RecomAb™ anti-HA tag mAb [Clone RHA-01]
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TL;DR:RecomAb™ anti-HA tag mAb [Clone RHA-01](货号 NM0007)是兔源IgG单克隆抗体,特异性识别HA表位标签(YPYDVPDYA,源自流感血凝素98-106位氨基酸)。HA标签是分子生物学中应用最广泛的表位标签之一,NM0007可用于检测所有外源性表达的HA标签融合蛋白,不受种属限制。验证应用覆盖WB(1:1,000)、IHC-P(1:800)、ICC/IF(1:800)、流式胞内染色(1:800)、IP(1:50)及ChIP(1:50)。
一、产品规格总表
参数 规格 产品全称 RecomAb™ anti-HA tag mAb [Clone RHA-01] 货号 NM0007 规格 50 μL / 100 μL 宿主/亚型 Rabbit IgG 克隆号 RHA-01 反应性 所有带HA标签的外源性表达融合蛋白(跨种属通用) 标签序列 YPYDVPDYA(HA tag, 9 aa) 偶联物 未偶联(Unconjugated) 验证应用 WB, IHC-P, ICC/IF, FC (Intra), IP, ChIP WB推荐稀释度 1:1,000 IHC-P稀释度 1:800 ICC/IF稀释度 1:800 流式胞内染色稀释度 1:800 IP / ChIP稀释度 1:50 浓度 0.25 mg/mL 配方 PBS (pH 7.2), 50%甘油, 0.03% Proclin300, 0.05% BSA 储存条件 -20℃保存,避免反复冻融
二、靶标背景:HA标签——分子生物学最经典的表位标签
HA标签源自人流感病毒血凝素(hemagglutinin)表面糖蛋白的第98-106位氨基酸,序列为YPYDVPDYA,仅由9个氨基酸组成。作为一种小分子表位标签,HA标签被广泛融合表达于目标蛋白的N端或C端,其极小的体积几乎不会影响融合蛋白的天然生物活性、空间构象、亚细胞定位或生物学功能。
自1980年代被引入以来,HA标签已成为重组蛋白表达系统中最常用的表位标签之一,与Myc、Flag、V5等标签并列为分子生物学研究的"标配工具"。研究者通过在目标基因末端引入HA标签序列,即可利用高特异性的抗HA抗体进行蛋白检测、免疫沉淀(IP)、染色质免疫沉淀(ChIP)、免疫荧光(IF)和流式细胞术等实验,无需针对每个目标蛋白分别制备特异性抗体,大幅提高了实验效率和可重复性。
HA标签的核心优势:
✅ 标签体积极小(9 aa),不影响靶蛋白功能与定位
✅ 抗体特异性高,背景低,适用于多种实验平台
✅ 跨种属通用——只要蛋白带有HA标签序列即可检测
✅ 可与其他标签(Myc、Flag、V5等)组合使用,实现多靶标同时检测
三、克隆信息:RHA-01——兔源单抗的高亲和力优势
NM0007采用RHA-01克隆,来源于兔单克隆抗体技术平台。与传统小鼠单克隆抗体相比,兔单克隆抗体具有以下技术优势:
✅ 更高的亲和力:兔免疫系统能产生亲和力更强的抗体,通常Kd可达pM级别,在WB、IP等需要高灵敏度的应用中表现更优
✅ 更广泛的表位识别:兔抗体库可识别小鼠免疫系统无法产生免疫应答的表位,包括小分子表位和修饰位点
✅ 更低的背景:兔单抗在IHC和IF应用中非特异染色更少,信噪比更高
✅ 适合ChIP实验:高亲和力和低背景特性使RHA-01克隆在ChIP应用中表现出色,推荐稀释度1:50RHA-01克隆特异性识别HA标签的YPYDVPDYA序列,对标签融合蛋白具有高亲和力和高特异性,是HA标签融合蛋白检测与功能研究的可靠工具。
四、种属交叉反应
适用范围 反应性 备注 HA标签融合蛋白 ✅ Verified 所有外源性表达的HA标签蛋白均可检测,不受种属限制 内源蛋白 ❌ 不适用 HA标签为病毒来源序列,哺乳动物内源蛋白不含此表位 注:NM0007识别的是HA标签表位本身,而非特定种属的蛋白。只要目标蛋白融合了HA标签序列(YPYDVPDYA),无论其来源于人、小鼠、大鼠或其他种属,均可被NM0007检测。该抗体不识别内源性非标签蛋白。
五、相关产品
- NM0001 · RecomAb™ anti-GFP mAb——GFP荧光蛋白标签检测(与HA标签配套用于双标签系统)
- NM0010 · RecomAb™ anti-V5 tag mAb——V5表位标签检测(另一常用小分子标签)
- 400-201 · GOONIE 去内毒素质粒小提试剂盒——HA标签表达载体构建与质粒提取配套
六、常见问题 FAQ
Q1:NM0007能检测哪些种属的蛋白?
A:NM0007识别的是HA标签序列(YPYDVPDYA),不是特定种属的蛋白。只要目标蛋白通过基因工程融合了HA标签,无论来源于人、小鼠、大鼠或其他种属,均可被检测。该抗体不识别内源性非标签蛋白。Q2:NM0007可以用于ChIP实验吗?
A:可以。NM0007已验证ChIP应用,推荐稀释度1:50。兔源单抗的高亲和力和低背景特性使其在ChIP实验中表现优异,适用于HA标签融合转录因子或染色质相关蛋白的DNA结合位点分析。Q3:IP实验中抗体用量如何确定?
A:IP推荐稀释度1:50。具体用量需根据靶蛋白表达水平和裂解液量进行优化,通常每500 μg总蛋白使用1-5 μg抗体。建议首次使用时设置梯度预实验确定最佳用量。Q4:HA标签和Flag标签、Myc标签有什么区别?
A:三者都是常用的小分子表位标签,序列长度分别为9 aa(HA)、8 aa(Flag)和10 aa(Myc),均不影响靶蛋白功能。HA标签源自流感病毒,Flag标签为人工设计序列,Myc标签源自人c-Myc蛋白。选择主要取决于个人偏好和实验体系,多标签组合可实现同一蛋白的多位点检测或co-IP验证。Q5:流式胞内染色需要注意什么?
A:NM0007验证的是FC (Intra)即胞内流式染色,需使用破膜剂(permeabilization buffer)对细胞进行固定破膜处理后再染色,推荐稀释度1:800。该抗体不适用于细胞表面染色,因为HA标签通常融合表达于胞内蛋白。Q6:产品含Proclin300和BSA,会影响IP/ChIP实验吗?
A:配方中Proclin300(0.03%)为防腐剂,BSA(0.05%)为稳定剂,在推荐工作浓度下不会影响IP和ChIP实验。若对BSA背景敏感,可在IP洗涤步骤中增加洗涤次数。
七、技术支持
如有技术问题或需要更多应用数据,欢迎联系:
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页面总结
NM0007(RecomAb™ anti-HA tag mAb [Clone RHA-01])是兔源IgG单克隆抗体,特异性识别HA表位标签(YPYDVPDYA),跨种属通用——所有带HA标签的外源性融合蛋白均可检测。验证6种应用:WB 1:1,000、IHC-P/ICC/IF/FC(Intra) 1:800、IP/ChIP 1:50。兔源单抗的高亲和力和低背景优势使其在IP和ChIP实验中表现突出。配套NM0001(anti-GFP)和NM0010(anti-V5 tag)可构建多标签检测体系。
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保存:2-8℃避光保存。冰袋运输。
关键词
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