通用型植物总RNA 提取试剂盒（多糖多酚植物样本适用）
应用：
种属反应性：
宿主种属：
17min快速提取 无需DTT，无需加热
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- 产品描述
- 组成成分
- 注意事项
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产品简介
信天翁生物通用型植物总RNA提取试剂盒（货号：400-108）适用于从不同植物组织中快速提取总RNA。本试剂盒可进行各种简单植物组织（如水稻、小麦、玉米、拟南芥、本生烟等植物幼嫩组织）的RNA提取，同时也可进行多糖多酚类植物样本RNA的提取。提取过程中无需使用酚氯仿、β-巯基乙醇和DTT等有毒试剂，也无需耗时的醇类沉淀，整个提取过程约需17分钟。
试剂盒提供两种不同裂解液，适用更广泛的植物样本类型。整合DNase I柱上消化步骤，有效去除样本gDNA，RNA结合柱高效结合RNA，配合优化Buffer体系，可获得高纯度总RNA。RNA产物可用于RT-PCR、荧光定量PCR、RNA建库、芯片分析、Northern Blot、Dot Blot和分子克隆等多种下游实验。
注意：Lysis Buffer可能会出现结晶，置于55°C温水孵育直至澄清即可正常使用。
产品保存
组分400-108F（DNase I）、400-108G（DNase I Buffer）于-20°C保存，4°C运输；其它试剂和组分室温（15-25°C）运输保存，保质期为一年。
本产品仅用于科研，不可用于诊断。
产品特点
双裂解液体系，针对性应对复杂样本
Lysis Buffer A适用于多数普通植物组织（幼嫩叶片、茎、根）及多酚含量较高的样本（月季花瓣、茶树叶片、柑橘叶片）；Lysis Buffer B专为高淀粉含量样本（土豆、红薯、板栗）及复杂多酚类样本（松针、棉花叶片）优化，有效避免样本裂解后形成胶状物，有助于保证RNA释放效率。两种体系相互补充，从容应对常规及疑难植物样本。
柱上DNase I消化，有效降低基因组污染
整合DNase I柱上消化步骤，在RNA结合柱上直接完成DNA去除，操作简便。标准消化时间5分钟，可延长至10分钟，灵活控制残留水平，有效保障RNA纯度满足RT-PCR、荧光定量PCR、RNA建库等高灵敏度实验要求。
操作流程简化，17分钟完成提取
摒弃传统酚氯仿抽提及醇类沉淀步骤，整个提取流程仅需约17分钟。操作步骤清晰、衔接紧凑，有效缩短实验周期，同时减少样本在操作过程中的降解风险，有利于获得完整性较好的总RNA。
全程无毒试剂，操作更安全
全程不接触酚氯仿、β-巯基乙醇等有毒试剂，无需通风橱操作，实验过程更安全便捷。
裂解液选择指南
由于植物次生代谢产物种类多样，植物样本类型复杂，单种裂解液通常无法覆盖不同的植物样本，故试剂盒提供了两种不同裂解液。Lysis Buffer A针对的样本类型更加广泛，但在遇到高淀粉含量的植物样本时会生成胶状物质妨碍提取，在一些高多糖样本中也可能与多糖共沉淀导致提取失败。Lysis Buffer B通常能正常提取高淀粉含量的植物样本，但在简单植物样本中提取产量可能偏低。在明确不是高淀粉类、高多糖类样本情况下，建议优先尝试用Lysis Buffer A进行提取，或用两种Buffer先进行一次预实验确定合适的Buffer。
样本类型 推荐投入量 样本举例 推荐裂解液 普通植物组织（幼嫩叶片、茎、根） 50-100 mg 小麦、水稻、拟南芥、烟草、玉米、生菜、香菜、油菜 Lysis Buffer A 淀粉、多糖含量高的植物组织 50-100 mg 土豆、红薯、板栗、马蹄、芋头、香蕉、金针菇 Lysis Buffer B 多酚含量高植物组织 50-100 mg 月季花瓣、山茶花瓣、茶树叶片、柑橘叶片、草莓叶片 Lysis Buffer A 复杂多酚类组织 50-100 mg 松针、棉花叶片 Lysis Buffer B 水果果肉 100-200 mg 草莓、柑橘、苹果 Lysis Buffer A
操作流程
1. 样本处理
称取50-100 mg植物组织，加入液氮后用研钵磨成粉末，或液氮速冻后用冷冻研磨仪快速将样品研磨成粉末。研磨应尽可能充分快速，并保证低温，以防止RNA降解。
2. 样本裂解
迅速向研磨好的植物样品粉末中加入600 μL的Lysis Buffer A或Lysis Buffer B（根据样本选择一种裂解液，若不确定，可先用两种裂解液都进行测试，然后再选择合适的），剧烈涡旋振荡30秒，使样本与裂解液充分混合均匀，然后13,000 × g室温离心5 min。
3. RNA结合
弃去沉淀，将上一步离心后的上清转入一个新的干净的离心管（部分样品上层会有漂浮的固体类或油脂类杂质，则吸取中间层澄清液体），并加入0.5倍上清体积的无水乙醇，用移液器吹打6-8次混匀，然后将混合液转入RNA结合柱（结合柱先套入收集管中），13,000 × g室温离心30秒。
4. 柱清洗
（1）弃滤液，向RNA结合柱（含收集管）中加入750 μL的CB Buffer（首次使用前需加入对应量无水乙醇），13,000 × g室温离心30秒。
（2）弃滤液，向RNA结合柱（含收集管）中加入500 μL的Wash Buffer（首次使用前需加入对应量无水乙醇），13,000 × g室温离心30秒。
5. gDNA消化
弃滤液，按下表比例配制DNase I反应液。
组分 用量（单个样品） DNase I Buffer 100 μL DNase I 2 μL 将配好的DNase I反应液加98 μL到RNA纯化柱膜中央，室温放置5分钟（切勿离心，必须按照下一步加入CB Buffer以后才能离心）。此用量和反应时间通常能够去除大部分gDNA，如对gDNA去除要求特别高，可延长反应时间至10分钟。若实验对gDNA残留不敏感，可直接跳过此步骤。
6. 二轮柱清洗
（1）向RNA结合柱（含收集管）中加入750 μL的CB Buffer（首次使用前需加入对应量无水乙醇），13,000 × g室温离心30秒。
（2）弃滤液，向RNA结合柱（含收集管）中加入500 μL的Wash Buffer（首次使用前需加入对应量无水乙醇），13,000 × g室温离心30秒。
7. 空管离心
弃滤液，将RNA结合柱放回收集管，13,000 × g室温空管离心30秒。
8. RNA洗脱
弃收集管，将RNA结合柱转入新的1.5 mL RNase-free离心管中，向RNA纯化柱柱膜中央悬空滴加30-100 μL的Elution Buffer，室温放置2分钟，13,000 × g室温离心1分钟。弃纯化柱，1.5 mL离心管中产物即为RNA产物，立即进行下游实验或置于-80°C保存。
提取效果
以下为部分代表性植物样本的提取数据，完整数据请参阅新品上市文章。
普通植物根茎及叶片：
样本 A260/A280 A260/A230 浓度(ng/μL) 得率（μg/10 mg） 91mg水稻叶 2.085 2.365 1273.72 8.41 97mg小麦叶 2.088 2.347 724.512 4.47 97mg茄子叶 2.109 2.4 1844.19 11.4 100mg拟南芥叶 2.09 2.262 328.455 2.0 80mg龙井茶叶 2.046 2.254 283.743 2.16 多糖多酚植物：
样本 A260/A280 A260/A230 浓度(ng/μL) 得率（μg/10 mg） 100mg土豆块茎 2.106 2.372 488.354 1.95 60mg红薯 2.095 2.466 505.626 3.37 100mg松针 2.046 2.301 276.283 1.11 75mg棉花叶 2.135 2.608 483.725 2.58 95mg鲜板栗 2.094 2.411 953.970 4.02 
【水稻叶、辣椒叶、番茄叶、小麦叶、茄子叶、扁豆叶、本生烟叶RNA电泳图】
常见问题
Q：Lysis Buffer出现浑浊或结晶析出，还能正常使用吗？
可以。Lysis Buffer受温度变化的影响可能会因结晶析出而变浑浊，属于正常现象。使用前将瓶置于55°C温水孵育，偶尔摇动，直至溶液完全恢复澄清透明即可正常使用，不影响提取效果。
Q：Lysis Buffer A和Lysis Buffer B应该如何选择？
若样本为常规幼嫩组织（水稻、拟南芥、烟草等）或多酚类样本（花瓣、茶树叶等），优先选择Lysis Buffer A。若为高淀粉含量样本（土豆、红薯、板栗）或复杂多酚类样本（松针、棉花叶片），则建议使用Lysis Buffer B。对于不确定类型的样本，可分别用两种裂解液进行小量预实验，根据提取效果确定最优方案。
Q：DNase I消化步骤是否可以省略？
如果下游实验对基因组DNA残留不敏感，可以跳过此步骤以缩短操作时间。但对于荧光定量PCR、RNA建库等高灵敏度实验，强烈建议执行DNase I柱上消化，标准消化5分钟即可去除大部分gDNA，若对残留要求极高可延长至10分钟。
Q：RNA洗脱时Elution Buffer的用量如何选择？
推荐用量为30-100 μL。若预期RNA产率较低，建议使用30-50 μL以获得较高浓度的RNA产物；若样本RNA丰度高，可适当增加洗脱体积以提高回收率。需注意，减少洗脱体积会相应降低洗脱效率，建议根据样本类型和实验需求进行优化。
Q：提取的RNA如何保存？
建议洗脱后立即进行下游实验。如需保存，可置于-80°C冰箱冻存。应避免反复冻融，以免造成RNA降解。首次使用Elution Buffer前，建议在超净工作台中小份分装，防止多次取用引入RNase污染。
Q：针对珍稀或难提样本，有什么建议？
对于珍稀样本或首次尝试的复杂样本，强烈建议先用少量样本进行预实验，确认提取效果（包括产率、纯度和完整性）后再放大到正式实验用量。这样可以最大程度避免珍贵样本的浪费。
页面总结
信天翁生物通用型植物总RNA提取试剂盒（400-108）提供双裂解液体系，适配从普通植物组织到多糖多酚、高淀粉等复杂样本的广泛植物类型。柱上DNase I消化有效去除gDNA污染，全程无需酚氯仿等有毒试剂，17分钟完成提取，RNA产物可直接用于RT-PCR、荧光定量PCR、RNA建库等多种下游实验。了解更多产品应用数据，请参阅通用型植物总RNA提取试剂盒新品上市。
技术支持
如需技术支持或产品咨询，请联系：
电话：400-090-1923
信天翁生物科技（广州）有限公司
本产品仅用于科研，不可用于诊断。
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产品组成
产品编号 组分 规格（50次） 400-108A Lysis Buffer A 40 mL 400-108B Lysis Buffer B 40 mL 400-108C CB Buffer 50 mL 400-108D Wash Buffer 12 mL 400-108E Elution Buffer 10 mL 400-108F DNase I 100 μL 400-108G DNase I Buffer 5 mL 400-108H RNA结合柱（含收集管） 50套 -
注意事项
1. 首次使用前，请严格按照说明书要求向CB Buffer和Wash Buffer中加入指定体积的无水乙醇。
2. Lysis Buffer若因低温出现结晶析出，于55°C温水孵育至澄清即可正常使用。
3. 建议使用无RNA酶的耗材，并在超净工作台中对Elution Buffer进行小份分装，避免反复取用造成污染。
4. 对于珍稀或提取难度较高的样本，建议正式实验前先进行小规模预实验，确认提取效果后再扩大样本量。
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