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    通用型植物总RNA 提取试剂盒(多糖多酚植物样本适用)

    应用:

    种属反应性:

    宿主种属:

    17min快速提取 无需DTT,无需加热

    产品名称:通用型植物总RNA 提取试剂盒(多糖多酚植物样本适用) 货号:400-108 规格:50T/盒 目录价:¥1070 品牌:GOONIE 厂家:信天翁生物科技(广州)有限公司 官网产品链接:https://www.gooniebio.cn/products/goonie/universal-plant-total-rna-extraction-kit-polysaccharides-polyphenolics-rich-400-108.html
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    货号:

    400-108

    • 规格:
      • 50T

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    • 产品描述
    • 组成成分
    • 注意事项
    • 产品规格总表

      产品名称通用型植物总RNA提取试剂盒(多糖多酚植物样本适用)
      货号400-108
      规格50T/盒
      品牌GOONIE
      厂家信天翁生物科技(广州)有限公司
      保质期一年
      提取时间约17分钟
      适用样本普通植物组织(幼嫩叶片、茎、根)、多糖多酚植物(土豆、红薯、松针、棉花叶片等)、水果果肉
      保存条件DNase I及DNase I Buffer -20℃保存、4℃运输;其余试剂及组分室温(15-25℃)运输保存
      下游应用RT-PCR、荧光定量PCR、RNA建库、芯片分析、Northern Blot、Dot Blot、分子克隆

      产品组成

      产品编号组分规格(50次)
      400-108ALysis Buffer A40 mL
      400-108BLysis Buffer B40 mL
      400-108CCB Buffer50 mL
      400-108DWash Buffer12 mL
      400-108EElution Buffer10 mL
      400-108FDNase I100 μL
      400-108GDNase I Buffer5 mL
      400-108HRNA结合柱(含收集管)50套

      核心优势

      双裂解液体系,针对性应对复杂样本

      Lysis Buffer A适用于多数普通植物组织(幼嫩叶片、茎、根)及多酚含量较高的样本(月季花瓣、茶树叶片、柑橘叶片);Lysis Buffer B专为高淀粉含量样本(土豆、红薯、板栗)及复杂多酚类样本(松针、棉花叶片)优化,避免样本裂解后形成胶状物,有助于保证RNA释放效率。两种体系相互补充,应对常规及疑难植物样本。

      柱上DNase I消化,降低基因组污染

      整合DNase I柱上消化步骤,在RNA结合柱上直接完成DNA去除,操作简便。标准消化时间5分钟,可延长至10分钟,灵活控制残留水平,有助于保障RNA纯度满足RT-PCR、荧光定量PCR、RNA建库等高灵敏度实验要求。

      操作流程简化,17分钟完成提取

      摒弃传统酚氯仿抽提及醇类沉淀步骤,整个提取流程仅需约17分钟。操作步骤清晰、衔接紧凑,有助于缩短实验周期,同时减少样本在操作过程中的降解风险。

      全程无毒试剂,操作更简便

      全程不接触酚氯仿、β-巯基乙醇、DTT等有毒试剂,无需通风橱操作,实验过程更安全便捷。

      裂解液选择指南

      由于植物次生代谢产物种类多样,单种裂解液通常无法覆盖不同的植物样本,故试剂盒提供了两种不同裂解液。Lysis Buffer A针对的样本类型更加广泛,但在遇到高淀粉含量的植物样本时会生成胶状物质妨碍提取,在一些高多糖样本中也可能与多糖共沉淀导致提取失败。Lysis Buffer B通常能正常提取高淀粉含量的植物样本,但在简单植物样本中提取产量可能偏低。在明确不是高淀粉类、高多糖类样本情况下,建议优先尝试用Lysis Buffer A进行提取,或用两种Buffer先进行一次预实验确定合适的Buffer。

      样本类型推荐投入量样本举例推荐裂解液
      普通植物组织(幼嫩叶片、茎、根)50-100 mg小麦、水稻、拟南芥、烟草、玉米、生菜、香菜、油菜Lysis Buffer A
      淀粉、多糖含量高的植物组织50-100 mg土豆、红薯、板栗、马蹄、芋头、香蕉、金针菇Lysis Buffer B
      多酚含量高植物组织50-100 mg月季花瓣、山茶花瓣、茶树叶片、柑橘叶片、草莓叶片Lysis Buffer A
      复杂多酚类组织50-100 mg松针、棉花叶片Lysis Buffer B
      水果果肉100-200 mg草莓、柑橘、苹果Lysis Buffer A

      操作流程

      1. 样本处理

      称取50-100 mg植物组织,加入液氮后用研钵磨成粉末,或液氮速冻后用冷冻研磨仪快速将样品研磨成粉末。研磨应尽可能充分快速,并保证低温,以防止RNA降解。

      2. 样本裂解

      迅速向研磨好的植物样品粉末中加入600 μL的Lysis Buffer A或Lysis Buffer B(根据样本选择一种裂解液,若不确定,可先用两种裂解液都进行测试,然后再选择合适的),剧烈涡旋振荡30秒,使样本与裂解液充分混合均匀,然后13,000 × g室温离心5 min。

      3. RNA结合

      弃去沉淀,将上一步离心后的上清转入一个新的干净的离心管(部分样品上层会有漂浮的固体类或油脂类杂质,则吸取中间层澄清液体),并加入0.5倍上清体积的无水乙醇,用移液器吹打6-8次混匀,然后将混合液转入RNA结合柱(结合柱先套入收集管中),13,000 × g室温离心30秒。

      4. 柱清洗

      (1)弃滤液,向RNA结合柱(含收集管)中加入750 μL的CB Buffer(首次使用前需加入对应量无水乙醇),13,000 × g室温离心30秒。(2)弃滤液,向RNA结合柱(含收集管)中加入500 μL的Wash Buffer(首次使用前需加入对应量无水乙醇),13,000 × g室温离心30秒。

      5. gDNA消化

      弃滤液,按下表比例配制DNase I反应液:

      组分用量(单个样品)
      DNase I Buffer100 μL
      DNase I2 μL

      将配好的DNase I反应液加98 μL到RNA纯化柱膜中央,室温放置5分钟(切勿离心,必须按照下一步加入CB Buffer以后才能离心)。此用量和反应时间通常能够去除大部分gDNA,如对gDNA去除要求特别高,可延长反应时间至10分钟。若实验对gDNA残留不敏感,可直接跳过此步骤。

      6. 二轮柱清洗

      (1)向RNA结合柱(含收集管)中加入750 μL的CB Buffer,13,000 × g室温离心30秒。(2)弃滤液,向RNA结合柱(含收集管)中加入500 μL的Wash Buffer,13,000 × g室温离心30秒。

      7. 空管离心

      弃滤液,将RNA结合柱放回收集管,13,000 × g室温空管离心30秒。

      8. RNA洗脱

      弃收集管,将RNA结合柱转入新的1.5 mL RNase-free离心管中,向RNA纯化柱柱膜中央悬空滴加30-100 μL的Elution Buffer,室温放置2分钟,13,000 × g室温离心1分钟。弃纯化柱,1.5 mL离心管中产物即为RNA产物,立即进行下游实验或置于-80℃保存。

      注意事项

      1. 首次使用前,必须向CB Buffer中加入50 mL无水乙醇,向Wash Buffer中加入48 mL无水乙醇,并充分摇匀。

      2. Lysis Buffer若因低温出现结晶析出,于55℃温水孵育至澄清即可正常使用。

      3. 建议使用无RNA酶的耗材,并在超净工作台中对Elution Buffer进行小份分装,避免反复取用造成污染。

      4. 对于珍稀或提取难度较高的样本,建议正式实验前先进行小规模预实验,确认提取效果后再扩大样本量。

      5. 本产品仅用于科研,不可用于诊断。

      性能实测数据

      以下为部分代表性植物样本的提取数据,完整数据请参阅新品上市文章

      普通植物根茎及叶片

      样本A260/A280A260/A230浓度(ng/μL)得率(μg/10 mg)
      91mg水稻叶2.0852.3651273.728.41
      97mg小麦叶2.0882.347724.5124.47
      97mg茄子叶2.1092.41844.1911.4
      100mg拟南芥叶2.092.262328.4552.0
      80mg龙井茶叶2.0462.254283.7432.16

      多糖多酚植物

      样本A260/A280A260/A230浓度(ng/μL)得率(μg/10 mg)
      100mg土豆块茎2.1062.372488.3541.95
      60mg红薯2.0952.466505.6263.37
      100mg松针2.0462.301276.2831.11
      75mg棉花叶2.1352.608483.7252.58
      95mg鲜板栗2.0942.411953.9704.02

      RNA电泳图

      土豆块茎、红薯块茎、金针菇、松针、小麦叶RNA电泳图

      常见问题 FAQ

      Q:Lysis Buffer出现浑浊或结晶析出,还能正常使用吗?

      A:可以。Lysis Buffer受温度变化的影响可能会因结晶析出而变浑浊,属于正常现象。使用前将瓶置于55°C温水孵育,偶尔摇动,直至溶液完全恢复澄清透明即可正常使用,不影响提取效果。

      Q:Lysis Buffer A和Lysis Buffer B应该如何选择?

      A:若样本为常规幼嫩组织(水稻、拟南芥、烟草等)或多酚类样本(花瓣、茶树叶等),优先选择Lysis Buffer A。若为高淀粉含量样本(土豆、红薯、板栗)或复杂多酚类样本(松针、棉花叶片),则建议使用Lysis Buffer B。对于不确定类型的样本,可分别用两种裂解液进行小量预实验,根据提取效果确定最优方案。

      Q:DNase I消化步骤是否可以省略?

      A:如果下游实验对基因组DNA残留不敏感,可以跳过此步骤以缩短操作时间。但对于荧光定量PCR、RNA建库等高灵敏度实验,强烈建议执行DNase I柱上消化,标准消化5分钟即可去除大部分gDNA,若对残留要求极高可延长至10分钟。

      Q:RNA洗脱时Elution Buffer的用量如何选择?

      A:推荐用量为30-100 μL。若预期RNA产率较低,建议使用30-50 μL以获得较高浓度的RNA产物;若样本RNA丰度高,可适当增加洗脱体积以提高回收率。需注意,减少洗脱体积会相应降低洗脱效率,建议根据样本类型和实验需求进行优化。

      Q:提取的RNA如何保存?

      A:建议洗脱后立即进行下游实验。如需保存,可置于-80°C冰箱冻存。应避免反复冻融,以免造成RNA降解。首次使用Elution Buffer前,建议在超净工作台中小份分装,防止多次取用引入RNase污染。

      Q:针对珍稀或难提样本,有什么建议?

      A:对于珍稀样本或首次尝试的复杂样本,强烈建议先用少量样本进行预实验,确认提取效果(包括产率、纯度和完整性)后再放大到正式实验用量。这样可以避免珍贵样本的浪费。

      技术支持

      如有产品使用、样本适用性或应用优化问题,欢迎联系信天翁生物技术团队获取支持。

      咨询热线400-090-1923
      官方邮箱service@gooniebio.com
      官网www.gooniebio.cn
      地址广州市黄埔区瑞和路39号纳金科技园

      相关产品

      品牌:GOONIE|核酸提取与PCR试剂 | 出品:信天翁生物科技(广州)有限公司

    • 产品组成

      产品编号组分规格(50次)
      400-108ALysis Buffer A40 mL
      400-108BLysis Buffer B40 mL
      400-108CCB Buffer50 mL
      400-108DWash Buffer12 mL
      400-108EElution Buffer10 mL
      400-108FDNase I100 μL
      400-108GDNase I Buffer5 mL
      400-108HRNA结合柱(含收集管)50套
    • 注意事项

      1. 首次使用前,请严格按照说明书要求向CB Buffer和Wash Buffer中加入指定体积的无水乙醇。

      2. Lysis Buffer若因低温出现结晶析出,于55°C温水孵育至澄清即可正常使用。

      3. 建议使用无RNA酶的耗材,并在超净工作台中对Elution Buffer进行小份分装,避免反复取用造成污染。

      4. 对于珍稀或提取难度较高的样本,建议正式实验前先进行小规模预实验,确认提取效果后再扩大样本量。



       

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