RecomAb™ anti-CD45 mAb [Clone HI30]
应用:
WB, IHC-P, IHC-Fr, ICC/IF, FC
种属反应性:
Human, Mouse
宿主种属:
Mouse
一键复制信息
- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
-
TL;DR:RecomAb™ anti-CD45 mAb [Clone HI30](货号 NM0014)是NeoMab重组单克隆抗体,小鼠源 IgG1 kappa,特异性识别CD45(LCA/PTPRC)。CD45表达于几乎所有白细胞表面,约占淋巴细胞表面蛋白的10%,是流式细胞术圈定白细胞总群的首选标志物。本品反应种属为人、小鼠,验证应用包括Western Blot(1:1000)、IHC-P(1:100)、IHC-Fr(1:100)、ICC/IF(依实验而定)和流式细胞术(0.25 μg/test)。
产品规格总表
参数 规格 产品全称 RecomAb™ anti-CD45 mAb [Clone HI30] 货号 NM0014 规格 50 μL / 100 μL 克隆 / 单抗类型 HI30,单克隆抗体(monoclonal) 宿主 / 亚型 小鼠(Mouse)IgG1, kappa 反应种属 人(Human)、小鼠(Mouse) 靶标 CD45(LCA/PTPRC),几乎所有白细胞表面跨膜糖蛋白 别名 LCA(白细胞共同抗原)、PTPRC、IMD105、B220 SwissProt P08575 偶联物 未偶联(Unconjugated) 验证应用 Western Blot(WB)、IHC-P(石蜡切片)、IHC-Fr(冰冻切片)、ICC/IF(免疫荧光)、流式细胞术(FC) 浓度 批次依赖(lot-dependent),详见批次COA 剂型 / 配方 液体;PBS(pH 7.2)、50%甘油、0.03% Proclin300 运输 / 保存 2-8℃运输;短期2-8℃保存,长期-20℃保存,避免反复冻融 推荐应用与稀释度
应用 推荐用量 说明 流式细胞术(FC) 0.25 μg/test 白细胞圈门、淋巴细胞亚群鉴定 Western Blot(WB) 1:1000 CD45蛋白检测 IHC-P(石蜡切片) 1:100 组织切片白细胞鉴定 IHC-Fr(冰冻切片) 1:100 冰冻组织切片染色 ICC/IF(免疫荧光) 依实验体系而定 Assay dependent,建议预实验滴定 注:本品为小鼠源IgG1 kappa,流式、IHC、ICC/IF所用二抗请选择抗小鼠IgG1(或抗小鼠IgG κ链)的二抗。
靶标背景:CD45——白细胞共同抗原与淋巴细胞活化调节器
CD45(Leukocyte Common Antigen, LCA)是一种跨膜糖蛋白,在固有免疫与适应性免疫中扮演关键角色:
泛白细胞标志物
CD45表达于几乎所有白细胞(造血细胞)表面,约占淋巴细胞表面蛋白的10%。红细胞和血小板不表达CD45。这使得CD45成为流式细胞术中圈定白细胞总群、排除非造血细胞的首选标志物。
淋巴细胞活化的关键调节器
CD45具有蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)活性,通过激活Src家族激酶(如Lck和Fyn)启动T细胞和B细胞受体信号传导通路。CD45的磷酸酶活性对淋巴细胞的正常发育、活化和功能至关重要。
多种剪接变体
CD45存在多种剪接变体,其中CD45RA主要表达于初始T细胞和B细胞,CD45RO主要表达于记忆T细胞。HI30克隆识别CD45的胞外区共同表位,不区分RA/RO亚型,因此可标记所有表达CD45的白细胞。
克隆信息:HI30——跨物种识别的经典克隆
NM0014采用 HI30 克隆,为小鼠源单克隆抗体,亚型 IgG1, kappa。该克隆有以下特点:
· 泛白细胞标记:识别所有表达CD45的白细胞,包括T细胞、B细胞、NK细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞等,是免疫细胞圈门的首选标志。
· 多应用验证:已验证Western Blot、IHC-P、IHC-Fr、ICC/IF和流式细胞术(FC),覆盖蛋白水平检测、组织定位与细胞表型分析。
HI30适用于人/小鼠外周血、脾脏、淋巴结、骨髓等样本的白细胞鉴定、淋巴细胞亚群分析、免疫组化染色及CD45蛋白的Western Blot检测。
种属交叉反应
种属 反应性 备注 人 Human 已验证 CD45 P08575 小鼠 Mouse 可反应 跨物种交叉反应 大鼠 / 其他 未验证 说明书未标注 相关产品
- RecomAb™ anti-CD3 mAb(NM0019) — T细胞标志物,CD45圈门后细分T细胞亚群
- RecomAb™ anti-CD19 mAb(NM0007) — B细胞标志物,B细胞亚群鉴定
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常见问题 FAQ
Q:CD45是什么?在哪些细胞上表达?
A:CD45又称白细胞共同抗原(Leukocyte Common Antigen, LCA),是一种跨膜糖蛋白,表达于几乎所有白细胞(造血细胞)表面,约占淋巴细胞表面蛋白的10%。红细胞和血小板不表达CD45。它是免疫细胞圈门(gating)的首选标志物,用于在流式细胞术中区分白细胞与非白细胞。
Q:CD45在免疫细胞鉴定中有什么作用?
A:CD45是泛白细胞标志物,在流式细胞术多色panel中常用于圈定CD45白细胞总群,再在此基础上进一步细分T细胞(CD3⁺)、B细胞(CD19⁺)、NK细胞(CD3⁻CD56⁺)、单核/巨噬细胞(CD14⁺CD11b⁺)等亚群。CD45也是免疫组化中鉴定淋巴造血组织来源肿瘤的重要标志。
Q:NM0014做流式细胞术怎么用?
A:流式细胞术(FC)已验证,推荐用量0.25 μg/test。CD45常用于流式多色panel的初始圈门:先圈CD45⁺细胞排除死细胞、碎片和红细胞,再在CD45⁺群内按CD3、CD19、CD56等标志细分淋巴细胞亚群。本品为小鼠源IgG1 kappa,二抗请选择抗小鼠IgG1(或相应标记)二抗。
Q:WB和IHC的推荐稀释度是多少?
A:说明书给出的推荐稀释度:Western Blot 1:1000,IHC-P(石蜡切片)1:100,IHC-Fr(冰冻切片)1:100。ICC/IF(免疫荧光)标注为依实验体系而定(Assay dependent),建议通过预实验做浓度梯度滴定确定适宜工作条件。
Q:CD45和CD45RO、CD45RA有什么区别?
A:CD45有多种剪接变体:CD45RA主要表达于初始T细胞和B细胞,CD45RO主要表达于记忆T细胞,而CD45(LCA)是所有CD45变体的共同胞外区表位。HI30克隆识别CD45的胞外区,不区分RA/RO亚型,因此可标记所有表达CD45的白细胞。如需区分初始/记忆T细胞,需另选抗CD45RA或抗CD45RO抗体。
Q:NM0014如何保存?可以反复冻融吗?
A:短期2-8℃保存,长期-20℃保存;请避免反复冻融,建议分装后冻存。抗体为液体剂型,配方为PBS(pH 7.2)、50%甘油、0.03% Proclin300,2-8℃运输。
总结:NM0014(RecomAb™ anti-CD45 mAb [Clone HI30])是小鼠源IgG1 kappa重组单抗,特异性识别人/小鼠CD45(LCA/PTPRC),为泛白细胞标志物与淋巴细胞活化调节器,验证WB(1:1000)、IHC-P/Fr(1:100)、ICC/IF、FC(0.25 μg/test),适用于免疫细胞圈门、淋巴细胞亚群鉴定与跨物种实验。
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