7.13 广州实验室 Demo：结块脾脏样本稳定完成小鼠 CD4 分选，纯度94%
发布时间:2026-07-14
挑战手把手帮1000名科研同学做好细胞分选，磁珠分选方案认准FiniGet®分必得®！
不少科研人员习惯直接用普通DPBS研磨组织，但DPBS不含EDTA与灭活FBS，研磨后极易产生组织团块，阻碍Cocktail与杂细胞结合，影响磁珠分选纯度与细胞回收率。
依据FiniGet®分必得®全系试剂盒说明书规范，脾脏单细胞制备推荐使用GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液，从源头避免细胞团聚。7月13日FiniGet®分必得®技术团队抵达广州实验室客户所在处，现场采用FiniGet®分必得®130-6002小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒完成阴性磁珠分选。
客户使用DPBS研磨脾脏，样本整体状态差、存在组织团块，即便样本预处理存在短板，最终流式检测小鼠CD4纯度仍达94.93%，同时现场对照产品说明书，给客户完整讲解标准脾脏制备操作，建议后续统一采用GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液研磨脾脏。
一、本次上门实操基础信息
活动项目：FiniGet®分必得®千人细胞分选上门行动
服务客户：广州实验室科研客户
核心使用产品：FiniGet®分必得®130-6002小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒
样本情况：小鼠脾脏单细胞，客户采用DPBS研磨，样本含大量组织团块、细胞状态偏弱
分选方式：阴性无柱式免疫磁珠分选（匹配试剂盒标准流程）
优化方案：建议后续更换GOONIE 140-2001分选缓冲液制备脾脏细胞
二、小鼠CD4分选实测数据
1. 分选上样总细胞量：1×10⁸
2. 分选后收获小鼠CD4+ T细胞：4.6×10⁶
3. 流式检测CD4分选纯度：94.93%
Demo核心亮点
1. 高杂质耐受，结块样本仍达94.93%：FiniGet®分必得®130-6002小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒配套Mouse CD4+ T Cell Isolation Cocktail有效标记并清除杂细胞，即便DPBS研磨产生组织团块，磁珠分选纯度仍达到94.93%；
2. 对照说明书给出标准化样本制备方案：按照130-6002试剂盒、GOONIE 140-2001缓冲液说明书要求，统一使用专用分选缓冲液研磨脾脏，缓冲液内含1 mM EDTA+2%灭活FBS，可抑制DNA交联形成的细胞团，提升细胞分选回收率；
3. Untouched阴性分选适配功能实验：整套磁珠分选仅用磁珠吸附杂细胞，目标CD4+ T细胞无抗体、磁珠附着，细胞分选后表面功能抗原完整，无异常激活；
4. 流程简短无需裂红：遵循说明书操作，整套细胞分选最快仅15 min，无需额外裂红步骤，仅搭配140-2000磁力架即可完成，无分选柱操作门槛低。
三、FiniGet®分必得®130-6002标准磁珠分选流程（参照产品说明书）
前置说明：本次客户采用DPBS研磨脾脏，存在明显组织团块；试剂盒标准操作推荐全程使用GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液研磨、重悬脾脏。
1. 单细胞标准化制备
70 μm细胞筛研磨脾脏，推荐使用预冷GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液冲洗筛网，500 g离心5 min弃上清，缓冲液重悬，调整细胞浓度至1×10⁸ cells/mL。缓冲液硬性规范：不含钙离子、镁离子、游离生物素，不建议单用DPBS研磨组织。
2. Cocktail避光孵育
取1×10⁸细胞体系，按比例添加FiniGet®分必得®130-6002小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒配套Mouse CD4+ T Cell Isolation Cocktail，轻柔混匀，室温避光孵育10 min，全面标记B、NK、单核等全部非CD4杂细胞。
3. 链霉亲和素磁珠结合
试剂盒内Streptavidin Beads使用前涡旋震荡30 s充分打散沉淀，按说明书配比加入细胞悬液，轻柔混匀，室温孵育2.5 min，每1-2 min轻弹管壁避免磁珠沉降结块。
4. 磁力架静置分离
分选缓冲液补足体系至2.5 mL，将流式管放入GOONIE 140-2000磁力架，室温静置2.5 min，体系总容量不可超过2.5 mL。
5. 收集纯化CD4+ T细胞
磁力架与流式管全程不分离，取上清至全新无菌离心管，上清即为纯化小鼠CD4+ T细胞，按需洗涤后直接用于各类下游细胞分选实验。
四、试剂盒与缓冲液配套优势
FiniGet®分必得®130-6002小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒
1. 阴性untouched磁珠分选，无需裂红，全套细胞分选最快仅15 min，操作高效；
2. 高耐受Cocktail配方，适配脾脏碎片、细胞团等高杂质样本，磁珠分选纯度稳定；
3. 试剂成套配备Mouse CD4+ T Cell Isolation Cocktail与Streptavidin Beads，2-8℃避光冷藏，严禁冷冻，有效期12个月；
4. 仅搭配磁力架即可，无需分选柱，降低细胞吸附损耗，适配大批量小鼠脾脏细胞分选。
GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液
1. 配方匹配全系FiniGet®分必得®磁珠分选产品，含1 mM EDTA+2%灭活FBS；
2. EDTA螯合二价离子，阻断游离DNA造成的细胞团聚，从根源解决DPBS研磨结块问题；
3. 2-8℃保存，有效期长达24个月，500 mL大容量适配长期分选实验。
五、脾脏样本制备实操规范
1. 不建议单独使用DPBS研磨脾脏：DPBS无EDTA与保护血清，细胞破裂释放DNA极易形成粘性组织团，阻碍后续磁珠分选标记，降低小鼠CD4分选纯度与收获量；
2. 标准操作流程：研磨、冲洗筛网、离心、重悬全部环节推荐统一使用GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液；
3. 若样本已出现大量团块：可添加100 μg/mL DNase I室温孵育15 min，40 μm筛过滤后再进入FiniGet®分必得®130-6002细胞分选流程。
六、FiniGet®分必得®千人细胞分选上门行动持续全国预约
全国高校、动物实验室均可预约上门磁珠分选实操教学：
- 完整演示FiniGet®分必得®细胞分选试剂盒全套标准化细胞分选流程；
- 现场讲解细胞分选实验规范，解决DPBS研磨结块等痛点；
- 线下实体Demo，同步出具流式纯度数据，直观展示高杂质样本下磁珠分选效果；
- 手把手规范Cocktail配比、磁珠混匀、磁力静置等关键操作，规避小鼠CD分选纯度不足、细胞回收率低等问题。
如果你长期处理小鼠脾脏开展小鼠CD4分选，使用DPBS研磨经常出现细胞团、细胞损耗大，可预约上门实操，采用FiniGet®分必得®130-6002+GOONIE 140-2001缓冲液成套方案，收获高纯度功能性CD4+ T细胞。
七、FAQ
Q1 用DPBS研磨小鼠脾脏容易结团，搭配FiniGet®分必得®130-6002小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒磁珠分选有什么影响？
A1 DPBS缺少EDTA和灭活FBS，细胞释放游离DNA后交联成团，Cocktail无法有效接触内部杂细胞，直接降低小鼠CD4分选纯度与细胞回收率。按照试剂盒说明书，推荐使用GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液研磨脾脏，本次广州实验室的客户结块样本也验证，即便预处理存在缺陷，FiniGet®分必得®130-6002仍能达到94.93%纯度。
Q2 FiniGet®分必得®130-6002小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒做磁珠分选，整套细胞分选流程需要多久？
A2 严格遵循产品说明书操作，从Cocktail孵育到磁力收集最快仅15 min，无需裂红，无分选柱，适合批量脾脏小鼠细胞分选。
Q3 GOONIE 140-2001细胞分选缓冲液相比普通DPBS，做脾脏细胞分选优势在哪？
A3 GOONIE 140-2001分选缓冲液含1 mM EDTA与2%灭活FBS，EDTA抑制细胞DNA交联结块，FBS封闭细胞黏附位点，适配FiniGet®分必得®全系磁珠分选产品，是分选标准配套缓冲液。
Q4 脾脏样本团块较多，使用FiniGet®分必得®130-6002小鼠CD4+ T细胞分选试剂盒前需要额外处理吗？
A4 可加入DNase I室温孵育消解团块后过筛；长期实验建议直接更换GOONIE 140-2001分选缓冲液制备单细胞，从源头减少杂质，提升磁珠分选效率。
Q5 使用FiniGet®分必得®130-6002分选得到的小鼠CD4+ T细胞，能直接开展细胞功能实验吗？
A5 可以。该试剂盒为阴性untouched磁珠分选，CD4+ T细胞无抗体、磁珠附着，表面功能抗原完整无异常激活，细胞分选后可直接用于增殖、细胞因子、共刺激等下游实验。
咨询热线：400-090-1923
品牌：FiniGet®分必得®｜样本分离专家
出品：信天翁生物科技（广州）有限公司
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