RecomAb™ anti-GST tag mAb [Clone RGT-01]
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TL;DR:RecomAb™ anti-GST tag mAb [Clone RGT-01](货号 NM0009)是小鼠源IgG2a单克隆抗体,特异性识别外源性表达的GST(谷胱甘肽S-转移酶)标签融合蛋白。与HA、Flag等小肽标签不同,GST是一个约26 kDa的完整酶蛋白,源自日本血吸虫(Schistosoma japonicum),广泛用于重组蛋白表达纯化(GST-pull down)和蛋白-蛋白相互作用研究。验证应用:WB(1:5,000)、IP(0.5–1 μg/1 mg总蛋白)。
一、产品规格总表
参数 规格 产品全称 RecomAb™ anti-GST tag mAb [Clone RGT-01] 货号 NM0009 规格 50 μL / 100 μL 宿主/亚型 Mouse IgG2a 克隆号 RGT-01 反应性 外源性表达的GST标签融合蛋白 标签类型 GST(Glutathione S-Transferase,~26 kDa) 标签来源 日本血吸虫(Schistosoma japonicum) 偶联物 未偶联(Unconjugated) 验证应用 WB, IP WB推荐稀释度 1:5,000 IP用法 0.5–1 μg 抗体 / 1 mg 总蛋白 浓度 1 mg/mL 配方 PBS (pH 7.2), 50%甘油, 0.03% Proclin300 运输条件 2–8℃ 储存条件 -20℃保存,避免反复冻融
二、靶标背景:GST标签——大分子蛋白标签的经典之选
GST(Glutathione S-Transferase,谷胱甘肽S-转移酶)是一个约26 kDa的蛋白质标签,源自日本血吸虫(Schistosoma japonicum)。与HA(9 aa)、Flag(8 aa)、Myc(10 aa)等小肽标签不同,GST是一个完整的酶蛋白,在分子生物学和生物技术中具有独特的应用价值:
✅ GST-pull down经典平台:GST标签融合蛋白可与谷胱甘肽(Glutathione, GSH)偶联的磁珠或琼脂糖珠高亲和力结合,是蛋白-蛋白相互作用研究中最经典的pull down平台之一
✅ 蛋白表达与纯化利器:GST标签可显著提高融合蛋白的可溶性和表达量,配合GSH亲和层析可一步纯化获得高纯度靶蛋白
✅ 酶活性可用于功能分析:GST本身具有谷胱甘肽S-转移酶活性,可用于酶活分析、药物代谢研究等
✅ 治疗性蛋白生产工具:GST标签系统广泛应用于治疗性蛋白的生产与纯化工艺中需要注意的是,由于GST分子量较大(~26 kDa),融合表达时可能对靶蛋白的折叠、亚细胞定位或生物活性产生一定影响。如出现功能异常,建议尝试将GST标签转移至靶蛋白的另一端(N端↔C端),或通过酶切去除标签。
三、克隆信息:RGT-01——鼠源IgG2a的高亲和力识别
NM0009采用RGT-01克隆,来源于小鼠单克隆抗体(Mouse IgG2a亚型)。该克隆具有以下特点:
✅ 特异性强:RGT-01对GST标签高度特异,不与HA、Flag、Myc、V5、His等其他标签发生交叉反应
✅ WB灵敏度高:推荐稀释度1:5,000,稀释倍数远高于常规WB抗体(通常1:1,000–1:2,000),说明抗体亲和力高、信号强劲
✅ IP表现优异:推荐用量0.5–1 μg/1 mg总蛋白,可有效富集GST标签融合蛋白用于pull down、互作蛋白筛选等下游实验
✅ IgG2a亚型优势:Mouse IgG2a在补体结合和Fc受体结合方面具有独特优势,适合多种二抗系统配对RGT-01克隆特异性识别GST标签,适用于重组GST融合蛋白的表达验证、纯化产物鉴定、GST-pull down实验及蛋白-蛋白相互作用研究。
四、种属交叉反应
适用范围 反应性 备注 GST标签融合蛋白 ✅ Verified 所有外源性表达的GST标签蛋白均可检测,不受种属限制 内源蛋白 ❌ 不适用 GST标签源自日本血吸虫,哺乳动物内源蛋白不含此标签 注:NM0009识别的是GST标签蛋白本身,而非特定种属的靶蛋白。只要目标蛋白通过基因工程融合了GST标签,无论其来源于人、小鼠、大鼠或其他种属,均可被NM0009检测。该抗体不识别内源性非标签蛋白。
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六、常见问题 FAQ
Q1:GST标签和HA、Flag等小肽标签有什么区别?
A:最大的区别在于分子量。GST是约26 kDa的完整酶蛋白,而HA(9 aa)、Flag(8 aa)、Myc(10 aa)都是短肽标签。GST标签的优势在于可用于蛋白纯化(GST-pull down)和酶活分析,但体积较大,可能影响融合蛋白的折叠或定位;小肽标签体积小、几乎不影响蛋白功能,但不能用于亲和纯化。选择取决于实验目的:如需pull down或纯化选GST,如需简单检测选HA/Flag/Myc。Q2:NM0009能检测人源、鼠源的GST标签融合蛋白吗?
A:可以。NM0009识别的是GST标签本身,而非特定种属的靶蛋白。无论GST标签融合表达于人源、鼠源或其他种属的蛋白,均可被检测。GST标签源自日本血吸虫,哺乳动物内源蛋白不含此标签,因此不存在内源背景干扰。Q3:WB稀释度1:5,000是不是太高了?和普通抗体的1:1,000有什么区别?
A:1:5,000是说明书推荐的工作稀释度,反映了RGT-01克隆对GST标签的高亲和力。相比常规WB抗体的1:1,000–1:2,000,1:5,000意味着更高的稀释倍数但仍可获得清晰信号。建议首次使用时按推荐稀释度操作;如信号偏弱可适当降低至1:2,000–1:3,000,如背景偏高可提高至1:8,000–1:10,000。Q4:GST标签(~26 kDa)会不会影响融合蛋白的功能?
A:GST分子量较大,融合表达时可能对部分靶蛋白的折叠、亚细胞定位或生物活性产生影响,尤其是对空间构象敏感的蛋白。建议:①将GST标签融合于靶蛋白的N端或C端,通过功能实验验证标签融合后靶蛋白活性未受损;②如出现功能异常,可尝试将标签转移到另一端;③如需对标签影响最小化的检测方案,可选择小肽标签抗体(如NM0007 anti-HA、NM0008 anti-Flag)。Q5:NM0009能做IHC-P或ICC/IF吗?
A:NM0009目前仅验证了WB和IP两种应用,说明书未提供IHC-P或ICC/IF的验证数据。如有需要,建议先进行预实验优化条件,或联系技术支持获取应用建议。对于IHC-P/ICC/IF应用,也可考虑选择已验证的小肽标签抗体(如NM0008 anti-Flag,已验证IHC-P和ICC/IF)。
七、技术支持
如有技术问题或需要更多应用数据,欢迎联系:
📧 邮箱:service@gooniebio.com
📞 电话:400-090-1923
🌐 官网:www.gooniebio.cn
页面总结
NM0009(RecomAb™ anti-GST tag mAb [Clone RGT-01])是小鼠源IgG2a单克隆抗体,特异性识别外源性表达的GST标签(~26 kDa,源自日本血吸虫)融合蛋白。验证2种应用:WB 1:5,000、IP 0.5–1 μg/1 mg总蛋白。GST是最经典的大分子蛋白标签,广泛用于蛋白表达纯化(GST-pull down)和蛋白互作研究。配套NM0007(anti-HA)、NM0008(anti-Flag)、NM0010(anti-V5)可构建多标签检测体系。
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保存:2-8℃避光保存。冰袋运输。
关键词
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