RecomAb™ anti-DYKDDDDK tag mAb [Clone MFG-01]

应用： WB, IHC-P, ICC/IF, IP

种属反应性： DYKDDDDK tag / flag tag

宿主种属： Rabbit

产品名称：RecomAb™ anti-DYKDDDDK tag mAb [Clone MFG-01] 货号：NM0008 规格：100μL 应用：WB, IHC-P, ICC/IF, IP 种属反应性：DYKDDDDK tag 宿主种属：Mouse 目录价：¥1,142.00 品牌：NeoMab® 厂家：信天翁生物科技（广州）有限公司官网产品链接：www.gooniebio.cn/products/neomab/anti-flag-recombinant-mab-nm0008.html

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NM0008

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产品描述
组成成分
注意事项

TL;DR：RecomAb™ anti-DYKDDDDK tag mAb [Clone MFG-01]（货号 NM0008）是小鼠源IgG1单克隆抗体，特异性识别Flag标签（DYKDDDDK序列）。Flag标签是一种短而高亲水性、高电荷的肽段标签，因其体积小、电荷丰富，倾向于位于融合蛋白表面，便于抗体识别且不影响靶蛋白天然活性；同时该序列在大多数生物体内不存在，背景信号低、检测干净。验证应用覆盖WB（1:2,000）、IHC-P（1:500）、ICC/IF（1:500–1:2,000）及IP（1:50）。

一、产品规格总表

参数	规格
产品全称	RecomAb™ anti-DYKDDDDK tag mAb [Clone MFG-01]
货号	NM0008
规格	50 μL / 100 μL
宿主/亚型	Mouse IgG1
克隆号	MFG-01
反应性	外源性表达的Flag（DYKDDDDK）标签融合蛋白
标签序列	DYKDDDDK（Flag tag, 8 aa）
偶联物	未偶联（Unconjugated）
验证应用	WB, IHC-P, ICC/IF, IP
WB推荐稀释度	1:2,000
IHC-P稀释度	1:500
ICC/IF稀释度	1:500 – 1:2,000
IP稀释度	1:50
浓度	1 mg/mL
配方	PBS (pH 7.2), 50%甘油, 0.03% Proclin300
运输条件	2–8℃
储存条件	-20℃保存，避免反复冻融

二、靶标背景：Flag标签——高亲水、低背景的通用表位标签

Flag标签是一种由8个氨基酸组成的短肽序列（DYKDDDDK），广泛用作分子生物学和蛋白质工程中的表位标签。Flag标签具有以下显著特征：

✅ 高亲水性与高电荷：序列中含4个天冬氨酸（D）和1个赖氨酸（K），使该标签呈强极性。这种特性使其倾向于位于融合蛋白表面，而非被包埋在蛋白质疏水核心内，便于抗体从外部识别结合
✅ 极小体积不影响靶蛋白功能：仅8 aa的标签体积极小，几乎不会影响融合蛋白的天然构象、生物活性、亚细胞定位或蛋白-蛋白相互作用
✅ 低背景信号：Flag标签序列在大多数生物体的内源蛋白中不存在，免疫检测时背景干净、信号特异，假阳性率低
✅ 多功能性：可融合于靶蛋白N端或C端，广泛兼容WB、IP、IF、IHC-P等实验平台

自1988年由Kraft等人首次报道以来，Flag标签已成为与HA、Myc、V5并列的四大经典表位标签之一，是重组蛋白表达、蛋白功能研究、蛋白互作（co-IP）及蛋白定位研究中的标配工具。

三、克隆信息：MFG-01——鼠源单抗的稳定性与性价比

NM0008采用MFG-01克隆，来源于小鼠单克隆抗体（Mouse IgG1亚型）。小鼠单抗是免疫学研究的传统主力，具有以下优势：

✅ 序列明确、批次稳定：重组表达平台保证了抗体基因序列的精确性和批次间一致性
✅ 特异性优异：MFG-01对Flag标签序列（DYKDDDDK）高度特异，与HA、Myc、V5、His等其他标签无交叉反应
✅ 亚型IgG1优势：Mouse IgG1亚型在常规检测中非特异结合低，背景清晰，适合多种二抗系统配对
✅ IP兼容性好：IP推荐稀释度1:50，可有效富集Flag标签融合蛋白用于下游质谱或互作蛋白筛选

MFG-01克隆特异性识别Flag标签，适用于重组Flag融合蛋白表达验证、纯化产物鉴定、蛋白定位及互作研究。

四、种属交叉反应

适用范围	反应性	备注
Flag标签融合蛋白	✅ Verified	所有外源性表达的Flag标签蛋白均可检测，不受种属限制
内源蛋白	❌ 不适用	Flag标签为人工合成序列，哺乳动物内源蛋白不含此表位

注：NM0008识别的是Flag标签表位（DYKDDDDK）本身，而非特定种属的蛋白。只要目标蛋白通过基因工程融合了Flag标签序列，无论其来源于人、小鼠、大鼠或其他种属，均可被NM0008检测。该抗体不识别内源性非标签蛋白。

五、相关产品

NM0007 · RecomAb™ anti-HA tag mAb——HA表位标签检测（与Flag标签配套用于双标签系统）
NM0001 · RecomAb™ anti-GFP mAb——GFP荧光蛋白标签检测
NM0010 · RecomAb™ anti-V5 tag mAb——V5表位标签检测
400-201 · GOONIE 去内毒素质粒小提试剂盒——Flag标签表达载体构建与质粒提取配套

六、常见问题 FAQ

Q1：NM0008能检测带Flag标签的重组蛋白吗？人源蛋白也可以吗？
A：可以。NM0008识别的是Flag标签序列（DYKDDDDK），而非特定种属的蛋白。无论Flag标签融合表达于人、小鼠、大鼠或其他种属的蛋白，均可被检测。只要目标蛋白通过基因工程引入了Flag标签序列，NM0008均可特异性识别。

Q2：Flag标签和HA标签、Myc标签有什么区别？
A：三者都是常用的短肽表位标签。Flag标签8 aa（DYKDDDDK），高亲水性、高电荷，倾向位于蛋白表面；HA标签9 aa（YPYDVPDYA），源自流感血凝素；Myc标签10 aa（EQKLISEEDL），源自人c-Myc蛋白。三者均不影响靶蛋白功能，选择主要取决于实验体系和个人偏好。多标签组合可实现同一蛋白的多位点检测或co-IP验证。

Q3：ICC/IF稀释度为什么是1:500–1:2,000这么宽？
A：该范围反映了不同样本中Flag标签融合蛋白的表达水平和亚细胞定位差异。高表达且位于胞质/核内的Flag蛋白可用1:2,000；低表达或膜蛋白可用1:500。建议首次使用时设置滴定梯度（如1:500/1:1,000/1:2,000），根据信号强度和背景确定最佳稀释度。

Q4：NM0008可以用于co-IP实验吗？
A：NM0008已验证IP应用，推荐稀释度1:50。该抗体可有效富集Flag标签融合蛋白，适用于蛋白-蛋白相互作用研究、互作蛋白筛选及下游质谱分析。但是具体的蛋白结合位点有差异，需要实验确认，蛋白互作结合有可能会遮挡抗体结合位点。建议搭配抗Flag磁珠或蛋白A/G磁珠使用，并设置同型对照（Mouse IgG1）排除非特异结合。

Q5：Flag标签融合蛋白会被标签影响功能吗？
A：Flag标签极小（仅8 aa）且高亲水，通常不会影响融合蛋白的天然构象和功能。建议将Flag标签融合于靶蛋白的N端或C端，并通过功能实验验证标签融合后靶蛋白活性未受损。如出现功能异常，可尝试将标签转移到另一端。

Q6：储存条件为什么是-20℃而不是2–8℃？
A：NM0008含50%甘油，在-20℃下仍保持液态，避免冻结-融化造成的抗体变性。-20℃可更长期稳定保持抗体活性，减少反复取用带来的降解风险。短期使用（如1个月内）可置于2–8℃，但长期保存建议-20℃。

八、技术支持

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NM0008（RecomAb™ anti-DYKDDDDK tag mAb [Clone MFG-01]）是小鼠源IgG1单克隆抗体，特异性识别Flag标签（DYKDDDDK, 8 aa）融合蛋白。验证4种应用：WB 1:2,000、IHC-P 1:500、ICC/IF 1:500–1:2,000、IP 1:50。Flag标签高亲水、低背景、体积极小，是分子生物学四大经典表位标签之一。配套NM0007（anti-HA）、NM0001（anti-GFP）、NM0010（anti-V5）可构建多标签检测体系。