RecomAb™ anti-Beta Actin mAb [Clone MBA-01]
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TL;DR:NeoMab NM0004 RecomAb™ anti-Beta Actin mAb(MBA-01 克隆),靶向 β-actin——一种高度保守、泛表达的细胞骨架结构蛋白,分子量约 42 kDa,是 Western Blot 和 RT-PCR 实验中最常用的内参/上样对照之一。该抗体具备广泛种属交叉反应性,已验证可识别人、小鼠、大鼠、猪、兔、犬、猴、鸡、斑马鱼及仓鼠来源 Beta Actin 蛋白。WB 推荐稀释度 1:20,000-1:50,000,灵敏度极高;同时验证 IHC-P、ICC/IF、IP 及胞内流式(FC Intracellular)5 种应用。Mouse IgG2b 亚型,Protein A 亲和纯化,浓度 1 mg/mL,-20℃ 保存。
应用领域:Western Blot 内参标准化、RT-qPCR 内参验证、免疫组化组织 Beta Actin 表达检测、免疫荧光细胞定位、免疫共沉淀互作蛋白研究、胞内流式 Beta Actin 表达分析。
一、产品规格总表
参数 详情 产品名称 RecomAb™ anti-Beta Actin mAb [Clone MBA-01] 货号 NM0004 克隆号 MBA-01 宿主 / 亚型 Mouse IgG2b 偶联物 Unconjugated(未偶联) 种属反应性 Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit, Canine, Monkey, Chicken, Zebrafish, Hamster(10 种属) 验证应用 WB, IP, IHC-P, ICC/IF, FC (Intracellular) 抗体浓度 1 mg/mL 纯化方式 Protein A 亲和纯化 产品形态 Liquid(液体) 产品配方 PBS (pH 7.2), 50% Glycerol, 0.03% Proclin 300 保存条件 -20℃ 保存;避免反复冻融 运输条件 2-8℃ 冰袋运输 规格 50 μL, 100 μL
二、靶标背景 · Beta Actin
Beta-actin(β-actin)是一种高度保守的细胞骨架结构蛋白,由 375 个氨基酸组成的单链蛋白,可聚合形成 F-actin,构成细胞骨架的基本元件。作为 actin 家族成员,Beta-actin 在细胞形态维持、运动性、细胞分裂及细胞内运输等过程中发挥关键作用。Beta-actin 还经历多种关键的翻译后修饰,调控其功能及与其他蛋白的相互作用。
由于 Beta-actin 在各种组织和细胞类型中广泛且稳定表达,它被普遍视为管家基因(housekeeping gene),常作为 Western Blotting、RT-PCR 及免疫荧光实验中的内参对照(loading control)。其一致的表达水平使其成为定量分析中可靠的标准化参考。
蛋白信息:
· 分子量:~42 kDa
· SwissProt:P60709
· Alternate Names:ACTB, Beta-actin, Actin cytoplasmic 1
· 分布:几乎所有组织和细胞类型中均表达,胞质定位为主
三、克隆号信息 · MBA-01
MBA-01 是 NeoMab 开发的抗 Beta Actin 重组单克隆抗体克隆。该克隆识别 Beta Actin 蛋白的保守表位,赋予其跨多物种的广泛反应性——已验证可识别人、小鼠、大鼠、猪、兔、犬、猴、鸡、斑马鱼及仓鼠来源的 Beta Actin 蛋白。
核心优势:
· 10 种属交叉反应:一支抗体覆盖人/小鼠/大鼠/猪/兔/犬/猴/鸡/斑马鱼/仓鼠,减少实验室不同物种实验的抗体采购种类;
· 高灵敏度:WB 推荐稀释度 1:20,000-1:50,000,极低用量即可获得清晰条带信号,节省抗体用量;
· 多应用覆盖:同一支抗体支持 WB、IP、IHC-P、ICC/IF、FC (Intracellular) 5 种应用,满足从蛋白定量到组织定位的全方位需求;
· Protein A 纯化:高纯度抗体,批间一致性好。
四、种属交叉反应性
NM0004(MBA-01 克隆)识别 Beta Actin 蛋白的保守表位,已验证以下 10 个物种的 Beta Actin:
物种 Beta Actin 序列一致性 预期 WB 条带 Human(人) ~100% ~42 kDa Mouse(小鼠) ~100% ~42 kDa Rat(大鼠) ~100% ~42 kDa Pig(猪) 高保守 ~42 kDa Rabbit(兔) 高保守 ~42 kDa Canine(犬) 高保守 ~42 kDa Monkey(猴) ~100% ~42 kDa Chicken(鸡) 高保守 ~42 kDa Zebrafish(斑马鱼) 高保守 ~42 kDa Hamster(仓鼠) 高保守 ~42 kDa
应用价值:对于同时开展多种属实验的实验室,无需为每个物种单独购买内参抗体,一支 NM0004 即可覆盖人/小鼠/大鼠/猪/兔/犬/猴/鸡/斑马鱼/仓鼠来源样本的 Beta Actin 检测。
五、质量数据
每批产品均经过严格质控,包括 SDS-PAGE 纯度检测、BCA 法定量、以及 WB 功能性验证,确保批间一致性。
Western Blot 验证数据:

· Lane 1-2:293F 细胞裂解液(人源):1/50,000 稀释,可见 ~42 kDa 清晰单一条带
· Lane 3-4:Monkey brain 裂解液(猴源):1/50,000 稀释,可见 ~42 kDa 清晰单一条带
· Mouse L929 细胞裂解液(小鼠源):1/50,000 稀释,可见 ~42 kDa 清晰单一条带Flow Cytometry 验证数据:

· Jurkat 细胞:10⁶ cells 用 0.25 μg NM0004 染色,AF488 二抗 1:100 稀释,可见 Beta Actin 胞内信号阳性峰
六、相关产品
NeoMab recombinant mAb 内参抗体系列:
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配套试剂:
· GOONIE 400-201 无内毒素质粒小提试剂盒 — WB 验证用质粒提取
· GOONIE 400-100 细胞总 RNA 快速提取试剂盒 — RT-qPCR GAPDH/Beta Actin 内参验证
七、常见问题 · FAQ
Q: NM0004 和 NM0003(anti-GAPDH)有什么区别?该选哪个?
A: 两者都是常用内参抗体,但靶标不同。NM0004 靶向 Beta Actin(~42 kDa),NM0003 靶向 GAPDH(~36 kDa)。Beta Actin 在大多数组织中表达稳定,但在某些实验条件下(如细胞骨架重构、药物处理)表达量可能发生变化。GAPDH 则可能受代谢状态影响。建议根据实验体系选择合适的内参,或通过预实验验证两者在您的体系中表达是否稳定。
Q: NM0004 可以检测哪些物种的 Beta Actin?
A: 已验证 10 个物种:人、小鼠、大鼠、猪、兔、犬、猴、鸡、斑马鱼、仓鼠。Beta Actin 在进化上高度保守,这些物种间的 Beta Actin 序列一致性极高,因此同一支抗体可跨物种使用。对于其他物种(如牛、羊等),建议先用已知阳性样本验证后再使用。
Q: WB 推荐稀释度是 1:20,000-1:50,000,该怎么选择?
A: 建议从 1:20,000 开始摸索,根据信号强度逐步调整。说明书 WB 验证数据在 1:50,000 稀释下即可获得清晰条带(293F / Monkey brain / Mouse L929 裂解液)。对于低表达样本,可适当降低稀释度(如 1:10,000);高表达样本可提高至 1:50,000 以节省抗体。不同二抗灵敏度也会影响最终信号,建议做梯度稀释确定最佳条件。
Q: 抗体可以 4℃ 短期保存吗?
A: 说明书推荐 -20℃ 保存。由于配方含 50% Glycerol,-20℃ 下不会冻结,随时可取用。短期(数天)4℃ 存放不会明显影响活性,但长期不建议,可能导致蛋白降解或微生物污染。
Q: 50% Glycerol 配方,取用时感觉比较黏稠,正常吗?
A: 正常。50% 甘油配方使抗体在 -20℃ 下仍保持液态,避免反复冻融。甘油导致液体黏稠,取用时建议缓慢吸取,取后立即盖紧放回 -20℃。可先用窄口枪头预剪尖端以改善吸取效果。
Q: 做胞内流式(FC Intracellular),需要什么样的样本处理?
A: 胞内流式需要先固定和通透细胞,使抗体能够进入胞内与 Beta Actin 结合。推荐使用 commercial intracellular staining kit,固定后通透,每 10⁶ 细胞加 0.4 μg NM0004 于 100 μL 染色体系中孵育。需搭配荧光标记的 anti-Mouse IgG 二抗使用。
Q: IP 实验中,NM0004 的推荐用量是多少?
A: 推荐每 2-3 mg 总蛋白裂解液使用 0.5-4.0 μg 抗体。建议先用较高用量(4 μg)确认 IP 效率,再逐步降低寻找最优用量。搭配 Protein A/G 磁珠或琼脂糖珠使用。
八、技术支持
NeoMab 隶属信天翁生物科技(广州)有限公司,专注于重组单克隆抗体和免疫学试剂研发。
· 客服电话:400-090-1923
· 技术支持邮箱:service@gooniebio.com
· 公司官网:www.gooniebio.com
· 地址:广州市黄埔区瑞和路39号纳金科技园
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保存:2-8℃避光保存。冰袋运输。
关键词
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