如何判断细胞分选的效果？纯度与回收率的科学解读 | FiniGet分必得®免疫磁珠分选技术

发布时间:2026-07-15

如何科学评估细胞分选实验结果？本文详解纯度与回收率两大核心参数，流式细胞术检测方法，以及正选与负选策略对表位检测的影响。信天翁生物FiniGet分必得®无柱阴性分选试剂盒，适配CAR-T、单细胞测序等下游应用。

评估一次细胞分选实验的成败，不能只看最终得到了多少细胞，更要关注这些细胞"对不对"和"够不够"。在科研实践中，纯度与回收率是衡量分选效果的两项核心指标，而它们之间的平衡关系，往往决定了实验方案的设计思路。

一、如何判断分选产物的纯度

纯度是指分选后目标细胞在所有活细胞中所占的比例。它回答的是"分选得有多准"的问题——最终得到的细胞群体中，是否混入了过多不想要的杂细胞。高纯度意味着实验背景干扰更少，结果的可信度更高。

通常，我们可以借助流式细胞术来评估纯度：用荧光标记的抗体对分选前后的细胞进行染色，通过流式细胞仪分析目标细胞群的占比变化。在进行流式分析时，抗体选择需要格外慎重，尤其要考虑分选策略的影响。

如果实验采用的是阴性分选策略（如 FiniGet 分必得®无柱分选方案），目的细胞表面未经抗体结合，可灵活选用针对特定表面标志的抗体进行检测。但如果采用的是正选策略，分选时使用的抗体可能会占据细胞表面的部分表位，这时若仍用同一克隆号的抗体进行流式检测，可能会出现假阴性或信号减弱的情况。

一个常用的解决办法是选用针对同一抗原分子不同表位的其他克隆号抗体，或者用其他 marker 代替检测。以 CD3+ T 细胞分选为例，若分选抗体影响了某个 CD3 表位的识别，也可以改用 CD4 和 CD8 抗体来表征分选后 T 细胞群的组成，也是一种行之有效的替代方案。

二、如何判断分选产物的回收率

回收率是指分选后获得的目的细胞数量，占分选前样本中目的细胞总数的百分比。通俗地说，它反映的是"实际捞回来多少"。回收率的高低直接影响后续实验是否有足够的细胞材料可用。

在理想状态下，我们当然希望回收率越高越好，但现实操作中，任何分选过程都难以避免细胞损失。回收率的计算需要几个关键数据：分选前起始样本中的有核细胞总数和目标细胞比例、分选后获得的细胞总数以及纯度。有了这些数据，就可以通过公式估算回收率了。

但是在实际工作中，纯度和回收率常常呈现此消彼长的关系，无法兼顾。追求极致的纯度，往往意味着要牺牲一部分产量，通过更严格的洗涤或分选条件来去除杂质细胞，这可能导致部分目的细胞被一同舍弃。反之，若优先保证回收率，则可能接受一定程度的杂质污染。因此，研究者需要根据下游实验的具体要求来设定优先级——例如，单细胞测序实验对纯度要求较高，而某些大规模筛选实验可能更看重细胞数量。

三、FiniGet 分必得®无柱阴性分选技术

为助力生物医药研究者获取高活性、高纯度的原代免疫细胞，信天翁生物（广州）推出 FiniGet 分必得®系列免疫磁珠分选试剂盒。该系列产品基于无柱阴性分选技术，通过生物素标记的抗体 cocktail 与链霉亲和素磁珠两步孵育，利用磁力架去除样本中的非目的细胞（如 PBMC 中的非 T、非 B 细胞群体）。

整个过程无需分离柱，可在约 15 分钟内完成，且目的细胞表面不接触任何抗体或磁珠标记，保持了细胞的原始静息状态，适用于对细胞状态敏感的 CAR-T、T 细胞培养及单细胞测序等下游应用。