免疫排斥监测、胸腺功能评估。
一、产品规格总表
参数 详情 产品名称 FITC Mouse Anti-human CD4 Antibody (OKT4) 货号 11-1004-12（25 Tests）/ 11-1004-15（100 Tests） 克隆号 OKT4 宿主 / 亚型 Mouse IgG2b, κ 偶联物 FITC（异硫氰酸荧光素） 种属反应性 Human（人） 验证应用 Flow Cytometry（流式细胞术） 激发 / 发射波长 498 nm / 526 nm 激发激光器 Blue Laser（488 nm） 抗体浓度 100 µg/mL 推荐用量 5 µL / 百万细胞（100 µL 染色体积） 保存条件 2-8℃ 避光保存，两年有效；冰袋运输，请勿冷冻 产品形态 液体，PBS 缓冲液 规格 11-1004-12：125 µL（25T）/ 11-1004-15：500 µL（100T）
二、靶标背景 · CD4
CD4 是一种分子量约 55 kDa 的单链 I 型跨膜糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族（IgSF）成员。CD4 分子由 4 个 Ig 样结构域（D1-D4）组成胞外区，其中 D1 结构域是与 MHC II 类分子 β2 结构域结合的关键区域。
CD4 作为 T 细胞受体（TCR）的共受体（co-receptor），与 TCR-CD3 复合物协同识别抗原提呈细胞（APC）表面的 MHC II 类分子-抗原肽复合物，增强 TCR 与抗原的亲和力约 100 倍。CD4 胞内段与 Src 家族激酶 Lck 结合，参与 TCR 信号转导的早期激活事件，对 T 细胞的激活、增殖和分化至关重要。
表达分布：CD4 主要表达于辅助性 T 细胞（Th，外周血约占 T 细胞 55-65%）、胸腺中大部分胸腺细胞，以及单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞（DC）亚群。在正常成人外周血中，CD4+ T 细胞绝对计数约为 500-1600 个/µL。
生物学功能：CD4 不仅是 T 细胞活化的共受体，还是 HIV-1 病毒的主要细胞表面受体——HIV 包膜糖蛋白 gp120 直接结合 CD4 D1 结构域进入靶细胞，导致 CD4+ T 细胞耗竭，这是 AIDS 发病机制的核心环节。此外，CD4 还被证明是 IL-16 的受体，参与调节性 T 细胞的趋化与免疫调节。
别名：T4、Leu-3、L3T4（小鼠同源物）
Gene ID：920
SwissProt：P01730（CD4）
分布：辅助性 T 细胞（Th）、调节性 T 细胞（Treg）、胸腺细胞亚群、单核/巨噬细胞、树突状细胞亚群
三、克隆号信息 · OKT4
OKT4 是抗人 CD4 最经典、最早被广泛使用的单克隆抗体克隆号之一，由 Ortho Diagnostics（现属 Janssen/Johnson & Johnson）于 1980 年代初开发，与 OKT3（抗 CD3）同属 OKT 系列。OKT4 识别 CD4 分子 D1 结构域上的表位，与 MHC II 类分子的结合位点存在空间重叠，因此 OKT4 与 CD4 结合后可阻断 CD4 与 MHC II 的相互作用。
重要特性：OKT4 结合 CD4 后可干扰 HIV gp120 与 CD4 的结合，在 HIV 研究领域具有重要历史地位——正是利用 OKT4 抗体竞争结合实验，科学家确认了 CD4 是 HIV 的主要受体。OKT4 克隆在流式细胞术中用于鉴定 CD4+ T 细胞已有超过 40 年的应用历史，文献引用极为丰富。
与其他 CD4 克隆的比较：常见 CD4 克隆还包括 RPA-T4、SK3、L200 等。OKT4 的优势在于历史文献丰富、识别位点明确（D1 结构域）、与 OKT 系列其他抗体（如 OKT3 抗 CD3）搭配使用时体系成熟。需注意 OKT4 结合后可能影响 CD4 参与的功能实验（如 T 细胞增殖实验），若需功能级应用可考虑 Non-capping 型克隆。
典型应用：CD4+ T 细胞总量鉴定、CD4/CD8 比值计算（HIV 免疫监测金标准）、Th 亚群分析（联合 CD45RA/CCR7 鉴定 naive/memory/effector）、Treg 鉴定（CD4+CD25+FoxP3+）、肿瘤微环境中 CD4+ T 浸润评估。
四、荧光素信息 · FITC
FITC（Fluorescein Isothiocyanate，异硫氰酸荧光素）是流式细胞术中经典的绿色荧光染料，激发峰 498 nm、发射峰 526 nm，由 488 nm 蓝光激光器激发。
光谱特征：
参数 数值 激发波长 498 nm 发射波长 526 nm（绿色） 激光器 Blue Laser（488 nm） 检测通道 FITC-A / FL1（530/30 nm 滤光片） Stokes 位移 ~28 nm 分子量 389.4 Da
多色 Panel 搭配建议：FITC 发射光谱较宽（526 nm），与 PE（578 nm）存在光谱溢出，需做荧光补偿。CD4 检测常见搭配：
• FITC-CD4 + PE-CD8 + PerCP-CD3 → 经典 T 细胞亚群三标（CD4/CD8 比值）
• FITC-CD4 + APC-CD8 + PE-CD45RA → Naive/Memory CD4 T 细胞分型
• FITC-CD4 + PE-CD25 + APC-FoxP3 → Treg 鉴定 Panel
• FITC-CD4 + PE-CCR7 + APC-CD45RA → CD4 T 细胞分化阶段分析（naive/CM/EM/TEMRA）
• FITC-CD4 + PE-CD3 → CD3 门控 CD4+ T 细胞注意事项：FITC 的荧光强度受 pH 影响（pH < 6.5 时荧光显著减弱），确保染色缓冲液 pH 在 7.0-7.4 范围内。FITC 对光敏感，操作过程中注意避光。
五、流式染色 Protocol
所需试剂：
• NF0003 细胞染色缓冲液（PBS + 0.5-1% BSA + 0.05% NaN₃）
• NF0004-5 7-AAD 溶液（死细胞排除，选做）
• Fc 受体封闭试剂（含单核/巨噬/B/NK 细胞样本推荐添加）
• 红细胞裂解液（全血样本需使用）
操作步骤：
Step 1 · 制备单细胞悬液
收集所需组织（如脾脏、淋巴结、胸腺、骨髓）或体外培养细胞，在细胞染色缓冲液（NF0003）中制备单细胞悬液。若是体外培养的细胞，用染色缓冲液洗涤一次并重悬。调整细胞浓度为 5-10 × 10⁶ cells/mL，分装 100 µL/tube（5-10 × 10⁵ cells/tube）。
Step 2 · 红细胞裂解（选做，全血样本需执行）
全血样本需使用合适的红细胞裂解液，按其说明书操作。裂红后需将裂红液去除干净，用染色缓冲液至少洗涤 2 次并重悬。调整细胞浓度至 5-10 × 10⁶ cells/mL，分装 100 µL/tube。注意：裂红液残留会影响荧光信号，务必洗涤彻底。
Step 3 · Fc 受体封闭
CD4+ 样本中常含单核细胞、树突状细胞等表达 Fc 受体的细胞，会与抗体 Fc 段非特异性结合。推荐加入 Fc 受体封闭剂，每管 5 µL，室温孵育 5-10 min，不用洗涤。
Step 4 · 抗体染色
每管加入 5 µL FITC Anti-human CD4（OKT4）抗体，轻柔混匀，冰上避光孵育 15-20 min。不同样本可做滴定实验确定最适浓度。
Step 5 · 洗涤
用 1 mL 细胞染色缓冲液洗涤 1 次。
Step 6 · 死细胞排除（选做）
重悬细胞于 0.5 mL 染色缓冲液，每百万细胞加入 5 µL（0.25 µg）7-AAD（NF0004-5），冰上避光孵育 3-5 min。
Step 7 · 洗涤
用 1 mL 细胞染色缓冲液洗涤 1 次。
Step 8 · 上机检测
重悬细胞于 300-500 µL 细胞染色缓冲液中，及时测试。若不能及时测试，保存于 4℃ 并于 4 小时内检测。FITC 通道选择 FL1（530/30 nm）。
六、对照设置指南
对照类型 用途与说明 空白对照（未染色） 评估细胞自发荧光，用于调节 PMT 电压。注意：不同细胞自发荧光不同，空白对照应使用自身细胞 单染/单阳性对照 多色 Panel 中用于调节荧光补偿，每种荧光素各设一管 同型对照 FITC 标记的 Mouse IgG2b, κ 同型抗体，消除非特异性背景染色。OKT4 为 Mouse IgG2b, κ 亚型，同型对照的宿主、亚型和偶联物需完全一致 FMO 对照（Fluorescence Minus One） 多色 Panel 中去除某一种荧光素，用于准确设门，特别是 CD4 与 CD8 连续分布群体
七、质量数据与参考文献
每批产品均经过严格质控，包括但不限于：SDS-PAGE 纯度检测、流式细胞术功能验证（人外周血单个核细胞染色验证 CD4+ T 细胞标记）、内毒素检测（< 0.25 EU/µg）、无菌检测。批间一致性保证实验可重复性。
参考文献：
1. Reinherz EL, et al. Cell. 1979;17(2):289-301.（OKT4/OKT8 系列抗体鉴定人 T 细胞亚群的经典文献）
2. Klatzmann D, et al. Science. 1984;225(4659):298-300.（确认 CD4 为 HIV-1 受体）
3. Dalgleish AG, et al. Nature. 1984;312(5996):763-767.（CD4 作为 HIV 辅助受体的发现）
4. Maddon PJ, et al. Cell. 1986;47(3):333-348.（CD4 分子介导 HIV 进入的分子机制）
5. Zaitseva L, et al. AIDS. 2008;22(Suppl 3):S51-S63.（CD4 在 HIV 免疫监测中的临床价值综述）
八、相关产品
同靶标 · 不同荧光素（人 CD4）：
• 12-1004-1 PE Mouse Anti-human CD4 — PE 标记，橙红荧光，Ex/Em 564/578 nm，适合与 FITC 搭配做双色分析
• 26-1004-1 AF647 Mouse Anti-human CD4 — AF647 标记，远红荧光，Ex/Em 650/668 nm，适合三激光方案
T 细胞 Panel 常用搭配：
• 11-1003-1 FITC Mouse Anti-human CD3 (OKT3) — FITC 标记，总 T 细胞标记
• 11-1003-2 FITC Mouse Anti-human CD3 (UCHT1) — FITC 标记，UCHT1 克隆
• 11-1008A-1 FITC Mouse Anti-human CD8a (OKT8) — FITC 标记，CD8+ T 细胞标记
• 11-2003-1 FITC Rat Anti-mouse CD3 (17A2) — Rat 抗 Mouse CD3（小鼠实验用）
配套试剂：
• NF0003 细胞染色缓冲液 — PBS + BSA + NaN₃，流式染色专用
• NF0004-5 7-AAD 溶液 — 死细胞排除染料
九、常见问题 · FAQ
Q: 11-1004-1 的同型对照选什么？
A: 选择 FITC 标记的 Mouse IgG2b, κ 同型抗体。OKT4 是 Mouse IgG2b, κ 亚型，同型对照的宿主、亚型和偶联物需完全一致。注意不要选 IgG1 的同型抗体——IgG2b 和 IgG1 的 Fc 段结构不同，与 Fc 受体的结合特性也不同，选错亚型会导致同型对照失效。
Q: OKT4 克隆有什么特点？和 RPA-T4、SK3 有什么区别？
A: OKT4 是最早开发的 CD4 克隆之一（1980s），识别 CD4 D1 结构域，与 MHC II 类分子结合位点重叠。RPA-T4 识别 D3/D4 结构域，不干扰 MHC II 结合；SK3 也识别 D1 结构域但与 OKT4 表位不完全相同。如果你的下游实验需要保持 CD4-MHC II 相互作用（如混合淋巴细胞反应），应选 RPA-T4；如果仅需 CD4 表型鉴定，OKT4 和 SK3 均可，OKT4 文献更丰富。
Q: CD4 也表达在单核细胞和巨噬细胞上，染色时会不会把单核细胞也标记出来？
A: 是的，CD4 在人外周血单核细胞（monocytes）上有中等水平表达，树突状细胞亚群也有表达。如果实验目的是鉴定 CD4+ T 细胞，需先通过 FSC/SSC 圈出淋巴细胞门（lymphocyte gate），排除单核细胞（SSC 较高）；或在 Panel 中加入 CD14 标记做负向排除。如果目的是检测所有 CD4+ 细胞（包括单核/DC），则无需额外设门。
Q: 11-1004-1 可以用于小鼠 CD4 检测吗？
A: 不可以。OKT4 克隆特异性识别人 CD4，不交叉反应小鼠 CD4。小鼠 CD4 检测请使用 Rat 抗 Mouse CD4 抗体，如 12-2004-1 PE Rat Anti-mouse CD4 (GK1.5) 或 16-2004-1 APC Rat Anti-mouse CD4 (GK1.5)。
Q: 全血样本可以直接染色吗？
A: 可以全血直接染色后再裂红，也可以先分离 PBMC 再染色。全血直接染色步骤更简便、细胞回收率高，但需注意：① 裂红液必须洗涤彻底，残留会影响荧光信号；② 裂红后需及时上机，延迟过久细胞活性下降。推荐使用一步固定/裂解液（10X），可一步裂红并固定白细胞。若用固定/裂解液处理，需确认抗体能识别固定后的 CD4 表位。
Q: 抗体可以冻存吗？
A: 不建议。说明书明确要求"请勿冷冻"，冻融会导致 FITC 荧光猝灭和抗体聚集，严重影响染色信号和背景。保存条件为 2-8℃ 避光，两年有效期内性能稳定。
Q: 用 FITC-CD4 做 CD4/CD8 比值检测，需要注意什么？
A: CD4/CD8 比值是 HIV 免疫监测的重要指标。注意事项：① FITC-CD4 搭配 PE-CD8（或 PerCP-CD8），注意 FITC → PE 的光谱溢出补偿；② 先圈淋巴细胞门排除单核细胞，再设 CD4+ vs CD8+ 象限图；③ CD4 在单核细胞上也有表达，必须通过设门排除；④ 健康成人外周血 CD4/CD8 比值通常为 1.0-2.5，< 1.0 提示免疫抑制状态；⑤ 建议同时设 CD3 总 T 细胞门，计算 CD4+ T 占总 T 细胞的百分比，结果更准确。
十、技术支持
NeoMab 隶属信天翁生物科技（广州）有限公司，专注于流式抗体和免疫学试剂研发。
• 客服电话：400-090-1923
• 技术支持邮箱：service@gooniebio.com
• 公司官网：www.gooniebio.com
• 地址：广州市黄埔区瑞和路39号纳金科技园
页面总结：NeoMab 11-1004-1 FITC Mouse Anti-human CD4 Antibody（OKT4），特异性识别人 CD4 分子（55 kDa I 型跨膜糖蛋白），标记外周血辅助性 T 细胞（CD4+ T 约占 T 细胞 55-65%），100 µg/mL 抗体浓度，5 µL/百万细胞推荐用量，Mouse IgG2b,κ 亚型，2-8℃ 避光保存两年有效，广泛用于 CD4+ T 细胞免疫表型分析、CD4/CD8 比值计算、HIV/AIDS 免疫监测、Treg 鉴定、肿瘤微环境分析及疫苗免疫应答评估等科研领域。
-
产品组成：
货号/规格 组分名称 体积 11-1004-12 25T FITC Mouse Anti-human CD4 Antibody (OKT4) 125 μL 11-1004-15 100T FITC Mouse Anti-human CD4 Antibody (OKT4) 500 μL 保存：2-8℃避光保存。冰袋运输。
关键词
产品推荐
FITC Mouse Anti-human CD3 Antibody（OKT3）
货号：11-1003-1
应用：FC
种属反应性：Human
宿主种属：Mouse
FITC Mouse Anti-human CD8a Antibody（OKT8）
货号：11-1008A-1
应用：FC
种属反应性：Human
宿主种属：Mouse
FITC Mouse Anti-human CD19 Antibody（4G7）
货号：11-1019-1
应用：FC
种属反应性：Human
宿主种属：Mouse
PE/Cyanine7 Mouse Anti-human CD8a Antibody（OKT8）
货号：15-1008A-1
应用：FC
种属反应性：Human
宿主种属：Mouse
AF647 Rat Anti-Mouse Ly-6G/Ly-6C (Gr-1)Antibody (RB6-8C5)
货号：26-27018-1
应用：FC
种属反应性：Mouse
宿主种属：Rat
FITC Rat Anti-Mouse Ly-6G/Ly-6C (Gr-1)Antibody (RB6-8C5)
货号：11-27018-1
应用：FC
种属反应性：Mouse
宿主种属：Rat
提交您的留言
如果您对我们的产品感兴趣，请留下您的电子邮件地址，我们将尽快与您联系。谢谢！
小红书
抖音
公众号
积分商城
广州市黄埔区瑞和路39号G5座321-332号
客服二维码
