T细胞分选磁珠选购指南
发布时间:2026-09-01
在免疫学与细胞生物学研究中，从异质性细胞群体中获得高纯度、高活性的目的细胞是众多下游功能实验的基石。基于这一核心需求，细胞分选技术不断演进，而免疫磁珠分选（Magnetic Cell Sorting）凭借其操作简便、对细胞温和以及成本可控等优势，已成为目前应用最为广泛的细胞分离技术之一。本文将围绕FiniGet分必得®无柱阴性分选试剂盒（信天翁生物）展开，系统解析阴性分选与阳性分选的技术逻辑，并梳理从样本制备到下游应用的整体解决方案。
一、主流细胞分选技术对比
在探讨具体的分选策略前，了解当前主流技术平台的全貌有助于做出更合理的选择。目前，实验室中最常采用的细胞分选方法主要包括免疫磁珠分选与流式细胞分选两大类。流式细胞分选（FACS）能够基于多个参数进行高精度的单细胞或复杂亚群分选，是进行精细免疫表型分析和分选稀有细胞的有力工具。然而，其设备昂贵、操作复杂且对操作人员要求较高，限制了其在常规实验室的日常应用。
相比之下，免疫磁珠分选技术则以其简单快捷、无需昂贵设备的特点，成为大多数实验室进行常规T细胞分选、B细胞分选等免疫细胞纯化的首选方案。该技术利用偶联了特异性抗体的磁珠来识别并标记目标细胞或非目标细胞，随后通过磁场将目标群体与背景细胞分离。其分选过程对细胞的物理损伤小，能够较好地维持原代免疫细胞的活性与功能状态，尤其适合珍稀样本的处理以及后续的T细胞培养或功能实验。
| 常见细胞分选技术 | 分选结果 | 安全性 | 其他 |
|---|---|---|---|
| 磁珠分选技术 | 1、适宜进行单Marker分选2、分选纯度好，得率高3、分选对细胞无损，尤其适用于免疫细胞分选 | 1、阴选试剂盒（需要的细胞未经标记）2、阳选纳米级磁珠安全、可靠，生物可降解基质，无需额外去除 | 1、不需要昂贵的设备、操作简单2、阴选试剂盒无需分选柱，阳选纳米磁珠所需磁珠用量少 |
| 流式细胞分选技术 | 1、多Marker分选，纯度高，得率好2、传统流式分选：高压高速对细胞冲击较大，细胞受损严重 | 1、容易交叉污染2、带荧光抗体使用存在争论 | 1、设备昂贵、操作难度较大，需要专门操作人员进行操作和数据分析 |
表1. 常见细胞分选技术（磁性分选、流式分选）对比
二、阴性分选与阳性分选：两种核心策略解析
在免疫磁珠分选技术内部，根据分选目标和标记方式的不同，主要分为阴性分选（负选）和阳性分选（正选）两种策略。FiniGet分必得®无柱阴性和无柱阳性分选试剂盒所代表的分选方案，与传统的柱式分选方案在原理、操作及对细胞的影响上存在显著差异。
阴性分选（无柱分离） 遵循“去芜存菁”的逻辑。首先，将生物素标记的抗体Cocktail加入细胞悬液，这些抗体能够识别并结合所有非目的细胞（即“杂质”细胞）的表面标志物。随后，加入链霉亲和素包被的纳米级磁珠，磁珠通过生物素-链霉亲和素系统标记在这些非目的细胞上。当试管被置于磁力架上后，被磁珠标记的非目的细胞在磁场作用下被吸附至管壁，而未被标记的目的细胞则游离在上清液中，通过简单的倾倒即可获得高纯度的目的细胞。采用FiniGet分必得®方案，目的细胞全程未接触任何抗体或磁珠，较大程度地保留了其原始状态与生物学功能，这是该技术路线最核心的优势。
阳性分选（无柱分离） 则采取“直接捕获”的策略。其使用的磁珠上直接偶联了针对目的细胞表面标志物的特异性抗体。磁珠与细胞悬液孵育后，会直接标记目的细胞。随后，将细胞混合液通过置于磁场中的分离柱，被磁珠标记的目的细胞滞留于柱内，而非标记细胞被洗脱流出。最后将分离柱移出磁场，洗脱或推出滞留在柱上的目的细胞，即可获得富集的目的细胞。此方案特异性高，但由于磁珠与目的细胞直接结合，在某些实验场景下可能对细胞产生一定的激活效应。
表2. 阴性分选（无柱分离）与阳性分选（有柱分离）核心特性对比
| 磁性分选技术 | 阴性分选（无柱分离） | 阳性分选（无柱分离） |
|---|---|---|
| 磁珠粒径 | 粒径250 nm~4.5 μm的磁珠 | 粒径约 50‑100 nm的磁珠 |
| 磁珠标记细胞 | 生物素标记抗体Cocktail（所有不需要细胞的表面标识抗体）加入细胞悬液中孵育，链霉亲和素磁珠再加入细胞悬液孵育，磁珠标记所有不需要的细胞。 | 直接偶联特异性抗体（抗 CD3ε / CD4 / CD8）的纳米磁珠，与单细胞悬液混合孵育； 磁珠上抗体特异性识别目标细胞表面抗原，磁珠直接结合在目的 T 细胞膜表面，形成细胞‑磁珠复合物； 杂细胞不结合磁珠，保持游离状态。 |
| 细胞分选 | 磁珠标记细胞的试管入磁铁，并孵育，倒出非标记细胞，即为所需细胞。 | 孵育结束，将离心管置于磁力架； 带磁珠的目标细胞被磁场吸附贴在管壁； 吸弃上清，上清为未标记杂细胞； 移出磁力架，加入分选缓冲液重悬管壁吸附的目标细胞，收集得到磁珠标记的目的细胞； 可选解离步骤：使用解离试剂，把磁珠从细胞表面剥离，得到去磁珠的细胞；纳米磁珠不去除也可直接用于部分下游实验。 |
| 优点 | 需要的细胞未经标记。 | 无需分选柱，耗材少，操作简单快速，细胞活率高，选细胞纯度高、特异性高。 |
| 缺点 | 需要知道所有不需要细胞的表面标识抗体，磁珠用量多，特异性稍差。 | 目的细胞被磁珠‑抗体复合物标记可能会对细胞产生一定的激活作用、磁珠有残留风险。 |
三、FiniGet分必得®产品系列与性能数据
信天翁生物依托FiniGet分必得®品牌，推出了一系列针对人和小鼠免疫细胞分选与激活的无柱阴性分选试剂盒、阳选磁珠及激活磁珠，以满足不同实验需求。以下表格汇总了相关产品的关键信息与性能参数。
表3. FiniGet分必得®小鼠T细胞分选系列产品选购指南。
| 产品定位 | 小鼠T细胞阴选试剂盒（阴选，无柱分离） |
|---|---|
| 产品货号 | 130-6001 / 130-6002 / 130-6003/130-6012/130-6013 |
| 产品名称 | 小鼠CD3⁺/CD4⁺/CD8⁺ /naive CD4⁺/naive CD8⁺T细胞分选试剂盒（阴选） |
| 规格 | 1kit（1x10^9）/1kit（1x10^8） |
| 分选能力 | Up to 1×10⁸ cells / Up to 5×10⁸ cells / Up to 1×10⁹ cells |
| 有效期 | 2~8℃保存，有效期1年。 |
| 产品特点 | 操作简单：无需分选柱，使用磁性分离器即可实现目的细胞的分离。纯度高：分选细胞纯度可达95%以上；速度快：15分钟即可分选得到目的细胞。活性好：阴性分选，磁珠不与细胞直接接触，分选后细胞无异常激活，不影响下游实验。 |
表4. FiniGet分必得®人T细胞分选系列产品选购指南
| 产品定位 | 人T细胞阴选试剂盒（阴选，无柱分离） | 人T细胞阳选磁珠（阳选，有柱分离） |
|---|---|---|
| 产品货号 | 120-6001 / 120-6002 /120-6003 | 120-5001 / 120-5002 / 120-5003 |
| 产品名称 | 人CD3⁺/CD4⁺/CD8⁺ T细胞分选试剂盒（阴选） | 人CD3/CD4/CD8分选磁珠试剂盒（阳选） |
| 规格 | 1kit（1x10^9）/1kit（1x10^8） | 1kit（1x10^9）/1kit（1x10^8） |
| 分选能力 | Up to 1×10⁸ cells / Up to 5×10⁸ cells / Up to 1×10⁹ cells | Up to 1×10⁸ cells / Up to 5×10⁸ cells / Up to 1×10⁹ cells |
| 有效期 | 2~8℃保存，有效期1年。 | 2~8℃避光保存，有效期1年。 |
| 产品特点 | 操作简单：无需分选柱，使用磁性分离器即可实现目的细胞的分离。纯度高：分选细胞纯度可达90%以上；速度快：最快仅需30 min即可完成分选。活性好：阴性分选，磁珠不与细胞直接接触，分选后细胞无异常激活，不影响下游实验。 | 安全性高：磁珠粒径（50~100 nm）低毒。效果好：纯度高、活性高、回收率高。操作方便：生物可降解基质、无需额外去除。质量高：稳定性高、兼容性高。 |
表5. FiniGet分必得®T细胞激活磁珠产品选购指南
| 产品定位 | 人T细胞激活磁珠 | 小鼠T细胞激活磁珠 |
|---|---|---|
| 产品货号 | CF0043/ CF0018 | CF0019/ CF0029 |
| 产品名称 | 人CD3/CD28 T细胞激活磁珠 | 小鼠CD3/CD28 T细胞激活磁珠 |
| 规格 | 50 μg / 100ug/500ug | 50 μg / 100ug/500ug |
| 激活能力 | Up to 2×10⁷ cells / Up to 1×10⁸ cells | Up to 2×10⁷ cells / Up to 1×10⁸ cells |
| 有效期 | 2~8℃保存，有效期1年。 | 2~8℃保存，有效期1年。 |
| 产品特点 | 操作简单：磁珠清洗后即可加入细胞，且激活及扩增过程中无需移除；激活效率高：磁珠激活后，48小时检测CD25⁺CD69⁺ T细胞占比75.81%；扩增稳定：激活后T细胞可在体外培养至21天，扩增倍数>1000倍。 | 操作简单：磁珠清洗后即可加入细胞，且激活及扩增过程中无需移除；激活效率高：磁珠激活后，48小时检测CD25⁺CD69⁺ T细胞占比86.69%；扩增稳定：激活后T细胞可在体外培养至21天，扩增倍数>1000倍。 |
| 适用范围 | 适用于外周血单核细胞（PBMC）或T细胞亚群：包括CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞或CD8⁺ T细胞。 | 适用于小鼠脾细胞或T细胞亚群：包括 CD3⁺ T细胞、CD4⁺ T细胞或CD8⁺ T细胞。 |
四、FiniGet分必得®性能验证数据
FiniGet分必得®产品在研发过程中经过了严格的性能验证，以确保其分选效果能够满足科研用户的预期。以下数据展示了其在分选纯度的表现。
小鼠T细胞阴选试剂盒测试数据
据中山大学中山眼科中心客户反馈，使用FiniGet分必得®小鼠CD3分选试剂盒（阴选）（130-6001）从C57BL/6小鼠脾脏细胞中分选T细胞亚群，通过流式细胞术检测分选后细胞组分的纯度。结果显示，分选前CD3⁺ T细胞占比27%，分选后纯度可达99%;
据广州医科大学客户反馈，使用FiniGet分必得®小鼠CD4分选试剂盒（阴选）（130-6002）从C57BL/6小鼠脾脏细胞中分选T细胞亚群，通过流式细胞术检测分选后细胞组分的纯度。结果显示，分选前CD4⁺ T细胞占比13.4%，分选后纯度可达98%;
据广州中医药大学客户反馈，使用FiniGet分必得®小鼠CD8分选试剂盒（阴选）（130-6003）从C57BL/6小鼠脾脏细胞中分选T细胞亚群，通过流式细胞术检测分选后细胞组分的纯度。结果显示，分选前CD8⁺ T细胞占比7%，分选后纯度可达95%;
人T细胞阴选试剂盒测试数据
据深圳工业客户反馈，使用FiniGet分必得®人CD3分选试剂盒（阴选）（120-6001）从人PBMC样本中分选T细胞亚群，通过流式细胞术检测分选后细胞组分的纯度。结果显示，分选前CD3⁺ T细胞占比68.75%，分选后纯度可达99.35%;
据深圳湾实验室客户反馈，使用FiniGet分必得®人CD4分选试剂盒（阴选）（120-6002）从人PBMC样本中分选T细胞亚群，通过流式细胞术检测分选后细胞组分的纯度。结果显示，分选前CD4⁺ T细胞占比50%，分选后纯度可达93.86%；
据中山大学附属肿瘤医院客户反馈，使用FiniGet分必得®人CD8分选试剂盒（阴选）（120-6003）从人PBMC样本中分选T细胞亚群，通过流式细胞术检测分选后细胞组分的纯度。结果显示，分选前CD8⁺ T细胞占比40%，分选后纯度可达94%。
人T细胞阳选磁珠测试数据
据深圳湾实验室客户反馈，使用FiniGet分必得®人CD3、CD4、CD8分选磁珠（阳选）从人PBMC样本中分选T细胞亚群。结果显示，FiniGet分必得®人CD3纯度可达98.01%，CD4、CD8分选磁珠在分选后细胞的纯度、回收率及细胞活率方面均表现良好，可与同类产品性能相当。
五、上下游实验衔接与整体解决方案
成功进行细胞分选仅是实验链条的关键一环。为支持完整的科研流程，信天翁生物围绕FiniGet分必得®产品线构建了从上游样本制备到下游功能分析的解决方案。
上游样本制备
在进行T细胞分选前，从全血或组织中制备高活性的单细胞悬液是首要环节。常用的方法包括PBMC分离，即利用密度梯度离心（Density Gradient Centrifugation）法从外周血中分离单个核细胞。信天翁生物提供淋巴细胞分离液（货号：100-306）等配套试剂，确保上游样本制备的标准化。
T细胞激活与扩增
在获得纯化的T细胞后，T细胞激活是许多研究（如CAR-T、CAR-NK疗法开发、T细胞功能鉴定）的关键步骤。为满足此需求，信天翁生物提供了与分选试剂盒配套的T细胞激活磁珠（货号：CF0019/ CF0029/CF0043/CF0018）。其表面偶联了抗CD3和抗CD28抗体，可模拟抗原呈递细胞提供的双信号，高效激活T细胞。经激活磁珠处理后，T细胞可稳定扩增，在体外培养至21天扩增倍数可超过1000倍，为后续T细胞培养、免疫细胞共培养或功能杀伤实验提供充足的细胞来源。
表6. FiniGet分必得®相关配套产品信息
| 产品名称 | 货号 | 规格 |
|---|---|---|
| 5 mL金属磁力架 | 140-2000 | 1个 |
| SepAid-15 外周血分离管 | 140-2010 | 25管/100管 |
| SepAid-50 外周血分离管 | 140-2011 | 25管/100管 |
| 淋巴细胞分离液 | 100-306 | 250mL |
| 细胞分选缓冲液 | 140-2001 | 500ml |
通过整合上游的样本制备、核心的免疫磁珠分选以及下游的T细胞激活与培养，信天翁生物旨在为科研人员提供一套完整、高效、稳定的广州细胞分选解决方案。
该试剂盒采用免疫磁珠分选中的阴性分选技术。它利用生物素标记的抗体混合物来识别并标记样本中的所有非目的细胞，随后加入链霉亲和素包被的磁珠来结合这些抗体，从而在非目的细胞上形成磁力标记。当试管置于磁力架上时，这些被标记的非目的细胞被吸附在管壁，而未被标记、纯净的目的细胞则保留在上清液中，通过倾倒即可收集。
核心优势在于“无痕”。阴性分选过程中，目的T细胞全程不与任何抗体或磁珠直接接触，因此其表面抗原表位和内部信号通路均不受干扰，能最大程度地维持细胞的原始静息状态和生物学功能。这对于后续对细胞状态敏感的T细胞激活、长期培养、细胞分化研究或单细胞测序等实验尤为关键，避免了因抗体结合导致的非特异性激活或信号干扰。
能。阴性分选的效果主要取决于抗体混合物对杂细胞的去除效率，因此尤其适合低丰度目的细胞的分选。客户实测数据显示，在小鼠CD8⁺ T细胞起始占比仅为4%-7%的低丰度样本中，FiniGet分必得®试剂盒分选后纯度仍可达到92%-95%。
在阴性分选流程中，纯度和回收率通常呈反比关系。若实验需要优先保证纯度，可严格按说明书操作，仅收集一次上清液。若希望在获得高纯度细胞的同时提高细胞得率，可在首次分离后，将原始试管从磁力架上取下，加入缓冲液重悬管壁细胞，再次置于磁力架进行第二次分离，并将两次收集的上清液合并。需注意，第二次收集的细胞组分纯度可能略低于第一次。
可以。通过FiniGet分必得®无柱阴性分选获得的T细胞，表面未结合任何磁珠或抗体，因此非常适合直接进行流式细胞术分析（无需担心抗体竞争结合位点）或进行各类功能实验，如T细胞激活、T细胞培养、免疫细胞共培养或用于单细胞测序等。细胞可立即用于实验，无需额外的磁珠解离步骤。
FiniGet分必得®无柱阴性分选试剂盒提供多种规格，其分选能力覆盖了从1×10⁸到1×10⁹细胞的不同范围。用户可根据实验需求和样本量选择合适的规格。具体操作时，请参照对应规格的说明书调整试剂用量和缓冲液体积。
如果分选后的细胞计划用于后续培养或功能实验，强烈建议在超净工作台内进行所有操作，并确保使用的缓冲液、试管等耗材均为无菌状态。若分选后细胞仅用于裂解进行RNA提取或流式固定检测，则可在常规实验台操作，但仍需注意避免样本间的交叉污染。
咨询热线：400-090-1923
品牌：FiniGet分必得®｜无柱阴性分选，温和获取高活性免疫细胞
出品：信天翁生物科技（广州）有限公司
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