RecomAb™ anti-GAPDH mAb [Clone MGP-01]
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TL;DR:NeoMab NM0003 RecomAb™ anti-GAPDH mAb(MGP-01 克隆),靶向甘 3-磷酸脱氢酶(GAPDH),一种广泛表达于各类组织和细胞的管家基因,是 Western Blot 和 RT-PCR 实验中最常用的内参/上样对照之一。该抗体具备广泛种属交叉反应性,已验证可识别人、小鼠、大鼠、猪、斑马鱼、酵母及猴来源 GAPDH 蛋白。WB 推荐稀释度 1:10,000-1:50,000,灵敏度极高;同时验证 IHC-P、ICC/IF、IP 及胞内流式(FC Intracellular)5 种应用。Mouse IgG2b 亚型,Protein A 亲和纯化,浓度 1 mg/mL,-20℃ 保存。
应用领域:Western Blot 内参标准化、RT-qPCR 内参验证、免疫组化组织 GAPDH 表达检测、免疫荧光细胞定位、免疫共沉淀互作蛋白研究、胞内流式 GAPDH 表达分析。
一、产品规格总表
参数 详情 产品名称 RecomAb™ anti-GAPDH mAb [Clone MGP-01] 货号 NM0003 克隆号 MGP-01 宿主 / 亚型 Mouse IgG2b 偶联物 Unconjugated(未偶联) 种属反应性 Human, Mouse, Rat, Pig, Zebrafish, Yeast, Monkey(7 种属) 验证应用 WB, IP, IHC-P, ICC/IF, FC (Intracellular) 抗体浓度 1 mg/mL 纯化方式 Protein A 亲和纯化 产品形态 Liquid(液体) 产品配方 PBS (pH 7.2), 50% Glycerol, 0.03% Proclin 300 保存条件 -20℃ 保存;避免反复冻融 运输条件 2-8℃ 冰袋运输 规格 50 μL, 100 μL
二、靶标背景 · GAPDH
GAPDH(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,甘油醛-3-磷酸脱氢酶)是一种高度保守的糖酵解途径酶,催化 D-甘油醛-3-磷酸转化为 3-磷酸-D-甘油酰磷酸。GAPDH 不仅是糖酵解的关键酶,还参与多种生物学过程,包括细胞信号转导、程序性细胞死亡(凋亡)以及 DNA 损伤修复。因此,GAPDH 已被认为与多种疾病相关,包括癌症、神经退行性疾病和心血管疾病。
由于 GAPDH 在能量代谢中的核心作用及其在各种组织和细胞类型中的广泛表达,它被普遍视为管家基因(housekeeping gene),常作为 Western Blotting 和 RT-PCR 实验中的内参对照(loading control)。其在不同实验条件下的一致表达,使其成为定量分析中可靠的标准化参考。
蛋白信息:
· 分子量:~36 kDa(单体)
· oligomeric state:四聚体(功能性形式)
· SwissProt:P04406
· Alternate Names:Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, GAPD
· 分布:几乎所有组织和细胞类型中均表达,胞质定位为主
三、克隆号信息 · MGP-01
MGP-01 是 NeoMab 开发的抗 GAPDH 重组单克隆抗体克隆。该克隆识别 GAPDH 蛋白的保守表位,赋予其跨多物种的广泛反应性——已验证可识别人、小鼠、大鼠、猪、斑马鱼、酵母及猴来源的 GAPDH 蛋白。
核心优势:
· 7 种属交叉反应:一支抗体覆盖人/小鼠/大鼠/猪/斑马鱼/酵母/猴,减少实验室不同物种实验的抗体采购种类;
· 高灵敏度:WB 推荐稀释度 1:10,000-1:50,000,极低用量即可获得清晰条带信号,节省抗体用量;
· 多应用覆盖:同一支抗体支持 WB、IP、IHC-P、ICC/IF、FC (Intracellular) 5 种应用,满足从蛋白定量到组织定位的全方位需求;
· Protein A 纯化:高纯度抗体,批间一致性好。
四、应用稀释与 Protocol 指南
应用 推荐稀释度 / 用量 Western Blot 1:10,000 - 1:50,000 IHC-P(石蜡切片) 1:3,000 - 1:16,000 ICC/IF(免疫荧光) 1:400 - 1:1,600 Flow Cytometry (Intracellular) 0.4 μg per 10⁶ cells in 100 μL staining volume IP(免疫沉淀) 0.5-4.0 μg per 2-3 mg total protein lysate
五、种属交叉反应性
NM0003(MGP-01 克隆)识别 GAPDH 蛋白的保守表位,已验证以下 7 个物种的 GAPDH:
物种 GAPDH 序列一致性 预期 WB 条带 Human(人) ~100% ~36 kDa Mouse(小鼠) ~100% ~36 kDa Rat(大鼠) ~100% ~36 kDa Pig(猪) 高保守 ~36 kDa Zebrafish(斑马鱼) 高保守 ~36 kDa Yeast(酵母) 高保守 ~36 kDa Monkey(猴) ~100% ~36 kDa
应用价值:对于同时开展多种属实验的实验室,无需为每个物种单独购买内参抗体,一支 NM0003 即可覆盖人/小鼠/大鼠/猪/斑马鱼/酵母/猴来源样本的 GAPDH 检测。
六、质量数据
每批产品均经过严格质控,包括 SDS-PAGE 纯度检测、BCA 法定量、以及 WB 功能性验证,确保批间一致性。
Western Blot 验证数据:

· 293F 细胞裂解液(人源):1/50,000 稀释,可见 ~36 kDa 清晰单一条带
· Monkey brain 裂解液(猴源):1/50,000 稀释,可见 ~36 kDa 清晰单一条带
· Mouse L929 细胞裂解液(小鼠源):1/50,000 稀释,可见 ~36 kDa 清晰单一条带Flow Cytometry 验证数据:

· Jurkat 细胞:10⁶ cells 用 0.25 μg NM0003 染色,AF488 二抗 1:100 稀释,可见 GAPDH 胞内信号阳性峰
七、相关产品
NeoMab recombinant mAb 系列:
· NM0001 RecomAb™ anti-GFP mAb [RGF-01] — GFP 融合蛋白检测
· NM0006 RecomAb™ anti-Mouse F4/80 mAb [CI:A3-1] — 小鼠巨噬细胞标志物
· NM0015 RecomAb™ anti-Mouse CD8a mAb [53-6.7] — 小鼠 CD8α T 细胞检测
配套试剂:
· GOONIE 400-201 无内毒素质粒小提试剂盒 — WB 验证用质粒提取
· GOONIE 400-100 细胞总 RNA 快速提取试剂盒 — RT-qPCR GAPDH 内参验证
八、常见问题 · FAQ
Q: NM0003 可以检测哪些物种的 GAPDH?
A: 已验证 7 个物种:人、小鼠、大鼠、猪、斑马鱼、酵母、猴。GAPDH 蛋白在进化上高度保守,这些物种间的 GAPDH 序列一致性极高,因此同一支抗体可跨物种使用。对于其他物种(如兔、犬、牛等),建议先用已知阳性样本验证后再使用。
Q: WB 推荐稀释度是 1:10,000-1:50,000,该怎么选择?
A: 建议从 1:10,000 开始摸索,根据信号强度逐步调整。说明书 WB 验证数据在 1:50,000 稀释下即可获得清晰条带(293F / Monkey brain / Mouse L929 裂解液)。对于低表达样本,可适当降低稀释度(如 1:5,000);高表达样本可提高至 1:50,000 以节省抗体。不同二抗灵敏度也会影响最终信号,建议做梯度稀释确定最佳条件。
Q: 抗体可以 4℃ 短期保存吗?
A: 说明书推荐 -20℃ 保存。由于配方含 50% Glycerol,-20℃ 下不会冻结,随时可取用。短期(数天)4℃ 存放不会明显影响活性,但长期不建议,可能导致蛋白降解或微生物污染。
Q: 50% Glycerol 配方,取用时感觉比较黏稠,正常吗?
A: 正常。50% 甘油配方使抗体在 -20℃ 下仍保持液态,避免反复冻融。甘油导致液体黏稠,取用时建议缓慢吸取,取后立即盖紧放回 -20℃。可先用窄口枪头预剪尖端以改善吸取效果。
Q: 做胞内流式(FC Intracellular),需要什么样的样本处理?
A: 胞内流式需要先固定和通透细胞,使抗体能够进入胞内与 GAPDH 结合。推荐使用 commercial intracellular staining kit,固定后通透,每 10⁶ 细胞加 0.4 μg NM0003 于 100 μL 染色体系中孵育。需搭配荧光标记的 anti-Mouse IgG 二抗使用。
Q: IP 实验中,NM0003 的推荐用量是多少?
A: 推荐每 2-3 mg 总蛋白裂解液使用 0.5-4.0 μg 抗体。建议先用较高用量(4 μg)确认 IP 效率,再逐步降低寻找最优用量。搭配 Protein A/G 磁珠或琼脂糖珠使用。
九、技术支持
NeoMab 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,专注于重组单克隆抗体和免疫学试剂研发。
· 客服电话:400-090-1923
· 技术支持邮箱:service@gooniebio.com
· 公司官网:www.gooniebio.com
· 地址:广州市黄埔区瑞和路39号纳金科技园
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保存:2-8℃避光保存。冰袋运输。
关键词
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RecomAb™ anti-Beta Actin mAb [Clone MBA-01]
货号:NM0004
应用:WB, IHC-P, ICC/IF, FC (Intra), IP
种属反应性:Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit, Canine, Monkey, Chicken, Zebrafish, Hamster
宿主种属:Mouse
Anti-Human CD28 Functional Grade [CD28.2]
货号:CF0018
应用:Functional
宿主种属:mouse
Anti-Mouse CD28 Functional Grade [Clone 37.51]
货号:CF0029
应用:Functional
种属反应性:mouse
宿主种属:Armenian Hamster
Anti-Human CD3 Functional Grade [Clone OKT3]
货号:CF0043
应用:Functional
种属反应性:human
宿主种属:Mouse
Anti-M13 phage coat protein g8p antibody [Clone MMG-13]
货号:NM0002
应用:WB, ICC/IF, FC
种属反应性:Virus
宿主种属:Mouse
RecomAb™ anti-c-Myc mAb [Clone RMY-02]
货号:NM0005
应用:ICC/IF , IHC-P, IP, WB, Flow Cyt (Intra), ChIP-seq, ChIC/CUT&RUN-seq
种属反应性:human, mouse, rat
宿主种属:Rabbit
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