细胞总RNA快速提取试剂盒
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8分钟极速提取，0苯酚0氯仿
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- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
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本试剂盒适用于从约1×10^6个细胞中快速提取高质量的大于200nt的总RNA。采用独特的裂解体系，能迅速裂解生物样品并失活RNA酶，确保RNA提取的完整性。不使用苯酚、氯仿等有毒物质，所提RNA产量大、纯度高，适用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库、微阵列分析、测序等多种下游实验。
核心优势
1. 8分钟快速提取
从样本裂解到RNA洗脱，8分钟即可完成高纯度RNA提取，适合多样本通量场景，显著提升实验效率。
2. 0苯酚 0氯仿，无毒配方
不使用苯酚、氯仿等有毒试剂，全程室温操作，减少对实验人员的健康危害，废液处理也更简单。有客户反馈原来使用Trizol类试剂“太毒了”而希望更换，改用本试剂盒后在Jurkat细胞提取上从3小时缩短至约40分钟。
3. 室温操作，无需低温离心
整个提取过程在室温（15-25℃）进行，无需提前预冷试剂或低温离心，简化操作流程，降低设备要求。
4. 高纯度，适配多种下游
提取RNA A260/280通常落在2.0~2.2，A260/230多数样本>2.0，可直接用于RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库、微阵列分析、RNA-seq等多种下游实验。已有多篇客户文献使用本产品RNA送Azenta、Illumina等平台测序。
性能实测数据
以下为厂家自测+客户回传数据（信息已脱敏），样本已覆盖上百种细胞类型：
293F细胞（5×10^5）RNA提取琼脂糖凝胶电泳结果，28S/18S条带清晰 纯度表现（A260/280）：多数样本落在2.0~2.2区间；HTR-8滋养层细胞实测A260/280=2.24、A260/230=2.46。
浓度表现：内皮细胞2×10^6/样最高3152.9 ng/μL；293T六孔板长满1841.8~1969.9 ng/μL（5个平行样一致性良好）；肝肿瘤细胞1488.8 ng/μL；CHO细胞3.5×10^6/样1940.6 ng/μL。
下游验证：提取RNA已成功用于RT-qPCR、琼脂糖凝胶电泳、RNA-seq等下游实验，多篇客户文献送Azenta、Illumina等平台测序（见“文献引用”板块）。
客户实验室实测反馈
以下数据均来自客户使用GOONIE 400-100后回传的真实实验结果（信息已脱敏），样本已覆盖上百种细胞类型。
① 常规细胞系：高浓度、高纯度
内皮细胞（2×10^6 细胞/样）
RNA浓度最高达 3152.9 ng/μL，A260/280 为 2.17~2.19。
293T细胞（六孔板长满，5个平行样）
浓度 1841.8~1969.9 ng/μL，A260/280 均在 2.08~2.10，批间一致性好；客户在20万、100万细胞量下同样获得稳定结果。
肝肿瘤细胞（六孔板（未计数））
RNA浓度 1488.8 ng/μL，A260/280 为 2.00。
胃和胰腺正常上皮细胞（六孔板）
2个样本浓度 1414.7、1096.1 ng/μL，A260/280 为 2.07、2.06。
HTR-8滋养层细胞（六孔板2孔合并，洗脱约20μL）
浓度 939.1 ng/μL，A260/280 为 2.08、A260/230 为 2.25，两项纯度指标均表现优秀。
内膜癌细胞（六孔板70%密度）
浓度 424.9~945.4 ng/μL，A260/280 为 2.12，客户评价“浓度、纯度都好”。
HUVEC人脐静脉内皮细胞（六孔板汇合80%，3孔合并过2柱）
RNA浓度 400~800 ng/μL 区间，客户反馈“浓度跟之前用的试剂盒差不多，提得挺好的，速度也快”。
② 原代细胞与难提样本
CHO细胞（3.5×10^6 细胞/样）
RNA浓度 1940.6 ng/μL，A260/280 为 2.3。
SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞（60mm中皿，密度80%）
RNA浓度 507 ng/μL，A260/280 为 2.06，客户反馈“总体来说很方便快速”。
BMDM原代巨噬细胞（60mm皿密度50%，1mL裂解液）
RNA浓度 507.9 ng/μL，A260/280 为 2.11。
大鼠软骨细胞（12孔板，NC+4个药物处理组）
NC组 454.3 ng/μL，4个药物处理组 205.4~257.6 ng/μL，A260/280 为 2.09~2.13。该药物本身具有抑制RNA合成的作用，处理组浓度下降符合预期，各组RNA仍可稳定支持下游检测。
小鼠BV2小胶质细胞（六孔板长满）
客户反馈“浓度高，纯度好，下游实验溶解曲线正常，重复性也挺好”；RAW264.7巨噬细胞在 130万~250万/孔 的细胞量梯度下均提取成功。
③ 客户同步对比
速度对比｜Jurkat悬浮细胞：客户同步对比传统提取试剂，传统试剂全程用时至少3小时，使用GOONIE试剂盒约40分钟即完成提取，且无需苯酚、氯仿等有毒试剂。也有客户明确反馈，原来使用Trizol类试剂正是因为“太毒了”而希望更换。
纯度对比｜同批THP-1诱导巨噬细胞：客户在同一批样本上对比传统Trizol法，Trizol所得RNA浓度略高一点，但纯度指标不如GOONIE试剂盒；在Th17细胞样本上，传统Trizol法所得RNA的A260/280、A260/230均低于1.6，纯度不理想。
低本底免疫细胞：对于RNA含量本底较低的免疫细胞，也有客户反馈浓度虽然不算高，但RT-qPCR扩增曲线正常、Ct值可用——少量样本优先选择qPCR等灵敏度高的下游方法即可。
客户实测数据汇总（节选）
样本类型 样本量/培养条件 RNA浓度(ng/μL) A260/280 内皮细胞 2×10^6/样 最高3152.9 2.17~2.19 CHO细胞 3.5×10^6/样 1940.6 2.06 293T细胞 六孔板长满，5平行 1841.8~1969.9 2.08~2.10 肝肿瘤细胞 六孔板 1488.8 2.00 胃和胰腺正常上皮 六孔板 1096.1~1414.7 2.06~2.07 气道基底干细胞(未分化) 冻存细胞 900以上 2.19 HTR-8滋养层 六孔板2孔合并，洗脱20μL 878.6 2.24 内膜癌 六孔板70%，7样 764.9~966.2 2.12~2.18 HUVEC 六孔板80%，3孔合并2柱 约400~800 2.1 HCT116 — 829.5 2.15 BMDM原代巨噬 60mm皿50%，1mL裂解液 507.9 2.11 SH-SY5Y神经细胞 60mm中皿80% 507 2.06 大鼠软骨(NC+药物梯度) 12孔板 205.4~454.3 2.09~2.13 RAW264.7巨噬(梯度) 130万~250万/孔 各梯度均成功 — HCT116(转染后24h) 25万铺板 约219~236 2.05~2.19 A549 六孔板80% 329.4 2.11 人血白细胞 5mL全血分离 284.7 — 客户反馈摘录：“提的挺好的，速度也快。”——HUVEC用户；“总体来说很方便快速。”——SH-SY5Y用户；“浓度高，纯度好，下游实验溶解曲线正常，重复性也挺好的。”——BV2用户
注：以上为不同客户实验室的回传数据，样本培养条件、细胞状态与洗脱体积存在差异，浓度数值仅供参考。此外，也有客户将本试剂盒探索用于秀丽隐杆线虫、斑马鱼胚胎/幼鱼、蚜虫等微小模式生物样本并获得可用结果。
8分钟操作流程
从细胞收集到RNA洗脱，仅需8分钟。请对照上方操作演示视频（时长1分21秒）与以下关键节点操作：
关键操作节点
裂解：每1×10^6细胞加入裂解液，充分吹打混匀，室温裂解；对于贴壁细胞，可直接在培养板中加入裂解液裂解。
乙醇混合：加入等体积无水乙醇，充分混匀后转入RNA纯化柱。
洗涤：Wash Buffer洗涤后充分甩干，确认乙醇挥发后再进行下一步。
洗脱：Elution Buffer不少于20μL，加在膜中央勿碰侧壁，可重复洗脱一次提高产量。
适用样本与下游应用
适用样本量建议
细胞类型 建议样本量 备注 常规贴壁细胞（HEK293、A549、HepG2等） 1×10^5 ~ 2×10^6 不确定时先试1×10^6 低RNA含量细胞（T/B、NK、PBMC、Th17、Jurkat等） 1×10^6 ~ 3×10^6 建议加大细胞量 珍稀细胞（≤1000个） ≥5万（最低） 低于5万建议用500-103/500-106 贴壁细胞密度建议：12孔板70%以上密度、6孔板40%左右密度效果较好。若6孔板细胞密度≥60%，建议在板中加入1mL Lysis Buffer裂解后，加入等体积无水乙醇，分2个离心柱按说明书操作。
下游实验适配：RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库构建、微阵列分析、RNA-seq。测序公司对溶剂有要求时可将Elution Buffer换成无酶水。客户实测已成功送Azenta、Illumina等平台测序。
珍稀细胞联动：样本量极少的珍稀细胞可选择RNAflash™ DCA 1-step RT qPCR（SYBR Green）kit（500-103）或RNAflash™ DCA 2-step RT qPCR（probe）kit（500-106），最少支持10个细胞直扩，一次实验测完Ct值。
文献引用
GOONIE 400-100已被多篇SCI论文引用，覆盖肿瘤耐药、神经退行性疾病、免疫炎症、心血管代谢、眼科等多个领域。以下为部分代表性文献（按研究领域分组，点击“查看原文”可跳转DOI）：
序号 期刊（IF） 论文信息 原文 肿瘤耐药与机制 [1] JCI
IF 15.9Biallelic GLTP mutations cause nonsyndromic epidermal differentiation disorder via disrupted epidermal glucosylceramide transport
Zhang Z, et al. 2026
RNA送Azenta测序
南方医科大学皮肤病医院查看原文 [2] Adv Sci
IF 14.3m1A-Dependent TRMT6/61A-ARG2 Axis Drives Protumorigenic Senescence
Li T, et al. 2026
中山大学附属第六医院查看原文 [3] J Adv Res
IF 10.6Heme oxygenase 1 (HO-1) is a drug target for reversing cisplatin resistance in non-small cell lung cancer
Mei J, et al. 2026
中南大学湘雅医院查看原文 [4] Cell Death Dis
IF 8.2AURKA suppresses NCOA4-mediated ferritinophagy to enhance sorafenib resistance in hepatocellular carcinoma
Zhu W, et al. 2026
中山大学肿瘤防治中心查看原文 [5] Front Immunol
IF 5.9Identification of plasma inflammatory biomarkers for Alzheimer's disease reveals IFN-γ as a regulator of ACSL1-mediated microglia phenotype
Huang R, et al. 2026
汕头大学医学院第一附属医院；同文引用500-102
汕头大学医学院第一附属医院查看原文 [6] Neoplasia
IF 5.4White-to-brown adipose switching promotes bladder cancer progression
Gao M, et al. 2026
中山大学孙逸仙纪念医院查看原文 [7] ACS Omega
IF 4.3Anti-Inflammatory Diterpenoids from the Aerial Parts of Isodon suzhouensis
Liu WH, et al. 2025
安徽医科大学查看原文 神经退行性疾病与眼科 [8] J Neuroinflammation
IF 8.5Acarbose modulates microglial Pkm2 acetylation to reshape immunometabolism and preserve retinal neurons after ischemia-reperfusion
Wen Y, et al. 2026
中山大学中山眼科中心查看原文 [9] J Transl Med
IF 6.1Retinal ALKBH5 inhibition induces myopia protection through selective regulation of ERK1/2 signaling
Zhu J, et al. 2025
浙江大学医学院附属第一医院查看原文 [10] Adv Healthc Mater
IF 7.0A Modified Polydopamine Nanoparticle Loaded with Melatonin for Synergistic ROS Scavenging and Anti-Inflammatory Effects in the Treatment of Dry Eye Disease
Yang X, et al. 2025
中山大学中山眼科中心查看原文 [11] Int J Gen Med
IF 2.1A Balancing Act in Corneal Epithelial Repair: A MAPK-JUN/EGR1/TFAP2A Network Regulates Ferroptotic Cell Fate
Jiang H, et al. 2026
北京协和整形外科医院
中国医学科学院北京协和医学院查看原文 免疫炎症与感染 [12] Front Immunol
IF 5.9 ×2篇R-loop aberrations in lower-grade gliomas
Huang R, et al. 2026 · DOI
ETV4 in pan-cancer
Huang L, et al. 2025 · DOI
汕头大学医学院第一附属医院 · 中山大学肿瘤防治中心— [13] Front Cell Infect Microbiol
IF 4.6Comprehensive profiling of host- and virus-derived circular RNAs during vesicular stomatitis virus infection
Miao S, et al. 2025
VSV感染Vero细胞模型
广州医科大学附属第五医院查看原文 [14] J Inflamm Res
IF 4.1Inhibition of Airway Epithelial CTSC Attenuates Type 2 Inflammation
Li X, et al. 2026
广东省人民医院查看原文 [15] Mediators Inflamm
IF 4.0Neutrophil-Fibroblast Crosstalk Drives Immunofibrosis in Sequelae of Pelvic Inflammatory Disease
Dang C, et al. 2025
同文引用500-101、100-105
山东中医药大学查看原文 心血管代谢与其他 [16] J Hepatocell Carcinoma
IF 3.4Integrative Analysis of scRNA-Seq and Bulk RNA-Seq Identifies Plasma Cell Related Genes in HCC
Tang M, et al. 2025
南方医科大学珠江医院查看原文 [17] Int J Med Sci
IF 2.7Exploring Renin-angiotensin System Genes as Novel Prognostic Biomarkers for Oral Squamous Cell Carcinoma
Wu Z, et al. 2025
中山大学光华口腔医学院·附属口腔医院查看原文 [18] Transl Oncol
IF 4.0Construction and validation of golgi apparatus-related genes as predictors in colorectal cancer
Chen J, et al. 2026
同文引用500-101+500-102+100-103，GOONIE全家桶
宁波大学附属李惠利医院查看原文 [19] Transl Cancer Res
IF 1.4KCNJ11 as a prognostic and therapeutic target in colon adenocarcinoma
Chen J, et al. 2025
宁波大学附属李惠利医院查看原文 注：IF为JCR约数，上线前以最新JCR核对。更多文献信息欢迎联系技术支持获取。
常见问题 FAQ
Q：是否能提小片段RNA，如miRNA？
A：本试剂盒（400-100）提取大于200nt的总RNA，不包含miRNA等200nt以下的小片段RNA。若需提取miRNA等小片段RNA，建议选用miRNA专用提取试剂盒，可针对性回收200nt以下的小片段RNA。
Q：提取后的总RNA是否可以用于测序分析？
A：是。已有多篇客户文献使用本产品RNA送测序（含Azenta、Illumina等平台），测序公司对溶剂有要求时可将Elution Buffer换成无酶水。
Q：提取的RNA可以用于哪些下游实验？
A：RT-PCR、RT-qPCR、Northern杂交、cDNA文库构建和微阵列分析等。
Q：试剂盒保质期有多久？
A：两年（出厂质检 品质保障）。
Q：是否可以用于提取少量样本的RNA？
A：建议样本量不少于5万个细胞。对于T/B、NK、PBMC、Th17等低RNA含量细胞，建议1×10^6~3×10^6细胞量；细胞量过少时优先选择qPCR等灵敏度高的下游方法。
Q：提取的RNA用于测序，Elution Buffer需不需要换成无酶水？
A：视测序公司要求。若测序公司对溶剂有要求，可换无酶水。
Q：逆转录前是否需要gDNA去除？
A：一般来说没有大量gDNA污染。但逆转录前均建议采用DNA酶处理以保证RNA纯净（推荐使用逆转录试剂盒500-101含gDNA去除酶）。
Q：提取的RNA浓度很低，可能是什么原因？
A：主要原因：①细胞量不足（96孔板、25万以下细胞量建议换用更大孔板或合并样本）；②低RNA含量细胞用量不够（T/B、NK、PBMC、Th17等免疫细胞建议1×10^6~3×10^6）；③细胞量过多导致裂解不充分（单柱建议1~2百万细胞）；④洗脱不充分（洗脱液不少于20μL、加在膜中央勿碰侧壁，可重复洗脱一次）。④裂解后忘记加入无水乙醇混匀再上柱，或Wash buffer内没有加入无水乙醇就使用。
Q：A260/230偏低或纯度不理想怎么办？
A：Wash Buffer首次使用前请确认已加入45mL无水乙醇（建议使用新鲜无水乙醇）；洗涤后充分甩干并适当晾干，确认乙醇挥发后再洗脱。贴壁过紧、黏连过紧的细胞建议胰酶消化充分、吹打均匀后再裂解。
Q：转染后或药物处理后的细胞能提取吗？
A：可以。客户实测：25万铺板转染24小时后收样，RNA浓度约220ng/μL以上、A260/280为2.05~2.19；部分药物梯度实验中处理组浓度与NC组相比有浮动属正常。病毒转染后建议适当增加收样细胞量。
Q：RNA浓度不高，下游实验还能做吗？
A：可以优先选择灵敏度高的下游方法。客户反馈：淋巴细胞浓度虽不理想，RT-qPCR扩增曲线正常；约10万细胞样本电泳条带偏弱，qPCR Ct值可用。RNA浓度低于50ng/μL时260/230比值参考意义有限，以下游Ct值为准。
Q：珍稀细胞样本量少，怎么提取RNA？
A：可选择RNAflash™ DCA 1-step RT qPCR（SYBR Green）kit（500-103）、RNAflash™ DCA 2-step RT qPCR（probe）kit（500-106），1次实验测完Ct值，最少支持10个细胞。
技术支持
如有产品使用、样本适用性或数据问题，欢迎联系信天翁生物技术团队获取支持。
联系渠道 信息 咨询热线 400-090-1923 官方邮箱 service@gooniebio.com 官网 www.gooniebio.cn 地址 广州市黄埔区瑞和路39号纳金科技园 相关产品
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产品组成
产品编号 组分 （100 次） 400-100A Lysis Buffer 50 ml 400-100B Wash Buffer 15 ml 400-100C Elution Buffer 20 ml 400-100D RNA 纯化柱（带收集管） 100 套 注：第一次使用前，必须向 Wash Buffer 中加入 45 ml 无水乙醇
-
注意事项
1 、提取过程在室温进行，按推荐使用合适的样本量，以避免产生不溶物堵塞离心柱。对于贴壁细胞样品，通常十二孔板 70%以上密度、六孔板 40%左右密度能获得较好的提取结果。若六孔板细胞密度在 60%以上，建议加入在板中 1 ml 的 Lysis buffer 裂解，然后加入等体积无水乙醇，转入 2 个离心柱然后按说明书步骤进行操作。
2 、试剂盒开封后，每次使用应严格按照规范操作，谨防 RNase 污染，Elution 需分装成小份保存。
3 、Wash Buffer 首次使用前需加入 45 ml 无水乙醇。
4 、为充分溶解 RNA，洗脱液的体积最好不低于 20 μl。重复洗脱可提高 RNA 产量。洗脱液需加至
RNA 纯化柱中央的膜上，不可加至侧壁。
5 、为保证提取质量，建议全程使用无 RNA 酶的试剂耗材，尤其是 RNA 洗脱步骤。
关键词
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