RecomAb™ anti-Mouse CD8a mAb [Clone 53-6.7]
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TL;DR：NeoMab NM0015 RecomAb™ anti-Mouse CD8a mAb（53-6.7 克隆），靶向小鼠 CD8α 分子——免疫球蛋白超家族 I 型跨膜糖蛋白，MHC I 类分子共受体，在胸腺细胞发育和成熟 T 细胞活化中发挥关键作用。该抗体为 Rat IgG2a,κ 亚型重组单克隆抗体，未偶联，已验证 WB、IHC-P、IHC-Fr、ICC/IF、FC 5 种应用。IHC-P/IHC-Fr/ICC/IF 推荐稀释度均为 1:100，WB 1:1,000，FC 0.25 μg/test。适用于小鼠 CD8+ T 细胞鉴定、肿瘤免疫学研究、免疫治疗疗效评估、胸腺细胞发育分析等。
应用领域：小鼠 CD8+ T 细胞免疫表型分析、肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）表型鉴定、抗病毒免疫应答研究、胸腺 T 细胞发育分析、移植免疫排斥监测、自身免疫病模型免疫监测。
一、产品规格总表
参数 详情 产品名称 RecomAb™ anti-Mouse CD8a mAb [Clone 53-6.7] 货号 NM0015 克隆号 53-6.7 宿主 / 亚型 Rat IgG2a, kappa 偶联物 Unconjugated（未偶联） 种属反应性 Mouse（小鼠）Human（人） 验证应用 WB, IHC-P, IHC-Fr, ICC/IF, FC 抗体浓度 Lot-dependent（批次依赖） 产品形态 Liquid（液体） 产品配方 PBS (pH 7.2), 50% Glycerol, 0.03% Proclin 300 保存条件 2-8℃ 短期；-20℃ 长期；避免反复冻融 运输条件 2-8℃ 冰袋运输 规格 50 μL, 100 μL
二、靶标背景 · CD8α
CD8α 是免疫球蛋白超家族（IgSF）成员的 I 型跨膜糖蛋白，在小鼠免疫系统中发挥核心调控作用。CD8 以两种二硫键连接的形式存在：CD8αα 同二聚体和 CD8αβ 异二聚体（β 链为 CD8b），广泛表达于 T 细胞亚群、NK 细胞、单核细胞和树突状细胞表面。
作为 MHC I 类分子的共受体（co-receptor），CD8 在胸腺细胞发育和成熟 T 细胞活化中发挥关键作用。CD8α 胞外结构域特异性结合 MHC I 类分子的非多态性 α3 结构域，协助 TCR 识别抗原肽-MHC I 复合物。胞内段与 Src 家族蛋白酪氨酸激酶 p56lck 物理结合，参与 TCR 信号转导的早期激活事件，对 T 细胞的选择、活化和功能调控至关重要。
表达分布：CD8α 主要表达于细胞毒性 T 淋巴细胞（CTL）、部分 γδ T 细胞、NK 细胞亚群，以及大部分胸腺细胞（含 CD4⁺CD8⁺ 双阳性细胞）。在外周免疫器官中，小鼠脾脏 CD8⁺ T 细胞约占 T 细胞总数的 25-35%。
蛋白信息：
· 分子量：~32-34 kDa（糖基化形式）
· UniProt：P01731（Cd8a）
· Alternate Names：Cd8a, Ly-2, Ly-3, Ly-35, Lyt-2, Lyt-3
· Gene ID：12522（Mouse）
· 分布：细胞毒性 T 细胞（CTL）、部分 γδ T 细胞、NK 细胞亚群、胸腺细胞（含 DP 双阳性）
三、克隆号信息 · 53-6.7
53-6.7 是抗小鼠 CD8α 的经典大鼠单克隆抗体克隆，在小鼠免疫学研究中应用超过 30 年，文献引用极为丰富。该克隆特异性识别小鼠 CD8α 分子，不与 CD8β 或其他表面分子交叉反应，是鉴定小鼠 CD8⁺ T 细胞的金标准工具抗体之一。
53-6.7 克隆的核心优势：
· 经典克隆：文献引用丰富，实验方案成熟，数据可比性强；
· 高特异性：仅识别小鼠 CD8α，不交叉反应人/大鼠等其他物种 CD8；
· 多应用覆盖：同一克隆验证 WB、IHC-P、IHC-Fr、ICC/IF、FC 5 种应用，从蛋白定量到组织定位到流式分析全覆盖；
· Rat IgG2a,κ 亚型：Fc 段可结合小鼠 FcγR，适用于某些需要 Fc 介导功能的应用（如 depletion in vivo）与流式抗体 11-1008A 的区别：11-1008A（OKT8 克隆）靶向人 CD8α，仅验证 Flow 应用；NM0015（53-6.7 克隆）靶向小鼠 CD8α，验证 5 种应用，适用范围更广。两者不可混用——种属靶标完全不同。
四、应用稀释与 Protocol 指南
应用 推荐稀释度 / 用量 Western Blot 1:1,000 IHC-P（石蜡切片） 1:100 IHC-Fr（冰冻切片） 1:100 ICC/IF（免疫荧光） 1:100 Flow Cytometry 0.25 μg/test
五、对照设置指南
对照类型 用途与说明 空白对照（未染色） 评估背景信号/自发荧光，用于 WB 基线判断和 FC PMT 电压调节 同型对照 Rat IgG2a, kappa 未偶联同型抗体，消除 Fc 段非特异性结合。IHC/ICC 和 FC 均推荐设置 阳性对照样本 小鼠脾脏组织/细胞（CD8⁺ T 细胞阳性），确认抗体工作正常 阴性对照样本 CD8 敲除（Cd8a⁻/⁻）小鼠脾脏/组织，确认染色特异性。CD8α 不表达的细胞系亦可 FMO 对照（FC） 多色 Panel 中去除 CD8 荧光通道，用于准确设门，特别是 CD4/CD8 连续分布群体
六、质量数据与参考文献
每批产品均经过严格质控，包括 SDS-PAGE 纯度检测、BCA 法定量、以及功能性验证（WB/FC），确保批间一致性。
参考文献：
1. Sarmiento M, et al. J Exp Med. 1980;152(6):1668-1680.（53-6.7 克隆鉴定小鼠 CD8⁺ T 细胞）
2. Ledbetter JA, et al. J Exp Med. 1980;151(2):222-234.（Ly-2/CD8 分子功能表征）
3. Zamoyska R. Immunity. 2010;32(3):298-300.（CD8 在 TCR 信号中的功能）
4. Macdonald HR, et al. Nature. 1988;336(6198):471-473.（CD8 在胸腺选择中的作用）
5. Greenberg SA, et al. J Immunol. 1990;144(9):3311-3317.（CD8αα 同二聚体功能研究）七、相关产品
NeoMab 流式抗体系列（小鼠免疫标志物）：
· 11-2004-12 FITC Mouse Anti-Mouse CD4 (GK1.5) — CD4⁺ T 细胞标记
· 11-2019-12 FITC Mouse Anti-Mouse CD19 (6D5) — B 细胞标记
· 11-27001-12 FITC Rat Anti-Mouse F4/80 (A3-1) — 巨噬细胞标记
NeoMab RecomAb 系列：
· NM0003 RecomAb™ anti-GAPDH mAb [MGP-01] — 7 种属内参抗体
· NM0006 RecomAb™ anti-Mouse F4/80 mAb [CI:A3-1] — 小鼠巨噬细胞标志物
· NM0001 RecomAb™ anti-GFP mAb [RGF-01] — GFP 融合蛋白检测
FiniGet 分选试剂盒（配套使用）：
· 130-6003 小鼠 CD8⁺ T 细胞分选试剂盒 — 从脾脏中磁珠分选 CD8⁺ T 细胞
· 140-2001 细胞分选缓冲液 — 配套分选缓冲液
八、常见问题 · FAQ
Q: NM0015 可以用于流式直标吗？
A: NM0015 为 Unconjugated（未偶联）抗体，不能直接用于流式检测。需搭配荧光标记的 anti-Rat IgG 二抗使用。如需直标抗体进行流式检测，建议选择 NeoMab 11 系列流式抗体（如 FITC/PE/APC-anti-Mouse CD8a），这些产品已完成荧光偶联，可直接染色。
Q: NM0015 用于 WB 时，二抗该选什么？
A: NM0015 宿主为 Rat，必须选择 HRP 标记的 anti-Rat IgG 二抗。请勿使用 anti-Mouse IgG 二抗——宿主不对，无法识别一抗。同理，IHC/ICC 检测也需使用 anti-Rat 二抗。
Q: IHC 实验中，Rat IgG2a 用于小鼠组织会有 Fc 背景吗？
A: 有可能。Rat IgG2a 的 Fc 段可结合小鼠某些细胞（如巨噬细胞、B 细胞）上的 FcγR，导致非特异性背景染色。建议：① 使用 Fc 受体封闭剂预处理切片；② 使用 F(ab')₂ 片段二抗替代完整 IgG 二抗；③ 设置同型对照（Rat IgG2a 未偶联）评估背景水平。
Q: 小鼠脾脏中 CD8⁺ T 细胞的正常比例是多少？
A: 健康 C57BL/6 小鼠脾脏中，CD8⁺ T 细胞约占 T 细胞总数的 25-35%（CD3⁺ 细胞中），CD4⁺ T 细胞占 55-65%，CD4/CD8 比值约 1.5-2.5。胸腺中 CD8⁺ 细胞比例更高（含大量 DP 双阳性细胞）。不同品系（BALB/c vs C57BL/6）和年龄会影响具体比例。
Q: 50% Glycerol 配方，-20℃ 不会冻住吗？
A: 不会。50% 甘油水溶液的凝固点远低于 -20℃，在该温度下仍保持液态。这是重组抗体的常见配方策略，避免反复冻融导致的蛋白降解和聚集。取用时因黏稠度较高，建议缓慢吸取，取后立即盖紧放回 -20℃。
九、技术支持
NeoMab 隶属信天翁生物科技（广州）有限公司，专注于重组单克隆抗体和免疫学试剂研发。
· 客服电话：400-090-1923
· 技术支持邮箱：service@gooniebio.com
· 公司官网：www.gooniebio.com
· 地址：广州市黄埔区瑞和路39号纳金科技园
页面总结：NeoMab NM0015 RecomAb™ anti-Mouse CD8a mAb（53-6.7 克隆），靶向小鼠 CD8α 分子（~32-34 kDa I 型跨膜糖蛋白，MHC I 类分子共受体），Rat IgG2a,κ 亚型重组单抗，未偶联，验证 WB、IHC-P、IHC-Fr、ICC/IF、FC 5 种应用，IHC/ICC 稀释度 1:100，WB 1:1,000，FC 0.25 μg/test，2-8℃ 短期 / -20℃ 长期保存（50% Glycerol 液态），广泛用于小鼠 CD8⁺ T 细胞免疫表型分析、肿瘤浸润淋巴细胞鉴定、胸腺细胞发育分析、抗病毒免疫应答研究等小鼠免疫学领域。
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