土壤、粪便RNA提取试剂盒
应用：
种属反应性：
宿主种属：
广谱适用 强力祛除腐殖酸
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- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
-
产品简介
TL;DR：GOONIE 400-107 土壤、粪便RNA提取试剂盒，适用于各种类型土壤和粪便样品的总RNA提取。本试剂盒将硅胶柱纯化技术与高效的腐殖酸去除方案相结合，能够高效去除腐殖酸等抑制因子获得高质量RNA，所得RNA产物可直接用于PCR和qPCR等实验。
核心参数总表
储存与订购
参数 规格 品牌 GOONIE 货号 400-107 规格 50次 方法 硅胶柱纯化 + 腐殖酸去除体系 适用样本 各类土壤、粪便样品 样本量 0.5 g/次 产物类型 总RNA 下游应用 PCR、qPCR 储存条件 HAR Buffer 1：4℃；其余组分：室温（15-25℃），保质期1年 运输方式 室温运输
产品特点
高效腐殖酸去除：HAR Buffer 1 + HAR Buffer 2A/2B三步体系，有效去除腐殖酸等PCR抑制因子。
双柱纯化设计：gDNA清除柱去除基因组DNA污染，RNA结合柱高纯度捕获RNA。
广谱适用性：适用于各类土壤（农田土、森林土、沙土、黏土等）和粪便样品。
下游兼容性强：所得RNA可直接用于PCR和qPCR实验。
研磨优化：双玻璃珠体系（玻璃珠1+玻璃珠2），推荐配合珠磨仪获得更好裂解效果。
产品保存
HAR Buffer 1：4℃保存；其余组分：室温（15-25℃）保存，保质期1年。室温运输。
CFS buffer：含有低毒性有机化合物，具挥发性，请置于干燥且通风良好处存储。
操作流程图
土壤、粪便RNA提取试剂盒操作流程图——GOONIE 400-107 腐殖酸去除 + 双柱纯化流程：
样本准备
1. 分别称量 200 mg 玻璃珠1 和 200 mg 玻璃珠2 到2 mL离心管中。
2. 加入 0.5 g土壤/粪便样品。
实验前准备
使用前需对洗涤液进行稀释：
组分 无水乙醇加入量 Washing Buffer 1 12 mL Washing Buffer 2 64 mL
· HAR Buffer 2A 是白色固体悬浊液，使用前摇匀吸取即可。
· 当贮存温度较低时，SRL buffer易析出沉淀，请在使用前把整瓶试剂置于55℃中至沉淀完全溶解，充分混匀后再使用。
· 第一次使用请先在Washing Buffer 1和Washing Buffer 2中加入指定量无水乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入。
使用说明
步骤1：样本裂解
1. 往离心管中加入：500 μL SRL buffer、40 μL HAR Buffer 1、400 μL 水饱和酚（需自备）、400 μL CFS buffer。
2. 高速涡旋10 min；推荐使用珠磨仪（如FastPrep-24）。
3. 室温条件下 13,000 g 离心 5 min。
步骤2：腐殖酸去除
4. 加入70 μL HAR Buffer 2A 和 70 μL HAR Buffer 2B 到新的2 mL离心管。
5. 加入350 μL 上清液，涡旋混匀，冰上静置3 min。
6. 室温条件下 13,000 g 离心 2 min。
7. 小心转移350 μL 上清液到新的2 mL离心管中。
步骤3：DNA清除与RNA纯化
8. 加入等体积 DNA Binding Buffer，涡旋混匀。
9. 将DNA吸附柱套入收集管中，转移混合液到结合柱中。
10. 室温 13,000 g 离心 30 sec，弃结合柱，保留滤液。
11. 往滤液中加入等体积 RNA Binding Buffer，吸打混匀。
12. 将RNA吸附柱套入新的收集管中，转移700 μL混合液到结合柱中。
13. 室温 13,000 g 离心 30 sec，弃滤液。重复步骤12直至所有混合液都通过结合柱。
步骤4：洗涤与洗脱
14. 加入500 μL Washing Buffer 1，13,000 g 离心 30 sec，弃滤液。
15. 加入700 μL Washing Buffer 2，13,000 g 离心 30 sec，弃滤液。重复一次。
16. 13,000 g 离心空甩2 min，弃去滤液。
17. 将RNA吸附柱套入新的1.5 mL离心管中，加入 30-50 μL Elution Buffer，室温放置1-2 min。
18. 13,000 g 离心 1 min 洗脱RNA。
19. RNA 放置 -80℃保存。
结果展示与性能对比
为了客观评估 GOONIE 400-107 在实际应用中的表现，我们针对多种不同类型的土壤样本进行了系统性的提取测试。
腐殖酸去除效果对比：比较信天翁生物与进口品牌试剂盒提取不同类型土壤样本RNA时的腐殖酸去除效果，信天翁生物具有更强的腐殖酸去除性能：
RNA纯度检测数据：测试结果表明，该试剂盒提取的RNA A260/A280比值介于1.8–2.1之间，A260/A230比值 >2.0，表明产物中蛋白质和多糖类、腐殖酸类污染物的残留极低。
下游PCR验证：取100 ng RNA进行反转录，对获得的cDNA稀释5倍，最后取1 μL样本进行PCR扩增。扩增条带良好，杂质去除干净，无抑制。
1：菜园土；2：发酵羊粪肥；3：营养土；4：塘泥；5：林下红土
适用研究领域
环境微生物研究
用于土壤微生物群落RNA分析，辅助研究环境条件变化下微生物基因表达变化。
土壤生态研究
适用于农业土壤研究、微生态变化分析、土壤功能微生物研究。
肠道菌群研究
粪便样本是研究动物及人体肠道微生物的重要来源。该试剂盒可用于粪便总RNA提取，为微生物表达分析提供实验基础。
分子检测研究
提取获得的RNA可用于PCR、qPCR等RNA相关实验。
常见问题与解决方案
Q1：RNA产量低
· 样本RNA含量低：不同土壤样本RNA含量差异较大，可适当增加样本量。
· 样本裂解不充分：建议采用研磨仪进行研磨；若采用涡旋仪需将速度调至最大；样本投入量过多需适当减少样本量或按比例增加裂解液用量。
· Washing Buffer未按要求加入无水乙醇：使用前需确认是否已加入无水乙醇。
Q2：RNA降解
· 样本用量太多：适当减少样本投入量或按比例增加裂解液用量。
· RNase酶污染：操作前对工作台面进行RNase酶去除处理，同时采用无RNase酶的实验耗材和器具。
Q3：RNA纯度低
· 腐殖酸污染：降低样本裂解时的环境温度以减少腐殖酸释放；增加HAR Buffer 2A/2B用量（注：这两种措施会在一定程度上减少RNA产量）。
· 盐污染：加入Washing Buffer 1后静置5 min，然后离心。
产品组成
货号 组分 规格 400-107A SRL buffer 28 mL 400-107B CFS buffer 22 mL 400-107C HAR Buffer 1 2.2 mL 400-107D HAR Buffer 2A 4 mL 400-107E HAR Buffer 2B 4 mL 400-107F DNA Binding Buffer 20 mL 400-107G RNA Binding Buffer 39 mL 400-107H Washing Buffer 1 18 mL 400-107I Washing Buffer 2 16 mL 400-107J Elution Buffer 3 mL 400-107K gDNA清除柱（含收集管） 50套 400-107L RNA结合柱（含收集管） 50套 400-107M 玻璃珠1 14 g 400-107N 玻璃珠2 14 g
用户自备
试剂：无水乙醇、水饱和酚。
仪器及耗材：台式高速离心机、涡旋仪、珠磨仪（推荐使用）、2 mL和1.5 mL RNase Free离心管。
注意事项
1. 第一次使用前请先在Washing Buffer 1和Washing Buffer 2中分别加入指定量无水乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入。
2. 使用本产品时应注意做好个人防护，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。
3. 本试剂盒仅供科学研究使用。
技术支持
GOONIE 隶属信天翁生物科技（广州）有限公司，深耕分子生物学试剂研发。客服 400-090-1923 / service@gooniebio.com
页面总结
GOONIE 400-107 土壤、粪便RNA提取试剂盒，适用于各种类型土壤和粪便样品的总RNA提取，将硅胶柱纯化技术与高效腐殖酸去除方案相结合，所得RNA可直接用于PCR和qPCR实验。HAR Buffer 1需4℃保存，其余组分室温保存，保质期1年。
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产品组成
货号 组分 规格 400-107A SRL buffer 28 mL 400-107B CFS buffer 22 mL 400-107C HAR Buffer 1 2.2 mL 400-107D HAR Buffer 2A 4 mL 400-107E HAR Buffer 2B 4 mL 400-107F DNA Binding Buffer 20 mL 400-107G RNA Binding Buffer 39 mL 400-107H Washing Buffer 1 18 mL 400-107I Washing Buffer 2 16mL 400-107J Elution Buffer 3 mL 400-107K gDNA清除柱（含收集管） 50套 400-107L RNA结合柱（含收集管） 50套 400-107M 玻璃珠1 14 g 400-107N 玻璃珠2 14 g -
注意事项
1. 第一次使用前请先在Washing Buffer 1和Washing Buffer 2中分别加入指定量无水乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入！
2. 使用本产品时应注意做好个人防护，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。
3. 本试剂盒仅供科学研究使用。
关键词
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