动物组织总RNA提取试剂盒
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40分钟快速提取，0苯酚0氯仿
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- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
-
本试剂盒适用于从约20mg动物组织样品中快速提取高质量的大于200nt的总RNA。采用独特的裂解体系，能迅速裂解组织并失活RNA酶，确保RNA完整性；不使用苯酚、氯仿等有毒物质，也无需耗时的醇沉淀，全程约40分钟。所提RNA产量大、纯度高，适用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、基因表达芯片分析、高通量测序等多种下游实验。
核心优势
1. 组织专用，约40分钟完成
针对动物组织样本优化，配Proteinase K消化与匀浆裂解流程，从称样到RNA洗脱约40分钟，无需过夜消化、无需醇沉淀，适合多样本并行处理。
2. 0苯酚 0氯仿，无毒配方
全程不使用苯酚、氯仿等有毒试剂，柱式纯化，减少对实验人员的健康危害，废液处理也更简单。
3. 双流程设计，难提组织也能搞定
提供复杂样本、简单样本两套裂解上柱流程：肝、肠、胃等易裂解高得率组织可走简化流程；心、肺、肾、肌肉、脑等难裂解或低RNA含量组织走Proteinase K消化流程。未知样本首次按复杂样本操作即可，覆盖肝、胰、肠、胃、心、脾、肾、肺、肌肉、脑等多种组织。
4. 高纯度，适配测序等多种下游
柱式纯化所得RNA纯度高、完整性好，可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、基因表达芯片与高通量测序。已有客户文献使用本产品（与细胞款400-100配合）提取组织和细胞RNA，用于肺纤维化、肝纤维化等研究并发表SCI论文。
适用组织与参考用量
标准上样量约20mg，样本量对提取效果至关重要，请按组织类型选择合适用量：
组织类型 参考用量（mg） 建议流程 肝、胰、肠、胃 约10 简单样本（易裂解、高得率） 心、脾、肾、肺 20~30 复杂样本（Proteinase K） 肌肉 20~50 复杂样本（Proteinase K） 脑 约20 复杂样本（Proteinase K） 未知提取难易程度的样本，首次优先按复杂样本流程操作；加入Lysis Buffer后容易磨碎、且得率大于15μg/20mg的组织（如肝、肠、胃），再次提取时可按简单样本流程简化。
约40分钟操作流程
① 裂解与匀浆
称取约20mg组织至1.5ml离心管，加入350μL Lysis Buffer，先用剪刀快速剪碎，再用电动匀浆机/玻璃匀浆器/组织破碎仪匀浆。动作要迅速，让组织与裂解液快速充分接触以抑制RNA酶活性。
② 蛋白酶K消化（复杂样本）
复杂样本：加入350μL Lysis Buffer稀释液和20μL Proteinase K，涡旋混匀，55℃水浴10分钟；14000×g离心5分钟，转移上清至新管，加入0.5倍体积无水乙醇，吹吸混匀。简单样本：匀浆后直接离心取上清，加入等体积70%乙醇（用Lysis Buffer稀释液配制）混匀。
③ 上柱与洗涤
混合液转入RNA纯化柱，12000×g离心1分钟弃废液（体积大可分2次）；先后用350μL Buffer CB洗2次、500μL Buffer WB洗1次，最后空柱12000×g离心1分钟。
④ 晾干与洗脱
超净台中将纯化柱转入干净无RNA酶的1.5ml离心管，最大风扇开盖晾干2分钟；在膜中央加入20~30μL Elution Buffer，室温静置2分钟，12000×g离心1分钟，所得RNA置于-80℃保存。
关键提示：Buffer CB首次使用前加40ml无水乙醇、Buffer WB加45ml无水乙醇并摇匀；Lysis Buffer低温结晶变浑浊时，37℃温水孵育约20分钟至澄清即可正常使用。
性能与客户实测
柱式纯化所得RNA纯度高、条带完整，可稳定支持RT-qPCR等下游实验。以下均为客户使用 GOONIE 400-103 动物组织总RNA提取试剂盒 处理真实样本后的回传结果与NanoDrop读数（客户信息已脱敏），样本覆盖脑、肝、皮肤、肾、脂肪、睾丸、肿瘤等多种组织。
① 脑海马组织（半个 / 大鼠海马）
客户用半个脑海马体提取，12个样浓度在 91.6~188.2ng/μL 之间，客户评价“量比传统方法稍低，但也够用了”；另一组大鼠脑海马回传浓度 1185.8~1569.4ng/μL，A260/280 1.81~1.87。脑组织建议按说明书取约20mg、匀浆充分，脑组织12~15mg用量也有客户回传“效果好”。
② 肝、皮肤、肾等实质组织：得率高、纯度稳
小鼠肝脏（20~50mg，20μL洗脱）
客户回传浓度 3558.0~8133.0ng/μL，A260/280 2.16~2.17、A260/230 1.80~2.26，肝组织RNA含量高，属于说明书中的“简单样本”，可省略Proteinase K消化快速完成。鸡肝12mg、鲤鱼肝20mg也均有“效果好”反馈。
皮肤组织（23mg）
皮肤含胶原丰富、相对难裂解，客户23mg样本回传浓度 1176.9~1416.6ng/μL、A260/280 2.13~2.14；其中一个样A260/230=1.5，提示乙醇或胍盐残留，按说明书超净台开盖晾干2分钟即可改善。猪皮25~30mg同样回传“效果好”。
小鼠肾脏：下游RT-qPCR电泳条带清晰
客户回传小鼠肾脏提取后RT-qPCR扩增产物电泳条带清晰明亮、无拖尾，RNA质量可稳定支撑下游扩增。此外，脂肪53mg、睾丸30mg、肠癌组织（绿豆大小）、小鼠肠道、秀丽隐杆线虫（9cm培养皿2个）等样本均有“效果好”回传。
③ 提取不理想怎么办？客户真实问题与处理建议
浓度低（多见于研磨不充分）：有客户脑组织约30mg、人肝癌组织50mg出现浓度偏低，原因多为研磨不彻底。组织取出后应迅速、充分匀浆，难裂解样本走Proteinase K流程（55℃水浴10分钟），必要时加大样本量并重复洗脱。
A260/230低（乙醇/胍盐/离子残留）：心肌组织、昆虫头部组织回传中出现过230值偏低。处理建议：最后一步空柱12000×g离心2分钟，开盖晾干1~2分钟再洗脱；离子污染可将Wash Buffer洗涤次数增加到2次。
RNA浓度高但qPCR的CT值偏大（>30）：肝组织RNA得率很高，模板浓度过高反而抑制反转录/扩增。建议反转录取1μg总RNA、cDNA不稀释直接作为模板上机。
适用范围提示：适用范围提示：本试剂盒为动物组织设计，客户在线虫、细菌、植物花瓣/叶片等样本上也有成功尝试；但多糖多酚类植物样本（如丹参根）不建议使用，建议选择植物专用提取试剂盒。初期提取浓度偏低时，按组织专用流程加大样本量、充分匀浆后即可解决。
小结：从不到10mg的脑核团到几十毫克的肝、皮肤，400-103在真实组织样本上浓度与纯度均有稳定表现。组织提取三要素：样本量足（约20mg）、匀浆快且充分、柱洗后晾干到位；难裂解组织走Proteinase K流程，能覆盖绝大多数动物组织样本。
文献引用
GOONIE动物组织RNA提取试剂盒已被SCI论文用于动物组织样本RNA提取，覆盖肺纤维化、脓毒症心肌/肺损伤、抗感染免疫等研究方向。以下为代表性文献（方法学标注GOONIE货号或产品名，均经核验）：
期刊（IF） 论文信息 原文 Eur J Pharmacol（IF约4.7~5.0，JCR约数） Astilbin directly targets trimethylguanosine synthase 1 to enhance telomerase activity thus alleviating pulmonary fibrosis
Zhao J, et al. 2026；博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型，肺组织/细胞RNA用GOONIE（400-100/400-103）提取，下游RT-qPCR
安徽医科大学药学院查看原文 Front Microbiol（IF约4.0） Caerin 1.1/1.9 peptides control Acinetobacter baumannii infection through combined antibacterial and host-directed immunomodulatory mechanisms
Wu H, Li J, et al. 2026；小鼠皮肤创伤感染模型，皮肤组织总RNA用GOONIE Animal Tissue RNA Kit提取，下游RT-qPCR（GAPDH内参，2-ΔΔCt）
广东药科大学附属第一医院查看原文 J Ethnopharmacol（IF约5.4） Integrated metabolomics and network pharmacology reveal the mechanisms of Xuebijing in counteracting sepsis-induced myocardial dysfunction
2025；CLP脓毒症小鼠模型，心肌组织总RNA用GOONIE 400-103提取，结合代谢组学与网络药理学（方法学货号经原文确认）
下游RT-qPCR验证查看原文 J Inflamm Res（IF约4.2） Xuebijing Injection Alleviates Sepsis-Induced Acute Lung Injury by Inhibition of Cell Apoptosis and Inflammation Through the Hippo Pathway
2025；CLP脓毒症小鼠急性肺损伤模型，肺组织总RNA用GOONIE 400-103提取（方法学写 “a total RNA extraction kit (GOONIE, China)”，货号经原文确认），下游RT-qPCR
安徽医科大学第二附属医院查看原文 注：方法学原文为 "Total RNA from tissues/cells was isolated with a commercial RNA kit (400-100/400-103, GOONIE)"。IF为JCR约数，上线前以最新JCR核对；更多组织提取文献欢迎联系技术支持获取。
常见问题 FAQ
Q：400-103和400-100、400-105有什么区别？
A：400-103为动物组织专用，针对约20mg组织样本，配Proteinase K并分复杂/简单两套裂解上柱流程，含组织匀浆步骤，全程约40分钟；400-100为培养细胞专用，针对约1×10^6细胞，无需蛋白酶K消化，约8分钟完成。提组织样本请选400-103，提细胞选400-100。如果需要处理动物组织或同时需要细胞和组织通用方案，选400-105。
Q：一次提取需要多少组织？
A：标准上样量约20mg。不同组织参考用量：肝、胰、肠、胃约10mg；心、脾、肾、肺约20~30mg；肌肉约20~50mg；脑约20mg。样本量对提取效果影响很大，请按推荐用量称取，过量易导致裂解不充分或离心柱堵塞。
Q：什么是复杂样本、什么是简单样本？第一次提该用哪套流程？
A：复杂样本指难裂解或RNA含量低的组织，需加Proteinase K并55℃水浴10分钟；简单样本指容易裂解、RNA含量高的组织（如肝、肠、胃，得率大于15μg/20mg），可省略蛋白酶K消化。未知提取难易程度的样本，首次优先按复杂样本流程操作；确认易裂解后再按简单样本流程简化。
Q：Buffer CB和Buffer WB使用前要加乙醇吗？
A：要。第一次使用前，必须向Buffer CB中加入40ml无水乙醇、向Buffer WB中加入45ml无水乙醇，并充分摇匀。建议使用新鲜无水乙醇；漏加乙醇会导致RNA挂不上柱或洗涤不充分、纯度偏低。
Q：组织RNA提取能用在哪些下游实验？
A：适用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、基因表达芯片（微阵列）分析、高通量测序等。已有客户文献使用本产品提取的组织/细胞RNA送测序并发表SCI论文。
Q：能提miRNA等200nt以下的小片段RNA吗？
A：本试剂盒（400-103）提取大于200nt的总RNA，不包含miRNA等200nt以下的小片段RNA。若需提取miRNA等小片段RNA，建议选用miRNA专用提取试剂盒，可针对性回收200nt以下的小片段RNA。
Q：提取RNA浓度低或A260/230偏低怎么办？
A：浓度低常见原因：①组织量不足或裂解不充分（充分匀浆、复杂组织务必走Proteinase K流程）；②Buffer CB/WB使用前未加无水乙醇；③洗脱不充分（洗脱液20~30μL加在膜中央、勿碰侧壁，可重复洗脱一次）。A260/230偏低多与乙醇残留有关：洗涤后空柱离心，并在超净台开盖晾干2分钟确认乙醇挥发后再洗脱。
Q：Proteinase K和其他试剂怎么保存？
A：Proteinase K冰袋运输、-20℃保存；其余试剂和RNA纯化柱常温运输、室温（15-25℃）保存。Lysis Buffer低温下可能结晶析出变浑浊，属正常现象，37℃温水孵育约20分钟至澄清即可使用；Elution Buffer建议首次使用前分装成小份室温保存。
Q：洗脱体积多少合适？RNA怎么保存？
A：洗脱体积建议20~30μL，不低于20μL，加在纯化柱膜中央、不可加至侧壁，室温静置2分钟后离心；重复洗脱可提高RNA产量。洗脱产物建议置于-80℃保存，全程使用无RNA酶试剂耗材。
Q：逆转录前需要做gDNA去除吗？
A：一般没有大量gDNA污染。但逆转录前均建议采用DNA酶处理以保证RNA纯净（推荐使用GOONIE逆转录试剂盒500-101，含gDNA去除酶）。
技术支持
如有组织样本适用性、操作或数据问题，欢迎联系信天翁生物技术团队获取支持。
咨询热线 400-090-1923 官方邮箱 service@gooniebio.com 官网 www.gooniebio.cn 地址 广州市黄埔区瑞和路39号纳金科技园 相关产品
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品牌：GOONIE｜核酸提取与PCR试剂 ｜ 出品：信天翁生物科技（广州）有限公司
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产品编号 组分 100次用量 400-103A Lysis Buffer 40 ml 400-103B Buffer CB 40 ml 400-103C Buffer WB 15 ml 400-103D Elution Buffer 20 ml 400-103E Proteinase K 2 ml 400-103F Lysis Buffer稀释液 40 ml 400-103G RNA纯化柱（带收集管） 100套 注：第一次使用前，必须向 Buffer CB 中加入 40 ml 无水乙醇、向 Buffer WB 中加入 45 ml 无水乙醇，并充分摇匀。Proteinase K 冰袋运输、-20℃保存；其余组分室温（15-25℃）保存。
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注意事项
1. 提取过程在室温进行，按推荐使用合适的样本量，以避免产生不溶物堵塞离心柱。试剂盒开封后，每次使用应严格按照规范操作，谨防 RNase 污染，Elution Buffer 需分装成小份保存。
2. Buffer CB 、WB 首次使用前需加入对应体积无水乙醇并充分摇匀。
3. 为充分溶解 RNA，洗脱液的体积最好不低于 20 μl。重复洗脱可提高 RNA 产量。洗脱液需加至 RNA 纯化柱中央的膜上，不可加至侧壁。
4. 为保证提取质量，建议全程使用无 RNA 酶的试剂耗材，尤其是 RNA 洗脱步骤。
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