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    细胞总RNA快速提取试剂盒

    应用:

    种属反应性:

    宿主种属:

    8分钟极速提取,0苯酚0氯仿

    产品名称:细胞总RNA快速提取试剂盒 货号:400-100 规格:100T 目录价:¥1,400.00 品牌:GOONIE 厂家:信天翁生物科技(广州)有限公司 官网产品链接:www.gooniebio.cn/products/goonie/cell-total-rna-extraction-kit-400-100.html
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      • 100T

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    • 产品描述
    • 组成成分
    • 注意事项
    • 本试剂盒适用于从约1×10^6个细胞中快速提取高质量的大于200nt的总RNA。采用独特的裂解体系,能迅速裂解生物样品并失活RNA酶,确保RNA提取的完整性。不使用苯酚、氯仿等有毒物质,所提RNA产量大、纯度高,适用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库、微阵列分析、测序等多种下游实验。

      核心优势

      1. 8分钟快速提取

      从样本裂解到RNA洗脱,8分钟即可完成高纯度RNA提取,适合多样本通量场景,显著提升实验效率。

      2. 0苯酚 0氯仿,无毒配方

      不使用苯酚、氯仿等有毒试剂,全程室温操作,减少对实验人员的健康危害,废液处理也更简单。有客户反馈原来使用Trizol类试剂“太毒了”而希望更换,改用本试剂盒后在Jurkat细胞提取上从3小时缩短至约40分钟。

      3. 室温操作,无需低温离心

      整个提取过程在室温(15-25℃)进行,无需提前预冷试剂或低温离心,简化操作流程,降低设备要求。

      4. 高纯度,适配多种下游

      提取RNA A260/280通常落在2.0~2.2,A260/230多数样本>2.0,可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库、微阵列分析、RNA-seq等多种下游实验。已有多篇客户文献使用本产品RNA送Azenta、Illumina等平台测序。

      性能实测数据

      以下为厂家自测+客户回传数据(信息已脱敏),样本已覆盖上百种细胞类型:

      GOONIE 400-100 293F细胞RNA提取电泳结果
      293F细胞(5×10^5)RNA提取琼脂糖凝胶电泳结果,28S/18S条带清晰

      纯度表现(A260/280):多数样本落在2.0~2.2区间;HTR-8滋养层细胞实测A260/280=2.24、A260/230=2.46。

      浓度表现:内皮细胞2×10^6/样最高3152.9 ng/μL;293T六孔板长满1841.8~1969.9 ng/μL(5个平行样一致性良好);肝肿瘤细胞1488.8 ng/μL;CHO细胞3.5×10^6/样1940.6 ng/μL。

      下游验证:提取RNA已成功用于RT-qPCR、琼脂糖凝胶电泳、RNA-seq等下游实验,多篇客户文献送Azenta、Illumina等平台测序(见“文献引用”板块)。

      客户实验室实测反馈

      以下数据均来自客户使用GOONIE 400-100后回传的真实实验结果(信息已脱敏),样本已覆盖上百种细胞类型。

      ① 常规细胞系:高浓度、高纯度

      内皮细胞(2×10^6 细胞/样)

      RNA浓度最高达 3152.9 ng/μL,A260/280 为 2.17~2.19。

      GOONIE 400-100 内皮细胞RNA提取NanoDrop浓度纯度读数

      293T细胞(六孔板长满,5个平行样)

      浓度 1841.8~1969.9 ng/μL,A260/280 均在 2.08~2.10,批间一致性好;客户在20万、100万细胞量下同样获得稳定结果。

      GOONIE 400-100 293T细胞5个平行样RNA提取浓度读数

      肝肿瘤细胞(六孔板(未计数))

      RNA浓度 1488.8 ng/μL,A260/280 为 2.00。

      GOONIE 400-100 肝肿瘤细胞RNA提取仪器读数

      胃和胰腺正常上皮细胞(六孔板)

      2个样本浓度 1414.7、1096.1 ng/μL,A260/280 为 2.07、2.06。

      GOONIE 400-100 胃和胰腺正常上皮细胞RNA提取读数

      HTR-8滋养层细胞(六孔板2孔合并,洗脱约20μL)

      浓度 939.1 ng/μL,A260/280 为 2.08、A260/230 为 2.25,两项纯度指标均表现优秀。

      GOONIE 400-100 HTR-8滋养层细胞RNA提取浓度纯度读数

      内膜癌细胞(六孔板70%密度)

      浓度 424.9~945.4 ng/μL,A260/280 为 2.12,客户评价“浓度、纯度都好”。

      GOONIE 400-100 内膜癌细胞7个样本RNA提取浓度读数

      HUVEC人脐静脉内皮细胞(六孔板汇合80%,3孔合并过2柱)

      RNA浓度 400~800 ng/μL 区间,客户反馈“浓度跟之前用的试剂盒差不多,提得挺好的,速度也快”。

      GOONIE 400-100 HUVEC人脐静脉内皮细胞RNA提取读数

      ② 原代细胞与难提样本

      CHO细胞(3.5×10^6 细胞/样)

      RNA浓度 1940.6 ng/μL,A260/280 为 2.3。

      GOONIE 400-100 CHO细胞RNA提取Nano-300浓度读数

      SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞(60mm中皿,密度80%)

      RNA浓度 507 ng/μL,A260/280 为 2.06,客户反馈“总体来说很方便快速”。

      GOONIE 400-100 SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞RNA提取读数

      BMDM原代巨噬细胞(60mm皿密度50%,1mL裂解液)

      RNA浓度 507.9 ng/μL,A260/280 为 2.11。

      GOONIE 400-100 BMDM原代巨噬细胞RNA提取浓度纯度读数

      大鼠软骨细胞(12孔板,NC+4个药物处理组)

      NC组 454.3 ng/μL,4个药物处理组 205.4~257.6 ng/μL,A260/280 为 2.09~2.13。该药物本身具有抑制RNA合成的作用,处理组浓度下降符合预期,各组RNA仍可稳定支持下游检测。

      GOONIE 400-100 大鼠软骨细胞NC及药物处理组RNA提取读数(1)
      GOONIE 400-100 大鼠软骨细胞NC及药物处理组RNA提取读数(2)

      小鼠BV2小胶质细胞(六孔板长满)

      客户反馈“浓度高,纯度好,下游实验溶解曲线正常,重复性也挺好”;RAW264.7巨噬细胞在 130万~250万/孔 的细胞量梯度下均提取成功。

      GOONIE 400-100 小鼠BV2小胶质细胞与RAW264.7巨噬细胞RNA提取读数

      ③ 客户同步对比

      速度对比|Jurkat悬浮细胞:客户同步对比传统提取试剂,传统试剂全程用时至少3小时,使用GOONIE试剂盒约40分钟即完成提取,且无需苯酚、氯仿等有毒试剂。也有客户明确反馈,原来使用Trizol类试剂正是因为“太毒了”而希望更换。

      纯度对比|同批THP-1诱导巨噬细胞:客户在同一批样本上对比传统Trizol法,Trizol所得RNA浓度略高一点,但纯度指标不如GOONIE试剂盒;在Th17细胞样本上,传统Trizol法所得RNA的A260/280、A260/230均低于1.6,纯度不理想。

      低本底免疫细胞:对于RNA含量本底较低的免疫细胞,也有客户反馈浓度虽然不算高,但RT-qPCR扩增曲线正常、Ct值可用——少量样本优先选择qPCR等灵敏度高的下游方法即可。

      客户实测数据汇总(节选)

      样本类型样本量/培养条件RNA浓度(ng/μL)A260/280
      内皮细胞2×10^6/样最高3152.92.17~2.19
      CHO细胞3.5×10^6/样1940.62.06
      293T细胞六孔板长满,5平行1841.8~1969.92.08~2.10
      肝肿瘤细胞六孔板1488.82.00
      胃和胰腺正常上皮六孔板1096.1~1414.72.06~2.07
      气道基底干细胞(未分化)冻存细胞900以上2.19
      HTR-8滋养层六孔板2孔合并,洗脱20μL878.62.24
      内膜癌六孔板70%,7样764.9~966.22.12~2.18
      HUVEC六孔板80%,3孔合并2柱约400~8002.1
      HCT116—829.52.15
      BMDM原代巨噬60mm皿50%,1mL裂解液507.92.11
      SH-SY5Y神经细胞60mm中皿80%5072.06
      大鼠软骨(NC+药物梯度)12孔板205.4~454.32.09~2.13
      RAW264.7巨噬(梯度)130万~250万/孔各梯度均成功—
      HCT116(转染后24h)25万铺板约219~2362.05~2.19
      A549六孔板80%329.42.11
      人血白细胞5mL全血分离284.7—

      客户反馈摘录:“提的挺好的,速度也快。”——HUVEC用户;“总体来说很方便快速。”——SH-SY5Y用户;“浓度高,纯度好,下游实验溶解曲线正常,重复性也挺好的。”——BV2用户

      注:以上为不同客户实验室的回传数据,样本培养条件、细胞状态与洗脱体积存在差异,浓度数值仅供参考。此外,也有客户将本试剂盒探索用于秀丽隐杆线虫、斑马鱼胚胎/幼鱼、蚜虫等微小模式生物样本并获得可用结果。

      8分钟操作流程

      从细胞收集到RNA洗脱,仅需8分钟。请对照上方操作演示视频(时长1分21秒)与以下关键节点操作:

      关键操作节点

      裂解:每1×10^6细胞加入裂解液,充分吹打混匀,室温裂解;对于贴壁细胞,可直接在培养板中加入裂解液裂解。

      乙醇混合:加入等体积无水乙醇,充分混匀后转入RNA纯化柱。

      洗涤:Wash Buffer洗涤后充分甩干,确认乙醇挥发后再进行下一步。

      洗脱:Elution Buffer不少于20μL,加在膜中央勿碰侧壁,可重复洗脱一次提高产量。

      适用样本与下游应用

      适用样本量建议

      细胞类型建议样本量备注
      常规贴壁细胞(HEK293、A549、HepG2等)1×10^5 ~ 2×10^6不确定时先试1×10^6
      低RNA含量细胞(T/B、NK、PBMC、Th17、Jurkat等)1×10^6 ~ 3×10^6建议加大细胞量
      珍稀细胞(≤1000个)≥5万(最低)低于5万建议用500-103/500-106

      贴壁细胞密度建议:12孔板70%以上密度、6孔板40%左右密度效果较好。若6孔板细胞密度≥60%,建议在板中加入1mL Lysis Buffer裂解后,加入等体积无水乙醇,分2个离心柱按说明书操作。

      下游实验适配:RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库构建、微阵列分析、RNA-seq。测序公司对溶剂有要求时可将Elution Buffer换成无酶水。客户实测已成功送Azenta、Illumina等平台测序。

      珍稀细胞联动:样本量极少的珍稀细胞可选择RNAflash™ DCA 1-step RT qPCR(SYBR Green)kit(500-103)或RNAflash™ DCA 2-step RT qPCR(probe)kit(500-106),最少支持10个细胞直扩,一次实验测完Ct值。

      文献引用

      GOONIE 400-100已被多篇SCI论文引用,覆盖肿瘤耐药、神经退行性疾病、免疫炎症、心血管代谢、眼科等多个领域。以下为部分代表性文献(按研究领域分组,点击“查看原文”可跳转DOI):

      序号期刊(IF)论文信息原文
      肿瘤耐药与机制
      [1]JCI
      IF 15.9
      Biallelic GLTP mutations cause nonsyndromic epidermal differentiation disorder via disrupted epidermal glucosylceramide transport
      Zhang Z, et al. 2026
      RNA送Azenta测序
      南方医科大学皮肤病医院
      查看原文
      [2]Adv Sci
      IF 14.3
      m1A-Dependent TRMT6/61A-ARG2 Axis Drives Protumorigenic Senescence
      Li T, et al. 2026
      中山大学附属第六医院
      查看原文
      [3]J Adv Res
      IF 10.6
      Heme oxygenase 1 (HO-1) is a drug target for reversing cisplatin resistance in non-small cell lung cancer
      Mei J, et al. 2026
      中南大学湘雅医院
      查看原文
      [4]Cell Death Dis
      IF 8.2
      AURKA suppresses NCOA4-mediated ferritinophagy to enhance sorafenib resistance in hepatocellular carcinoma
      Zhu W, et al. 2026
      中山大学肿瘤防治中心
      查看原文
      [5]Front Immunol
      IF 5.9
      Identification of plasma inflammatory biomarkers for Alzheimer's disease reveals IFN-γ as a regulator of ACSL1-mediated microglia phenotype
      Huang R, et al. 2026
      汕头大学医学院第一附属医院;同文引用500-102
      汕头大学医学院第一附属医院
      查看原文
      [6]Neoplasia
      IF 5.4
      White-to-brown adipose switching promotes bladder cancer progression
      Gao M, et al. 2026
      中山大学孙逸仙纪念医院
      查看原文
      [7]ACS Omega
      IF 4.3
      Anti-Inflammatory Diterpenoids from the Aerial Parts of Isodon suzhouensis
      Liu WH, et al. 2025
      安徽医科大学
      查看原文
      神经退行性疾病与眼科
      [8]J Neuroinflammation
      IF 8.5
      Acarbose modulates microglial Pkm2 acetylation to reshape immunometabolism and preserve retinal neurons after ischemia-reperfusion
      Wen Y, et al. 2026
      中山大学中山眼科中心
      查看原文
      [9]J Transl Med
      IF 6.1
      Retinal ALKBH5 inhibition induces myopia protection through selective regulation of ERK1/2 signaling
      Zhu J, et al. 2025
      浙江大学医学院附属第一医院
      查看原文
      [10]

      产品组成

      产品编号组分(100 次)
      400-100ALysis Buffer50 ml
      400-100BWash Buffer15 ml
      400-100CElution Buffer20 ml
      400-100DRNA 纯化柱(带收集管)100 套

       注:第一次使用前,必须向 Wash Buffer  中加入 45 ml 无水乙醇

    • 注意事项

      1 、提取过程在室温进行,按推荐使用合适的样本量,以避免产生不溶物堵塞离心柱。对于贴壁细胞样品,通常十二孔板 70%以上密度、六孔板 40%左右密度能获得较好的提取结果。若六孔板细胞密度在 60%以上,建议加入在板中 1 ml 的 Lysis buffer 裂解,然后加入等体积无水乙醇,转入 2 个离心柱然后按说明书步骤进行操作。

      2 、试剂盒开封后,每次使用应严格按照规范操作,谨防 RNase 污染,Elution 需分装成小份保存。

      3 、Wash Buffer 首次使用前需加入 45 ml 无水乙醇。

      4 、为充分溶解 RNA,洗脱液的体积最好不低于 20 μl。重复洗脱可提高 RNA 产量。洗脱液需加至

      RNA 纯化柱中央的膜上,不可加至侧壁。

      5 、为保证提取质量,建议全程使用无 RNA 酶的试剂耗材,尤其是 RNA 洗脱步骤。

    • 关键词

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