RecomAb™ anti-GFP mAb [Clone RGF-01]
应用：
WB, IHC-P, ICC/IF, FC
种属反应性：
GFP
宿主种属：
Rabbit
一键复制信息
- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
-
TL;DR：RecomAb™ anti-GFP mAb [Clone RGF-01]（货号 NM0001）是兔源IgG单克隆抗体，特异性识别绿色荧光蛋白（GFP，27 kDa），适用于GFP标签融合蛋白的免疫检测。GFP源自维多利亚多管发光水母（Aequorea victoria），其发色团由Ser65-Tyr66-Gly67自催化形成，无需外源底物即可在~508 nm发射绿色荧光。NM0001验证应用覆盖WB（1:10,000–1:50,000）、IHC-P（1:100–1:250）、ICC/IF（1:500）及流式细胞术（1:50），预计与RFP、BFP无交叉反应或交叉反应有限。
一、产品规格总表
参数 规格 产品全称 RecomAb™ anti-GFP mAb [Clone RGF-01] 货号 NM0001 规格 50 μL / 100 μL 宿主/亚型 Rabbit IgG 克隆号 RGF-01 反应性 GFP；预计与RFP、BFP无交叉反应或交叉反应有限 偶联物 未偶联（Unconjugated） 验证应用 WB, IHC-P, ICC/IF, FC WB推荐稀释度 1:10,000 – 1:50,000 IHC-P稀释度 1:100 – 1:250 ICC/IF稀释度 1:500 流式细胞术稀释度 1:50 浓度 0.25 mg/mL 配方 59% PBS (pH 7.2), 40%甘油, 0.05% BSA, 0.03% Proclin300 运输条件 2–8℃ 储存条件 短期2–8℃；长期-20℃，避免反复冻融 SwissProt P42212
二、靶标背景：GFP——点亮生命科学的绿色荧光
绿色荧光蛋白（Green Fluorescent Protein, GFP）最初在维多利亚多管发光水母（Aequorea victoria）中被发现，是一种27 kDa的单体蛋白。GFP最独特的性质在于其自发荧光能力——无需酶促反应、外源底物或辅因子，仅靠自身氨基酸序列Ser65–Tyr66–Gly67自发形成发色团，即可在紫外至蓝光激发下（主峰~395 nm）发射明亮的绿色荧光（最大发射~508 nm）。
自1990年代被成功克隆并在异源系统中表达以来，GFP彻底改变了细胞生物学和分子生物学研究。作为荧光标签，GFP使研究者能够在活细胞和活体生物中实时可视化、追踪和定量融合蛋白的亚细胞定位、动态运输和表达水平，极大地推动了蛋白功能研究、基因表达调控、细胞谱系追踪和药物筛选等领域的发展。GFP的发现和应用于2008年被授予诺贝尔化学奖。
GFP的核心优势：
✅ 自发荧光，无需底物或辅因子，检测简便
✅ 对细胞毒性低，可用于活细胞实时成像
✅ 发色团自催化形成，仅需分子氧参与
✅ 融合表达不影响多数靶蛋白的功能与定位
✅ 已衍生出EBFP、ECFP、EYFP、mCherry等多色荧光蛋白家族，支持多色标记
三、克隆信息：RGF-01——兔源单抗的高灵敏度优势
NM0001采用RGF-01克隆，来源于兔单克隆抗体技术平台。与传统小鼠单克隆抗体相比，兔单克隆抗体具有以下技术优势：
✅ 更高的亲和力：兔免疫系统可产生亲和力更强的抗体，在WB应用中RGF-01的推荐稀释度高达1:10,000–1:50,000，远超常规小鼠抗体，灵敏度突出
✅ 更广泛的表位识别：兔抗体库可识别小鼠免疫系统无法产生免疫应答的表位
✅ 更低的背景：兔单抗在IHC和IF应用中非特异染色更少，信噪比更高
✅ 特异性优异：RGF-01特异性识别GFP，预计与RFP、BFP等其他荧光蛋白无交叉反应或交叉反应有限RGF-01克隆在WB中超高的稀释倍数（1:10,000–1:50,000）意味着每支50 μL抗体（0.25 mg/mL，含12.5 μg抗体）可完成大量样品检测，具有优异的经济性和实验重复性。
四、种属交叉反应
靶标 反应性 备注 GFP（绿色荧光蛋白） ✅ Verified 识别Aequorea victoria来源GFP及其融合蛋白 RFP（红色荧光蛋白） ⚠️ 预计无/有限交叉 说明书预计无交叉反应或交叉反应有限，建议实验验证 BFP（蓝色荧光蛋白） ⚠️ 预计无/有限交叉 说明书预计无交叉反应或交叉反应有限，建议实验验证 内源蛋白 ❌ 不适用 GFP为水母来源蛋白，哺乳动物内源蛋白不含此蛋白 注：NM0001识别的是GFP蛋白本身，不受融合伴侣蛋白种属限制。无论GFP融合表达于人、小鼠、大鼠或其他种属的蛋白，均可被检测。该抗体不识别哺乳动物内源性非GFP蛋白。
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六、常见问题 FAQ
Q1：NM0001能检测EGFP等GFP变体吗？
A：可以。NM0001识别GFP蛋白，EGFP（增强型GFP，F64L/S65T突变）是最常用的GFP变体，其蛋白骨架和核心表位未发生根本改变，通常可被抗GFP抗体识别。其他变体如EYFP、ECFP等因发色团区域突变可能影响识别，建议预实验验证。Q2：NM0001能检测RFP或mCherry吗？
A：说明书预计NM0001与RFP无交叉反应或交叉反应有限。RFP（DsRed来源）与GFP的氨基酸序列和蛋白结构差异较大，一般不被抗GFP抗体识别。如需检测RFP标签蛋白，请选择专门的抗RFP抗体。Q3：WB稀释度1:10,000–1:50,000范围很大，怎么选？
A：该范围反映了RGF-01克隆的高亲和力。建议首次使用从1:10,000开始，根据GFP融合蛋白的表达水平调整：高表达样品可用1:50,000，低表达样品用1:10,000或更低。高稀释度的优势是背景极低、抗体消耗少。Q4：NM0001可以用于活细胞流式分选吗？
A：NM0001验证的是流式细胞术（FC），但该抗体为未偶联抗体且识别的是GFP蛋白。GFP本身即具有自发荧光特性，若仅需检测GFP阳性细胞，可直接检测GFP荧光通道（FITC/GFP通道），无需抗体染色。若需在固定破膜后检测GFP（如GFP荧光因固定淬灭时），可使用NM0001进行间接免疫荧光染色。Q5：ICC/IF实验中，GFP本身有荧光，还需要抗体染色吗？
A：取决于实验需求。GFP自发荧光可直接用于活细胞成像；但在固定后样品、GFP表达量低、或需要信号放大的场景下，使用NM0001进行免疫荧光染色可显著增强信号并提高信噪比。此外，抗体染色不受GFP发色团成熟度影响，适用于GFP折叠不充分的样品。Q6：产品配方含40%甘油，会影响实验吗？
A：40%甘油为抗体稳定剂，在推荐工作浓度下（如WB 1:10,000稀释后甘油浓度仅0.004%）不会对实验产生影响。甘油的作用是降低冰点，使抗体在-20℃保存时保持液态，避免反复冻融导致的抗体失活。
七、技术支持
如有技术问题或需要更多应用数据，欢迎联系：
📧 邮箱：service@gooniebio.com
📞 电话：400-090-1923
🌐 官网：www.gooniebio.cn
页面总结
NM0001（RecomAb™ anti-GFP mAb [Clone RGF-01]）是兔源IgG单克隆抗体，特异性识别绿色荧光蛋白（GFP, 27 kDa, SwissProt P42212），适用于GFP标签融合蛋白的免疫检测。验证4种应用：WB 1:10,000–1:50,000（超高灵敏度）、IHC-P 1:100–1:250、ICC/IF 1:500、FC 1:50。兔源单抗RGF-01克隆亲和力高、背景低，WB超高稀释倍数意味着优异的经济性。预计与RFP/BFP无交叉反应。配套NM0007（anti-HA tag）和NM0010（anti-V5 tag）可构建多标签检测体系。
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保存：2-8℃避光保存。冰袋运输。
关键词
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